放射性碘标记转铁蛋白体外示踪脊髓内移植的间充质干细胞

目的 :检测间充质干细胞转铁蛋白受体 (TfR)在体外培养及移植入脊髓后的表达 ,进行体外放射性核素示踪研究。方法 :从胎儿血分离培养人间充质干细胞 ,应用流式细胞分析、免疫荧光染色和受体放射性分析鉴定转铁蛋白受体的表达 ,用放射性碘 (12 5I)标记的铁饱和转铁蛋白 [12 5I Tf(Fe) 2 ]作为示踪剂 ,进行体外放射自显影 ,示踪移植于兔正常脊髓内的间充质干细胞 ,并对12 5I Tf(Fe) 2 在脊髓实质的弥散动力学进行研究。结果 :流式细胞分析、免疫荧光染色证实体外培养的人间充质干细胞表达转铁蛋白受体 ,受体放射性分析表明12 5I Tf(Fe) 2 与其受体结合的平衡解离常数 (KD)为 (0 .98± 0 .12 )nmol/L ,最大结合位点 (Bmax)为每个细胞 (10 770 2± 6 2 2 6 )个。免疫荧光染色结果表明间充质干细胞移植于脊髓 2d后转铁蛋白受体表达 ,10d后不表达 ,移植 2d后以12 5I Tf(Fe) 2 为示踪剂进行脊髓切片体外放射自显影 ,获得移植细胞阳性影像。离体脊髓在12 5I Tf(Fe) 2 溶液中体外孵育 ,16h后12 5I Tf(Fe) 2 弥散入全部脊髓实质。结论 :12 5I Tf(Fe) 2 作为示踪剂可以在体外示踪到脊髓内移植 2d后的间充质干细胞 ,TfR和12 5I Tf(Fe) 2 是应用核医学影像进行间充质干细胞移植初期活体示踪可能的生物学标志和示踪剂?

用于放射性砹(碘)标记蛋白质的偶联剂SPC的合成及表征

以5-溴烟酸为起始物,通过3步主要反应合成了一种适用于蛋白质放射性砹(碘)标记的偶联剂——5-(三正丁基锡)-3-吡啶甲酸 N-琥珀酰亚胺酯(SPC),并用核磁共振(NMR)、质谱(MS)、高效液相色谱(HPLC)等进行了表征。以该试剂为双功能偶联剂,实现了IgG的^(125)I标记,标记率达30％以上。标记产物在体外具有较高的稳定性。

一种简便的蛋白质和多肽的放射性碘标记法

一种简便的蛋白质和多肽的放射性碘标记法熊忠白海波（中国科学院西北高原生物研究所，西宁８１０００１）放射性碘标记技术在分子生物学及分子免疫学技术领域中占有重要的地位，它已广泛运用于医学及临床检验中，其原理简单，利用放射性１２５Ｉ原子与蛋白质或多肽氨基酸...

生物分子的放射性碘标记方法研究进展

放射性碘标记靶向分子得到的放射性药物一直是核医学领域的研究热点,放射性碘标记药物在其药代动力学研究方面也有明确的应用需求。放射性碘标记方法有直接标记法和间接标记法,直接标记法具有反应快速、操作简便、放化产率高等优点,但存在适用范围较窄及体内脱碘的问题;间接标记法提高了体内稳定性,但存在反应过程复杂、放化产率偏低的问题。本研究介绍放射性碘标记方法的进展、适用范围以及这些方法的优缺点,并对放射性碘标记方法的发展进行展望,以期为放射性碘标记药物研发和同位素药代动力学研究提供参考。

靶向生长抑素受体SSTR2的新型白蛋白亲和放射性碘标记分子探针的制备与评价

生长抑素受体亚型2(SSTR2)在神经内分泌肿瘤和多种心血管疾病中高表达,是一个非常有吸引力的靶点.基于铜介导下放射性碘离子与苯硼酸底物发生氧化偶联反应的方法,构建了靶向SSTR2的新型放射性碘标记分子探针[^(131)I]IPBA-TATE和[^(131)I]IBA-TATE(对照),并在体外评价了其理化性质及白蛋白结合特性.在BALB/c小鼠中测定其血液末端清除半衰期,并在正常小鼠和AR42J肿瘤模型小鼠中研究其生物分布特性(以每克组织中摄取注射剂量的百分率(%ID/g)为单位).结果表明:[^(131)I]IPBA-TATE的放射性化学产率为(64.0±4.2)%(n=3),在体外具有良好的稳定性和蛋白亲和性;相比于[^(131)I]IBA-TATE,[^(131)I]IPBA-TATE的血液末端清除半衰期延长了60%,为(25.50±3.35)h.在给药后4 h,[^(131)I]IPBA-TATE在AR42J肿瘤中的摄取为(1.21±0.67)%ID/g,具有较高的瘤/肉比(5.30±2.07).可见[^(131)I]IPBA-TATE是一种基于奥曲肽的新型碘标记白蛋白亲和探针,有望用于SSTR2阳性肿瘤的单光子发射计算机断层显像及放射性核素靶向治疗.

