牛支原体改良培养基培养效果观察

为了提高牛支原体的培养效率及缩短培养时间,在常用牛心汤培养基基础上进行了改良,将配方中原有牛心汤进行了2倍浓缩并加入了DMEM和牛肺消化液,利用活菌计数法、菌体蛋白测定法、OD值测定法对牛支原体新疆分离株在改良后的培养基中不同培养阶段的生长滴度即颜色变化单位(ccu)、菌体蛋白量及OD值进行了测定。结果表明,在培养了24、48、72、96h后,牛支原体在改良培养基B中的平均生长滴度最高,达到1.0×1010 ccu/mL,与菌体蛋白量和OD值的测定结果相符合,表明改良培养基B较普通牛心汤培养基培养效率更高,为牛支原体的大量培养和灭活疫苗研究提供了参考数据。

解脲脲原体液体培养基改良后的效果评价

目的对现有解脲脲原体(Uu)液体培养基进行改良,改善液体培养法较高的假阳性和(或)假阴性率,探寻一个简便、可靠的临床检测Uu的方法。方法向商品化Uu液体培养基中增添头孢匹罗并下调p H值至6.0后作为改良培养基。以固体培养法为金标准,用原液体培养基(包括未过滤组、过滤组)和改良培养基平行检测76例临床标本,通过敏感性、特异性、Kappa值及预测值等指标对不同液体培养基的培养效果进行评价。结果固体培养法的阳性检出率为76.3%(58/76)。以固体培养结果为金标准,传统液体培养法未过滤时的敏感性(98.3%)高,特异性(55.6%)低,假阳性率(44.4%)高;过滤后其假阳性率(11.8%)降低,假阴性率(25.9%)升高;而改良培养基的敏感性(94.8%)、特异性(83.3%)、阳性预测值(94.8%)及阴性预测(83.3%)均较高。结论改良后的液体培养基抑制杂菌效果较好,其检测结果与固体培养结果一致性较高,且改良步骤简单,具有一定的临床应用推广潜质。

用中药改良血标本双相培养基的实验研究

目的:寻找一种适合各级医院尤其是基层医院使用,能显著提高血标本细菌检出阳性率和缩短检验时间的优质血标本培养基。方法:将90份模拟血标本分别接种于枣豆双相培养基与普通双相培养基,并进行比较。结果:多种细菌在枣豆双相培养基上均较普通双相培养基生长良好。经McNemarχ2检验,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:用枣豆双相培养基进行血标本细菌培养,可大大提高血标本细菌检出的阳性率和缩短检验时间,从而快速做出病原学诊断。

改良格拉纳达培养基分离奶牛乳房炎奶样中无乳链球菌的效果评价

【目的】探索一种适合奶牛乳房炎奶样中无乳链球菌高效分离、鉴定的培养基,对格拉纳达培养基(Granada medium)进行改良,用其分离奶牛乳房炎奶样中无乳链球菌,并进行效果评价。【方法】改良格拉纳达培养基(Modified Granada medium,MGM)的成分为示蛋白胨、玉米淀粉、葡萄糖、丙酮酸钠、盐酸半胱氨酸、硫酸镁、对氧氮己环丙磺酸(MOPS)、磷酸氢二钠、甲氨蝶呤钠、结晶紫和琼脂粉。用MGM、改良爱德华培养基(Modified Edwards Medium,MEM)和血琼脂(Blood Agar,BA)三种培养基对187份奶牛隐性乳房炎奶样进行无乳链球菌分菌培养,采用PCR方法鉴定分离菌株,从而评价三种培养基在分离奶样中无乳链球菌的特异性和敏感性。【结果】在乳房炎无乳链球菌分离中,MGM、MEM和BA的特异性分别为100%、75.0%和18.2%,敏感性分别为88.0%、53.2%和29.1%。MGM作为选择、鉴定培养基,利用无乳链球菌产生红-橙色色素的特性,通过肉眼观察菌落颜色,一步程序就可以鉴定出无乳链球菌。【结论】该方法为奶牛乳房炎奶样中无乳链球菌的分离提供了一种快捷、简便的新方法。

改良选择性培养基在侵袭性真菌感染诊断中的探讨

目的通过改良培养基的营养和抑制能力,提高常规送检痰标本中真菌的检出率,为临床早期监测、诊断提供依据。方法通过观察白假丝酵母菌和烟曲霉标准菌株开始生长的时间、菌株开始产孢的时间及产孢时菌落直径,平行比较改良选择性培养基(Medium B)与实验室常规培养基[马铃薯培养基(PDA)、沙保弱培养基(SDA)、科马嘉显色培养基(CHROMagar)]对真菌检出能力的差异,并比较添加抗菌药物的Medium B(Medium B+)和CHROMagar平板抗污染菌的能力。实施临床血液恶性肿瘤和造血干细胞移植(HSCT)患者痰标本的随机跟踪分析。结果不同种类培养基真菌菌落开始生长、产孢以及接种后同一时间菌落直径即真菌分离能力由高至低依次为Medium B>PDA>SDA>CHROMagar;Medium B+能有效抑制痰标本中常见的致病菌,有利于痰标本中真菌的分离;随机跟踪的待检标本,有1例只在Medium B+中被检出。结论若选择一种选择性培养基用于血液恶性肿瘤和HSCT患者痰标本真菌的常规检测,Medium B+较佳;为了提高真菌检出率和准确性,推荐同时应用Medium B+和CHROMagar。

