肺炎链球菌荚膜改良染色法研究

目的:探索一种新的细菌荚膜改良染色法,提高细菌荚膜染色质量。方法:涂片用A液60℃水蒸汽蒸染、B液媒染、C液固定脱色、D液复染。结果:改良法菌体紫红色,背景浅蓝,荚膜无色透明,涂片背景干净,菌体、荚膜、背景三者对比明显。结论:改良法荚膜染色荚膜清晰,菌体与荚膜之间对比明显,方法简便,重复性好,便于批量教学标本制作。

细菌荚膜染色的改良

荚膜染色是细菌鉴定的常用技术之一，笔者在传统方法的基础上经过多次试验得出一种方法简便，染色后荚膜清晰、结果稳定，染色标本存放三年仍保持良好效果，现报道如下。

两种细菌荚膜染色方法之比较

目的比较改良Hiss染色法和石炭酸复红法对肺炎链球菌的荚膜染色。方法用改良黑斯染色法和石炭酸复红染色法对肺炎链球菌进行荚膜染色,用光学显微镜观察结果。结果改良黑斯染色法染色后肺炎链球菌菌体呈蓝紫色,荚膜呈白色透明状,背景呈淡蓝色,菌体和荚膜,荚膜和背景之间反差明显。石炭酸复红染色法结果显示,其背景粉红色,菌体红色,荚膜区域不着色。与改良黑斯染色法比较,荚膜和背景之间反差略逊色。结论改良Hiss法是简便易行的荚膜染色方法,易于在实验教学中推广使用。

肺炎链球菌荚膜教学标本的制作方法研究

目的探索并优化肺炎链球菌荚膜教学标本片的制作条件和染色过程,以期找到适合我校荚膜教学标本片需求的制作和保存方法,提升微生物实验课堂的教学质量。方法将肺炎链球菌传代活化后制成悬液,以腹腔注射法(0.2 ml悬液)感染10只昆明小鼠并传代培养,提取发病待濒死小鼠的腹腔液涂片,分别使用石炭酸复红染色法和改良Hiss荚膜染色法对其进行染色,从菌体形态、数量、荚膜大小、染色效果等方面综合比较两种染色方法的差异。最后将镜检合格的标本用中性树胶封固,贴上标签后保存备用。于2018年12月,抽查我校2017年12月使用改良Hiss荚膜染色法所染制的35片标本片,评估标本片的质量。结果随着传代的进行,受染小鼠体内的肺炎链球菌增多,荚膜增大。传代两次即可见宽大的荚膜,且第二次传代感染实验小鼠的发病时间明显缩短,两次感染发病时间分别为10~12 h和8~10 h。同传统的石炭酸复红染色法比较,改良Hiss荚膜染色法所染制的标本,背景均匀,染料颗粒少,菌体呈现深紫色,同淡紫色背景对比明显。同时,抽查已保存1年的改良Hiss荚膜染色法所染制的标本共35片,抽查结果表明,改良Hiss荚膜染色法制作、保存的标本荚膜仍清晰可见,无褪色和霉变现象,标本片完好率达到100%。结论在实际教学中,小鼠体内传代两次即可观察到明显的荚膜,改良Hiss荚膜染色法的染色效果优于传统的石炭酸复红染色法,且封片保存的标本可反复多次使用,能满足我校教学需要。

几种细菌染色方法的改良

细菌是一类原核细胞型微生物。因菌体小半透明，要想更清楚地观察其大小和形态，需经染色和显微镜放大后才能看到。常用的细菌染色法有单染法和复染法。复染法是用两种以上的染料染色，可将细菌染成不同颜色，除可观察细菌的形态外还能鉴别细菌。主要有革兰染色法、抗酸染色法、特殊染色法.笔者为了克服传统染色方法存在的不足，将革兰染色法、抗酸染色法、荚膜染色法、