一氧化氮和M受体在艾灸治疗实验性豚鼠哮喘病中的作用及其相互关系的研究

目的 :观察艾灸治疗实验性豚鼠哮喘病中NO(一氧化氮 )与M受体的相互关系。方法 :采用 50只 2 50～ 3 0 0 g的雄性豚鼠 ,随机分成 :A 健康对照组 ,B 实验哮喘组 ,C 哮喘 +艾灸组 ,D 哮喘 +L NAME组 ,E 哮喘 +L NAME(L 精氨酸甲酯 ) +艾灸组共五组 ,用放射性配基结合实验的方法测定肺组织细胞膜M受体Bmax和平衡离解常数 ,用NO检测试剂盒测各组豚鼠BALF(支气管肺泡灌洗液 )、肺组织、血中NO的含量。结果 :与健康组相比 ,哮喘组豚鼠BALF中NO含量升高 ,肺细胞膜制剂对3H QNB结合的Bmax上升 ;与哮喘组相比 ,哮喘 +艾灸组及哮喘 +L NAME +艾灸组豚鼠BALF中NO含量下降 ,肺细胞膜制剂对3H QNB结合的Bmax降低 ,哮喘 +L NAME组豚鼠BALF中NO含量降低 ,而肺细胞膜制剂对3H QNB结合的Bmax无明显变化。结论 :艾灸“肺俞”等穴可降低哮喘引起的肺组织和肺泡灌洗液中NO水平及细胞膜Bmax的增加 。

一氧化氮和β受体在艾灸治疗实验性豚鼠哮喘病中的作用及其相互关系的研究

为观察艾灸在治疗实验性豚鼠哮喘病中NO(一氧化氮 )与β受体的相互关系 ,采用 5 0只 2 5 0～ 30 0 g雄性豚鼠 ,随机分成 :健康对照组、实验哮喘组、哮喘 +艾灸组、哮喘 +L NAME(L 精氨酸甲酯 )组、哮喘 +L NAME +艾灸组共五组 ,用放射性配基结合实验的方法测定肺组织细胞膜β受体Bmax和平衡离解常数 ,用NO检测试剂盒测各组豚鼠BALF(支气管肺泡灌洗液 )、肺组织、血中NO的含量。结果 :与健康组相比 ,哮喘组豚鼠BALF中NO含量升高 ,而肺细胞膜制剂对3H DHA结合的Bmax下降 ;与哮喘组相比 ,哮喘 +艾灸组豚鼠BALF中NO含量下降 ,而肺细胞膜制剂对3H DHA结合的Bmax上升 ;与哮喘组相比 ,哮喘 +L NAME组豚鼠BALF中NO含量降低 ,而肺细胞膜制剂对3H DHA结合的Bmax无明显变化 ;与哮喘组相比 ,哮喘 +L NAME +艾灸组豚鼠BALF中NO含量下降 ,而肺细胞膜制剂对3H DHA结合的Bmax增加。表明哮喘豚鼠及对其艾灸治疗过程中 ,NO与β受体Bmax呈负相关 ,而L NAME对β受体Bmax无明显影响。

^(125)I-VIP与小鼠肝癌H22细胞受体结合特性研究

目的 探讨放射性碘标记血管活性肠肽(VIP)与肝癌细胞的体内、外结合特性。方法 氯胺 T法标记、Seph adexG 5 0柱层析分离纯化制备1 2 5I VIP。通过饱和结合实验与竞争结合实验,评价1 2 5I VIP与鼠H2 2肝癌细胞受体的体外介导结合特性;进行体内动态生物分布及非标记VIP竞争分布实验,观察1 2 5I VIP在荷H2 2小鼠体内尤其在移植瘤中的分布变化规律,评价其体内受体结合特性。结果 1 2 5I标记率为73 8% ,1 2 5I VIP比活度18 2TBq mmol,放射化学纯度(RCP)98%。1 2 5I VIP与H2 2细胞受体的结合具有饱和性,Scatchard作图显示为双位点系统,高、低亲和力结合位点的解离常数(Kd)分别为1 74nmol L与2 8 63nmol L ,最大结合容量(Bmax)分别为0 2 7pmol 10 6 细胞与5 75pmol 10 6 细胞,非标记VIP以剂量依赖方式抑制1 2 5I VIP与H2 2细胞结合。各时相肿瘤组织放射性均高于肌肉(P <0 0 5 ,P <0 0 0 1) ,2 0minT NT比值达最大为2 68,肺放射性高于血液与肝脏(P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,体内放射性主要经肾脏排泄;10 μg和40 μg非标记VIP对T NT比值的抑制率分别为2 6 87%与3 5 82 %。结论 1 2 5I VIP在体内、外与鼠H2 2肝癌细胞的结合由受体介导。此结果为进一步应用放射性核素标记VIP靶向诊治肝细胞癌研究提供了理论依据。