放射性碘标记反义寡核苷酸在荷人淋巴瘤裸鼠中的分布及显像研究

目的：探讨用放射性碘标记的框架区(framework region mRNA．FR)mRNA 反义寡核苷酸(antisense oligo-nucleotide，ASON)作为 B 细胞淋巴瘤反义显像剂及反义治疗药物的可能性 方法：通过氯胺-T 法用碘[^(125)I 与碘[^(131)I]标记含酪胺的18聚体寡核苷酸获得^(125)I-或^(131)I-FR-ASON，建立荷人淋巴瘤裸鼠动物模型 将148 kBq^(125)I-FR-ASON(2～μg)经尾静脉注入正常小鼠，于不同时间处死小鼠，测定不同组织及标准源的放射性计数 荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体包裹的3.33 MBq ^(131)I-FR-ASON(7～9μg)，分别于注射后不同时间进行单光子发射计算机断层(single photon emission computer tomographv,SPECT)显像，以脂质体包裹的正义寡核苷酸作为对照，24h 显像后处死裸鼠，取出血液、重要器官和肿瘤组织，测定各组织的放射性计数，并计算每克组织摄取率及肿瘤与非瘤组织放射性摄取比值(T/NT) 结果：^(125)I-FR-ASON 注入正常小鼠体内后1h．各脏器的放射性摄取达高峰，24h 基本清除 肝、胃和肠放射性分布最高，骨、肌肉、脑中放射性分布较少 荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体包裹的^(131)I 标记 ASON后立即用 SPECT 成像仅见肿瘤部位，1和2h 成像可见小踪剂从肿瘤到腹腔，24h 仍可见肿瘤显像 比较24h

聚乙二醇修饰超氧化物歧化酶衍生物的制备及其放射性碘标记

目的制备聚乙二醇(PEG)修饰超氧化物歧化酶(SOD)衍生物并对其进行放射性碘标记。方法将PEG中加入干苯、PEG单甲醚、氰尿酰氯及无水碳酸钾进行活化,并将活化产物逐渐加入到溶解有SOD的pH9.2四硼酸钠溶液中,制备得PEG-SOD衍生物,经葡聚糖凝胶G75纯化后,以氯胺T与碘125化钠进行放射性标记,并计算标记物的比放射性。结果经葡聚糖凝胶G75纯化后PEG-SOD衍生物的蛋白回收率达到74.1%,碘标记的PEG-SOD比放射性平均值为1.47mCi/mg。结论本文建立的PEG-SOD衍生物制备工艺可行,标记的PEG-SOD符合药理学实验要求,可用于药理学的实验研究。

C_(60)吡咯烷苯氮芥的合成和放射性碘标记

为了研究以富勒烯为载体的抗肿瘤药物在生物体内的摄取、分布、代谢情况,利用1,3偶极环加成反应合成了带有抗癌活性药物基团的富勒烯衍生物C60吡咯烷苯氮芥,并用1HNMR、UV、IR等谱学方法对其进行了结构表征,确定了结构,用同位素交换法进行125I标记。结果表明,经过130℃热交换120min后C60吡咯烷苯氮芥的放射性碘标记率可达94%,放化纯度93.7%。

C_(60)衍生物的放射性碘标记

In this paper water-soluble C 60 derivative was iodolabelled radioactively with Iodogen method. The labelled yield was measured by Silica GF254 TLC. The effects of pH value, time, temperature and the amount of Iodogen on the labelled yield were studied. 125 I-C 60 (OH) x O y was purified by Sephadex G-25 column chromatography and then the stability of 125 I-C 60 (OH) x O y was examined. The results showed that the radiochemical purity of 125 I-C 60 (OH) xO y solution with 2% benzylalcohol remained 82.7% after 43h.

放射性碘间接标记血管活性肠肽

目的 研究能有效降低体内脱碘的血管活性肠肽 (VIP)的标记方法。方法 ①标记前体N 琥珀酰亚胺 3 (三正丁基锡 )苯甲酸酯 (ATE) ,得到中间体N 琥珀酰亚胺 3 I(1 2 5I)代苯甲酸酯(S1 2 5IB) :采用Iodogen方法进行放射性碘标记 ,并考察一系列条件对标记率的影响。通过Sep Pak硅胶柱分离得到产物S1 2 5IB ,于 4℃避光保存 2d。标记率和稳定性通过薄层层析 (TLC)方法测定。②S1 2 5IB与VIP的联接 :S1 2 5IB与VIP直接混合得到产物 3 I(1 2 5I)代苯甲酰化血管活性肠肽 (1 2 5IBA VIP)。以反相TLC测定其标记率。产物1 2 5IBA VIP经高效液相层析 (HPLC ,RPC18柱 )分离得到。三氯乙酸(TCA)沉淀法测定1 2 5IBA VIP的体外稳定性。体外生物活性分析通过与细胞株SGC790 1的细胞结合实验测定。结果 ①前体标记结果。室温条件下 ,氧化剂用量约 10 μg ,n(ATE)∶n(Na1 2 5I)为 3～ 8∶1,反应 5min标记率 >96 %。S1 2 5IB在上述条件下较稳定 ,TLC结果显示无明显的放射性杂质产生。②S1 2 5IB与VIP的联接。TLC测定标记率 >75 % ,HPLC示1 2 5IBA VIP的保留时间 (tR)为 13.3min ,S1 2 5IB为 19 6min ,VIP为 8 32min。1 2 5IBA VIP的体外稳定性较好 ,4℃保存 7d后 ,无明显脱碘现象。细胞结合实验结果表明 ,1 2 5IBA

