改良W-S银染法与传统W-S银染法检测幽门螺杆菌的对比观察

目的对比观察改良W-S银染法与传统W-S银染法检测幽门螺杆菌的临床效果。方法对380例因消化道症状在本院就诊的患者采用改良W-S银染法与传统W-S银染法检测Hp,同时进行快速尿素酶试验(RUT)检查,RUT法和改良W-S法或传统W-S法之一同时阳性时诊断为标准Hp阳性。结果 380例患者中共318例检测出Hp感染,感染率为83.7%,其中消化性溃疡组的感染率最高,为98.1%,显著高于胃炎组和胃癌组的Hp感染率,差异有统计学意义(P<0.05);改良与传统W-S法检测Hp感染的阳性率分别为82.1%和79.2%,组间比较差异无统计学意义(P>0.05);改良W-S法的敏感性为98.1%,特异性为91.9%,符合率为97.1%;传统W-S法的敏感性为94.7%,特异性为85.5%,符合率为93.2%,组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论两种W-S银染法检测幽门螺杆菌的效果相近,与传统W-S银染法比较,改良W-S银染法试剂配制更为简便,组织着色牢固稳定,而且成本低廉,值得临床推广应用。

改良聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA

本文介绍了应用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的改进方法。与以往方法相比,本方法从配制凝胶储备液,无需封口的水平灌胶,适当地提高电泳的电压梯度,采用改良银染法检测,省却凝胶固定,银染法DNA的纯化方法,及溴化乙锭染色法的操作等一系列改进措施,使聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的操作得到简化,更便捷,并减小了对人与环境的毒害作用。

人卵巢实体肿瘤组织中端粒酶活性的两种检测方法的相关性研究

目的:建立人卵巢实体肿瘤组织中端粒酶活性的半定量诊断方法。方法:选取2000年9月至2002年2月42例卵巢肿瘤组织(其中包括19例卵巢恶性肿瘤、1例卵巢交界性肿瘤,22例卵巢良性肿瘤)及4例正常卵巢组织的手术标本,分别采用TRAP-银染法和TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,并进行比较。结果:两种方法检测19例恶性卵巢肿瘤、23例良性卵巢肿瘤及4例正常卵巢组织中端粒酶的活性,经χ2检验差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:TRAP-ELISA之半定量的检测方法可用于临床对早期卵巢肿瘤进行诊断和鉴别诊断,对卵巢肿瘤患者监测、随访和判断预后,为一种较理想和实用的检测方法,值得推广使用。

消化道恶性肿瘤端粒酶检测及其临床意义研究

目的 :探讨端粒酶活性在消化道恶性肿瘤中的表达意义。方法 :采用改良TRAP -银染法 ,检测 10 0例消化道恶性肿瘤术前内镜活检标本及 2 0例正常消化道组织中端粒酶活性 ,并同时与病理检查结果对照分析。结果 :10 0例消化道恶性肿瘤活检标本有 87例端粒酶阳性 ,阳性率 87% ,其中食道癌端粒酶阳性率 86 1% ( 3 1/3 6) ,胃癌为 85 4% ( 3 5 /4 1) ,大肠癌为 91 3 % ( 2 1/2 3 ) ;2 0例正常消化道组织均为阴性。与病理结果比较有较好相关性 ,并能检出某些病理术前不能检出的活检标本 ( 5 /11) ,与病理活检有互补作用。端粒酶活性表达与肿瘤的组织学类型 ,分化程度及体积大小无显著相关性 ,与肿瘤的临床分期及有无转移显著相关。结论 :端粒酶活性检测对消化道恶性肿瘤的诊断及预后估计有重要价值 ,是一个敏感性和特异性较高应用前景较好的肿瘤标记物。

端粒酶活性检测的临床应用

本研究采用改良的ＴＲＡＰ—银染法，检测了临床外科切除肝癌组织１５例，端粒酶阳性率为８６．６％（１３／１５）；邻近肝组织１５例，２例阳性（２／１５）；５例肺癌肺纤维支气管镜刷落细胞肺癌５例，阳性４例，肺炎７例均为阴性；肿瘤细胞株２例则为阳性。结果表明，肿瘤细胞的端粒酶活性明显高于正常细胞。在极少量脱落细胞中检测端粒酶活性也同样得到较满意的结果，提示我们的实验方法敏感、可靠、简便易行。

端粒酶在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达及意义

目的探讨年龄相关性白内障及正常晶状体上皮细胞的端粒酶活性的表达及其在年龄相关性白内障发生发展中的作用。方法采用TRAP-银染法及TRAP-ELISA两种方法检测9例年龄相关性白内障、3例正常晶状体上皮细胞的端粒酶活性。结果9例年龄相关性白内障及3例正常晶状体上皮细胞中端粒酶均呈阳性,年龄相关性白内障组晶状体上皮细胞中端粒酶活性明显低于正常组,经统计学分析差别具有显著意义(P<0.05)。结论端粒酶活性的降低可能是年龄相关性白内障晶状体上皮细胞发生凋亡的一个重要机制,端粒酶在年龄相关性白内障的发生发展中起着重要的作用。