EAE大鼠脑组织咪唑受体变化的研究

目的观察炎性脱髓鞘脑病动物模型(EAE)大鼠脑组织咪唑啉2受体(12R)的变化,探讨12R是否参与了炎性脱髓鞘白质脑病的病理过程。方法将大鼠分为EAE模型组及CFA对照组,EAE模型组通过免疫当天予四足垫皮下注射豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)-CFA的方式免疫大鼠,后予腹腔注射NS0.4mL每12h一次,于发病高峰期处死。CFA对照组大鼠通过免疫当天予四足垫皮下注射NS-CFA的方式免疫大鼠,后予腹腔注射NS0.4mL每12h1次,连续19d;所有大鼠均予免疫0,48h腹股沟皮下注射百日咳菌苗0.1mL(1×109菌体)。两组大鼠脑组织12R进行饱和结合试验,检测其密度和亲和力变化。结果 CFA对照组大鼠没有发病,EAE组6只大鼠,发病4只。CFA对照组脑组织12R的Kd和Bmax值分别是3.367±0.94nM和162±22.19fmol·mg-1蛋白。EAE组大鼠脑组织12R的Kd和Bmax值分别是5.416±1.153nM和263.0±31.99fmol·mg-1蛋白;与CFA对照组相比,其受体密度明显上调(n=6,P<0.05),而亲和力明显下降(n=6,P<0.01)。结论炎性脱髓鞘脑病模型EAE大鼠脑内12R受体密度上调,亲和力降低。

大鼠窒息心脏骤停期间心脏和肺脏β肾上腺素能受体的变化

目的 :研究心脏停搏期间机体 β肾上腺素能受体的变化。 方法 :采用放射性配基结合分析方法 ,检测大鼠在窒息心脏停搏期间心、肺 β肾上腺素能受体 (β受体 )的变化。动物随机分为正常对照 (A)、手术对照 (B)、窒息 10min (C)、2 0min (D)和 30min (E) 5组。结果 :心、肺C组 β受体分别为 (34 5 1± 3 2 5 )fmol/mgpr和(2 89 4 6± 19 96 )fmol/mgpr。心、肺D、E组 β受体分别为 (4 0 96± 2 91)和 (6 4 4 4± 3 2 0 )fmol/mgpr及 (4 2 6 33± 12 0 8)和 (4 5 5 6 7± 2 8 77)fmol/mgpr,与C组比较 ,差异极其显著 (P <0 0 1)。心、肺各窒息组间受体亲和力无明显变化。结论 :在窒息心停早期 ,心、肺β受体数量无明显变化 ,随着心脏停搏时间延长 ,其数量明显增加。

姜黄素对人过氧化物酶体增殖物激活受体γ_1激活作用的研究

目的测定姜黄素(CUR)与人过氧化物酶体增殖物激活受体γ_1(h PPARγ_1)的亲和力和内在活性,确定CUR是否为h PPARγ_1的天然配体。方法通过放射性标记配基竞争结合实验和反式激活报告基因分别检测CUR与h PPARγ_1的结合活性和功能活性。结果 CUR与h PPARγ_1结合的半数抑制浓度(IC_(50))为(8.82±0.74)μmol/L,抑制常数(Ki)为0.72μmol/L;CUR对h PPARγ_1的半数有效浓度(EC_(50))为7.3μmol/L,最大活性倍数(E_(max))为43.3。结论 CUR不仅能与h PPARγ_1受体结合,而且能激活h PPARγ_1,可能是h PPARγ_1的天然配体。