放射性碘标记格列本脲的初步研究

目的:获得髙比活度的核素标记药物。方法:试用无水碘标记法标记磺脲类药物格列本脲,并应用放射配体结合分析法测定大鼠心肌组织膜磺脲类药物受体的特性。结果:所获得的125I-格列本脲放射比活度较高(111GBq/mmol),放化纯度为95.6%,125I-格列本脲可和大鼠心肌组织膜上磺脲类药物受体结合。结论:无水碘标记法是非水溶性物质核素碘标记法的理想方法之一。

放射性碘标记的抗肺癌单克隆抗体在载瘤裸鼠体内的代谢

放射性碘标记的抗人肺癌单克隆抗体2E3和6DI注入载人肺癌移植瘤裸鼠体内,静脉血放射性-时间曲线符合二室开放模型;血放射性清除半减期为3.4d,表观分布容积636ml/kg;标记抗体在体内的脱碘率为18.6％,脱落的放射性碘绝大部分从尿排出。腹腔给药吸收快,半吸收期2.08h,生物利用度89％。^(125)I标记的单克隆抗体注射后1～3d,放射性主要分布在肿瘤、血、肝、脾中,其次为肺、肾、胃、小肠;此后,血和正常组织的放射性下降,肿瘤中的放射性较高。^(131)I标记的单克隆抗体能使移植瘤清晰显像。

玫瑰红的快速放射性碘标记

本文研究了在乙醇-水介质体系中,放射性碘标记玫瑰红钠盐的反应条件影响,得到了最佳的标记条件.在 pH=2.4,C_2H_5OH/H_2O=5—7,KIO_3/攻瑰红=0.1,反应温度80—100℃,反应时问15—20分钟时,标记率在95%以上,游离碘在3%以下.经鉴定,产品质量稳定,在室温放置一个月.^(125)I-玫瑰红含量为93%,基本上能满足临床指标.

放射性碘标记单克隆抗体的研究进展

近几年来,用放射性碘标记单克隆抗体的研究进展很快.本文着重介绍碘化单克隆抗体的优缺点,碘化技术的改进,以及碘化产品的生物活性评价.

超氧化物歧化酶的氯甘脲和氯胺T放射性碘标记法的比较

本文介绍超氧化物歧化酶(SOD)的氯甘脲和氯胺T标记方法的比较,结果表明:SOD用氯甘脲标记法^(131)I标记率(55.34％)较同样条件下氯胺T标记法^(131)I标记率(42.37％)为高;而且用氯甘脲标记方法的SOD酶的活性(0.5 U/μg)较氯胺T标记方法的SOD酶活性(0.2U/μg)要高。且前者具有操作简单、经济、高效、快速的优点。

长效促红细胞生成素的放射性标记

采用改进的双相氯胺 T法对LL EPO进行碘标记 ,使用离心超滤法分离纯化标记混合物 ,对标记纯化的LL EPO经三氯乙酸沉淀和SDS PAGE法鉴定放化纯度 ,通过网织红细胞法对标记前后的蛋白生物活性进行鉴定。结果表明 :1 改进的双相氯胺 T法标记LL EPO ,其标记率为 89% ,比放射性为 5 82× 1 0 5Bq·μg-1蛋白 ,放化纯度 >96% ,SDS PAGE法鉴定标记产物同原型蛋白电泳行为一致 ,Rf值分别为 0 2 8、0 49,网织红细胞法鉴定的标记蛋白与非标记蛋白的生物活性无差异。2 离心超滤法得到的蛋白回收率为 95 %以上 ,而凝胶过滤法得到的蛋白回收率仅为 2 3 82 % ;

Iodogen法碘标记葡萄球菌A蛋白及其亲和层析纯化

Ｉｏｄｏｇｅｎ法碘标记葡萄球菌Ａ蛋白及其亲和层析纯化杨金奎，蒋须勤，张忠邦，陈家伟，郑仕中，邵亚男葡萄球菌Ａ蛋白（ＳＰＡ）是一种可与人和多种动物ＩｇＧ的ＦＣ片段结合的基因特异性配体，可用来代替ＩｇＧ抗体（第二抗体）．由于ＳＰＡ对ＩｇＧ有广谱结合作用，...