不同食管病变组织中端粒酶活性的测定

目的 探讨不同食管组织病变中端粒酶活性检测的意义及其与临床病理因素的关系。方法 采用TRAP 银染法 ,对38例食管癌组织、15例不典型增生组织及 12例正常食管粘膜组织进行端粒酶活性检测。结果 38例食管癌组织中 ,32例端粒酶活性呈阳性 ,阳性检出率为 84.2 1% ;15例不典型增生组织中 ,9例端粒酶活性呈阳性 (其中 8例轻、中度不典型增生中 4例呈阳性 ;7例重度不典型增生中 5例呈阳性 ) ,阳性检出率为 60 % ;12例正常食管粘膜组织中 ,仅 1例端粒酶活性呈阳性 ,其阳性检出率为 8.33%。三组比较端粒酶活性检出率均存在显著性统计学差异。结论 端粒酶的激活在食管癌的发生发展中起着重要作用 ,其活性的检测有望成为预测食管癌发生及其诊断的良好指标。

紫杉醇对卵巢癌细胞端粒酶活性影响的研究

目的观察紫杉醇对卵巢癌HO-8910细胞端粒酶活性的影响,以了解紫杉醇抗癌的可能机理。方法1-100nmol/L.紫杉醇处理HO-8910细胞后,用MTT法测定卵巢癌细胞的生长抑制率,TRAP-银染法测定端粒酶活性变化。结果1-100nmol/L紫杉醇对卵巢癌细胞有明显抑制作用,呈时间依赖性及剂量依赖性,紫杉醇处理卵巢癌细胞后,对端粒酶活性的检测结果显示,端粒酶活性下调。结论紫杉醇对卵巢癌细胞具有明显抑制作用,其下调端粒酶活性可能是紫杉醇抗癌作用的重要机理之一。

端粒酶突变体对肝癌细胞端粒酶活性的作用

目的 观察端粒酶突变体对肝癌细胞端粒酶活性和生长抑制的作用。方法 利用质脂体转染法在培养的肝癌细胞中导入端粒酶突变体 ,并与维甲酸和人参皂甙对照 ,利用TRAP 银染方法对不同时期肝癌细胞进行了端粒酶活性的测定 ,并观察各期细胞生长情况。结果 在加入端粒酶突变体后肝癌细胞端粒酶活性明显降低 ,细胞出现明显凋亡现象 ,其作用效果与维甲酸基本相同。结论 端粒酶突变体对肝癌细胞的抑制作用可能是通过抑制端粒酶活性途径实现的。

食管癌活检标本端粒酶活性检测的应用价值

目的：了解端粒酶活性在食管癌、反流性食管炎及正常食管组织内镜活检标本的表达，探讨端粒酶活性在食管癌诊断中的应用价值。方法：应用改良的TRAP－银染法检测31例食管癌内镜活检标本、30例食管炎及22例正常食管粘膜内镜活检标本结果：31例食管癌端粒酶活性阳性表达29例，阳性率93．5％，30例食管炎端粒酶活性阳性表达1例，阳性率0．03％，22例正常对照无1例端粒酶活性阳性，阳性率0％。端粒酶活性与食管癌转移，肿瘤大小和食管癌组织学分级之间无相关性。结论：端粒酶活化在食管癌发生发展中起着重要作用，采用内镜活检标本检测食管癌端粒酶活性，对其诊断提供了新的途径。食管癌内镜活检标本端粒酶活性检测有可能成为诊断食管癌的有用指标。

原发性肝癌组织的端粒酶活性表达的研究

目的 研究原发性肝癌组织端粒酶活性的表达 ,探讨端粒酶活化在原发性肝癌进展中的作用。方法 采用改良 TRAP-银染法检测 30例原发性肝细胞癌端粒酶活性并以 30例癌旁组织作对照。结果 30例原发性肝癌组织中 ,有 2 7例端粒酶表达阳性 ,阳性率为 90 % ,而癌旁组织 10 %表达阳性 ,两组间比较有统计学差异 (P<0 .0 0 1) .结论 端粒酶活性见于绝大多数原发性肝细胞癌 ,可能在其发生发展中起重要作用 。

小鼠卵母细胞及体细胞核移植重构早期端粒酶活性的测定

采用端粒酶重复序列扩增（telomeric repeat amplification protocol,TRAP）-银染法,对小鼠卵母细胞、体内受精胚胎及重构胚的各阶段端粒酶活性进行测定,对PCR产物的电泳条带进行灰度值分析,计算端粒酶总产品总量。结果表明：（1）体内受精胚胎及核移植重构胚各阶段的端粒酶活性随胚胎分裂呈上升趋势,囊胚期最高（P〈0.05）;（2）体内受精胚胎的端粒酶活性高于体细胞核移植重构胚端粒酶活性。同时进行囊胚计数并测定单卵裂球相对端粒酶活性,结果表明：单卵裂球的端粒酶活性呈下降趋势,囊胚期端粒酶活性最低（P〈0.05）。以上结果说明小鼠卵母细胞及体细胞核移植重构胚端粒酶活性变化与细胞发育水平及细胞发育全能性有关。