异源表达脂肪酶的重组酵母筛选培养基的改良

在脂肪酶产生菌的筛选中,最常用的方法是三丁酸甘油酯琼脂平板透明圈法和橄榄油琼脂平板变色圈法。而传统的三丁酸甘油酯平板缺乏有效营养成分,重组酵母无法生长;橄榄油平板灵敏度较低,低脂肪酶活力的重组酵母不能产生变色圈,这给产脂肪酶基因工程菌的鉴定带来了困难。本研究在三丁酸甘油酯平板的基础上,添加适合酵母生长的营养成分,获得了新的改良培养基;重组酵母在该培养基上生长良好、水解圈清晰,检测脂肪酶灵敏度高。

拉萨地区制作改良罗氏培养基的条件探讨

目的:利用蒸汽凝固器在拉萨地区制作改良罗氏培养基的温度和时间设定值,探索适合拉萨地区改良罗氏培养基制作的条件。方法:利用标准配制改良罗氏培养基液,以推荐的85℃的温度50 min的时间为基础,设置不同的温度和时间进行比对,同时通过无菌试验和标准结核菌株、试验结核菌株生长试验得出适合拉萨地区的温度和时间。结果:标准配制的改良罗氏培养基液,蒸汽凝固器采用三次凝固,梯度提高温度的方法。第一次凝固:72℃50 min 4℃冰箱放置24 h;第二次凝固:78℃30 min 4℃冰箱放置24 h;第三次凝固:82℃50 min,为适合拉萨地区制作改良罗氏培养基的温度和时间。结论:应用蒸汽凝固器采用三次凝固,梯度提高温度的方法将温度设定为72℃~82℃之间耗时72 h制作的改良罗氏培养基无菌试验合格,标准结核菌株及试验结核菌株生长旺盛,适合拉萨地区制作改良罗氏培养基,有实验应用价值。

解脲脲原体改良培养基效果比较

目的比较解脲脲原体改良培养基、原 Uu液相培养基及法国生物 -梅里埃 IST培养基 (IST培养基 )分离培养效果。方法 10 0例临床标本同时接种上述三种培养基 ,观察并记录解脲脲原体生长时间及阳性数 ,将三种培养基的阳性标本分别接种血平板以判断杂菌的生长情况。结果原 Uu液相培养基、IST培养基、改良培养基对临床标本分离阳性率分别为 37%、43%和 45 % ,改良培养基较原 Uu液相培养基分离率高 (P<0 .0 5 ) ,生长速度快(P<0 .0 5 ) ,抑制杂菌能力强 (P<0 .0 5 )。同进口 IST培养基相比 ,差别没有显著性 (P>0 .0 5 )。结论改良培养基同原 Uu液相培养基相比具有分离阳性高、生长速度快及抑制杂菌能力强等优点 ,达到 IST培养基同等效果。

改良培养基制备A群链球菌制剂及其抗肿瘤活性研究

目的用改良培养基研制A群链球菌制剂,并研究其半数致死量(LD50)和抗肿瘤活性。方法用改良牛肉汤培养基培养A群链球菌弱毒株,在此基础上制备A群链球菌制剂,并对其毒性和抗肿瘤活性进行初步研究。结果A群链球菌制剂静脉注射的LD50为170.7mg/kg,腹腔注射的LD50为804.1mg/kg;A群链球菌制剂对动物移植性肿瘤EAC及HepA均有明显的抗肿瘤作用,生命延长率分别达到63.38%和59.12%。结论A群链球菌在改良牛肉汤培养基上生长良好,所得制剂的抗肿瘤活性明显。

改良卵黄培养基培养空肠弯曲菌的生物学性状初步研究

目的 探索改良弯曲菌卵黄培养基对空肠弯曲菌生长以及生物学性状的影响。方法 采用改良布氏无血琼脂培养基以及改良弯曲菌蛋黄培养基在相同条件下培养空肠弯曲菌 ,观察其生长状况及生物学性状。结果 改良弯曲菌卵黄培养基培养的空肠弯曲菌生长良好 ,性状典型。结论 改良弯曲菌卵黄培养基可用于空肠弯曲菌的大量繁殖 。

