改良的硝酸脱钙液HE制片方法探讨

脱钙是制作骨组织切片的重要环节,脱钙液的选择与脱钙速度和骨组织切片染色质量密切相关.脱钙时酸性脱钙液时间长,对骨组织形态结构侵蚀较大,即使脱透,制片模糊,但脱钙时间短,组织脱钙不彻底,组织坚硬,难以制片,常常延误诊断.我院采用改良的硝酸脱钙液用于骨组织脱钙,该液既不损害骨组织结构,也不影响染色效果,简化步骤,缩短时间.

不同脱钙方式对骨组织样本不同病理分析的影响

骨与软组织肿瘤生物学特性复杂,在临床病理工作中有时依据形态学较难做出准确的病理诊断,需行免疫组化、FISH、PCR、Sanger测序及NGS等检测^([1])。骨组织质地坚硬,应使用脱钙液将组织软化后制片。目前,临床使用较多的仍为混合酸性脱钙液,其脱钙速度快,但易对组织抗原及DNA造成不可逆的损伤;EDTA性质温和,对组织抗原及核酸保存较好,但缺点是脱钙时间久且效果差。有研究显示改良EDTA常温处理骨髓样本20~24 h,HE染色佳,免疫组化染色强度适中,定位准确^([2])。本科室采用酸性脱钙液和改良EDTA两种脱钙液通过5种不同的脱钙条件,寻找出最佳的脱钙方法,现报道如下。

骨及钙化组织切片的复方脱钙液的配制及脱钙方法

骨及钙化组织非常坚硬，将其制成几微米薄切片难度较大。常用的方法是先脱钙，使组织变软后再切片，所以脱钙是非常关键的技术。目前使用的脱钙剂多为无机强酸类制剂，虽脱钙效果较好，但常造成组织形态，特别是细胞结构的破坏，影响骨组织形态观察和研究。为此，我们使用复方脱钙液脱钙，不仅能够保持组织形态良好，亦能用于特殊染色及切片，现介绍如下：

骨组织脱钙方法探讨

目的比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力和脱钙后HE染色效果,寻找一种最佳的骨组织脱钙方法。方法通过查阅文献资料,把文献报道的3种相对较理想的脱钙液用于临床病理骨组织脱钙中,对比3种脱钙液对骨和骨髓组织常规病理切片质量和HE染色效果。结果 3种脱钙液脱钙时间的比较,甲酸-甲醛脱钙液>改良Jenkins脱钙液>硝酸-甲醛脱钙液。3种脱钙液脱钙效果的比较,硝酸-甲醛脱钙液>改良Jenkins脱钙液>甲酸-甲醛脱钙液。3种脱钙液对组织损伤的比较,硝酸-甲醛脱钙液>甲酸-甲醛脱钙液>改良Jenkins脱钙液。结论改良Jenkins脱钙液对组织损伤较小,脱钙效果充分,适当缩短脱钙时间,切片染色质量上乘,可以作为一种相对理想的骨组织脱钙剂推广应用。

改良Jy-II脱钙液在凝血块制片工作中的应用

目的 探讨改良Jy-II脱钙液在凝血块制片工作中的应用。方法 收集230个含有大量凝血块的蜡块分成两组,一组选取其中的30个不做任何处理做对照观察,另一组选取剩余的200个采用改良的Jy-II脱钙液处理后,观察切片的染色情况。结果 经改良的Jy-II脱钙液处理后凝血块的蜡块制成的切片完整率达97.5%(195/200);平整率达100%(200/200);脱片率为0%(0/200);空洞率为0%(0/200);组织切片的优良率达94.5%(189/200)。不经处理的对照组的蜡块制成的切片,完整率达33.33%(10/30),平整率26.67%(8/30),脱片率为50%(15/30)。空洞率为83.33%(25/30),组织切片的优良率达1.33%(1/30)。结论 经改良的Jy-II脱钙液处理后的凝血块的蜡块制成的切片组织结构保持完整,切片平整,无脱片,无空洞,染色效果满意,满足病理诊断。