柯索夫(Korthof)培养基的改良与干燥

钩端螺旋体病的病原体分离培养,Korthof培养基已使用多年,效果尚可。Babuidieri氏改进的无钙Korthof培养基虽有避免产生沉淀等优点,但制备手续仍很繁琐,尤其现场工作操作极为不便,致使钩端螺旋体病的广泛调查研究受到一定限制。另外。

改良琼脂培养基稀释法在抗真菌药物体外敏感性试验中的应用研究

目的:初步观测改良琼脂培养基稀释法和微量液体培养基稀释法在测定白色念珠菌对伊曲康唑体外敏感性上的差异。方法:采用CLSI M27-A2推荐的微量液体培养基稀释法和改良琼脂培养基稀释法同时测定20株临床近期分离无重复白色念珠菌对伊曲康唑的体外敏感性。结果:两种方法对检测的20株真菌的体外最小抑菌浓度一致。结论:改良琼脂培养基稀释法有可能成为一种评价抗真菌药物体外敏感性的一种直观、简单、快速的方法。

改良B5培养基对紫香无核生根的影响

一、材料与方法 1．实验材料 以石河子农科中心组培室提供的紫香无核为试材。紫香无核是选育的无核品种，含糖量高，可鲜食，也可用于制干、制汁。

改良MDCK细胞培养基研究进展

根据日本东京临床微生物实验室在《Vaccine》2006年3月刊公布的最新研究结果：Madin Darby犬肾（MDCK）细胞更适合于在不含血清的RPMI 1640培养基生长，即RPMI／SP培养基。

牛支原体改良培养基培养效果观察

为了提高牛支原体的培养效率及缩短培养时间，在常用牛心汤培养基基础上进行了改良，将配方中原有牛心汤进行了2倍浓缩并加入了DMEM和牛肺消化液，利用活菌计数法、菌体蛋白测定法、0D值测定法对牛支原体新疆分离株在改良后的培养基中不同培养阶段的生长滴度即颜色变化单位（ccu）、菌体蛋白量及0D值进行了测定。结果表明，在培养了24、48、72、96h后，牛支原体在改良培养基B中的平均生长滴度最高，达N1．0×1010ccu／mL，

重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶蛋白在改良M9培养基中的诱导表达

以重组枯草芽孢杆菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨连接酶,Glutamine Synthetase,GS EC6.3.1.2)蛋白表达宿主菌株BL21(DE3)(pET3C/谷氨酰胺合成酶)作为研究对象,借助SDS PAGE分析方法,对于用乳糖诱导由T7lac启动子控制的重组目的产物蛋白的各种基本参数进行了初步的研究.研究了最佳本底培养基、最佳碳源及其最佳添加比例、碳源与诱导物的最适组合,并探索了适用于改良型培养基的诱导参数.实验结果表明,对于重组目的产物蛋白,改良型M9培养基完全可以替代LB培养基;以甘油为碳源,可以避免葡萄糖对T7lac启动子的屏蔽作用.以乳糖为诱导物,目的蛋白的表达量、可溶性及酶活与以IPTG为诱导物基本接近.研究结果为酶法合成谷氨酰胺的工业化生产提供了一定的参考.

新型改良罗氏培养基与罗氏酸基检测结核分枝杆菌比较

目的研究一种快速、简单、廉价可靠的新型培养基,缩短结核分枝杆菌的培养时间,提高阳性率,以便广泛普及到基层单位。方法在改良酸性L-J培养基的成分上,试用猪肺肉汤替代蒸馏水加植物血凝素(PHA)、小牛血清、维生素E等混合物制成的固体培养基(简称新型改良罗氏培养基),对10例标准菌株及73例患者涂片阳性的标本进行培养,同时与改良罗氏酸性培养基作比较。结果 73例患者的结核分枝杆菌在新型改良罗氏培养基上实验组和对照组生长7～27 d,平均(13.9±4.4)d,实验组菌落粗大明显,对照组菌落细小变化不大。在改良罗氏酸性培养基上生长9～30 d,平均(23.1±5.1)d,菌落细小变化不大。结核分枝杆菌在不同培养基上生长时间差异有统计学意义(P<0.01)。10例标准菌株在改良罗氏酸性培养基生长时间平均7 d,形成针尖状菌落,新型罗氏酸性培养基实验组和对照组生长时间均为4 d,形成点状菌落,实验组放置7 d粗大"菜花"状菌落更明显。结论新型改良罗氏培养基不仅能缩短结核分枝杆菌的生长时间,而且使结核分枝杆菌生长旺盛,能及早做出药敏结果,为临床及早诊断和用药提供科学的数据。

应用改良马丁培养基检测支原体的敏感性

支原体的潜在污染已成为疫苗生产和各种细胞培养工作的严重问题。检测支原体的方法有:培养法,DNA 荧光染色法,间接免疫荧光染色法和同位素掺入法等。我们采用改良马丁培养基培养法,对40个样品进行了检测,结果如下。待检样品为:小牛血清8批,原代细胞10批,传代细胞14批,其它组织培养物8批。