骨髓间充质干细胞对放射性脊髓损伤的作用

1病因、病理发病机制 随着放射治疗学的发展,放疗成为治疗肿瘤的主要手段之一,同时因射线所致的损伤也越来越多,有一部分病人不是死于肿瘤,而是死于放射损伤。特别是在和化疗联合应用时,照射野内正常组织的毒性明显增加，出现不同程度的并发症。尤其是在头颈、上消化道、鼻咽癌、肺及脊柱旁等各种恶性肿瘤的放射治疗中，脊髓常常不可避免地进入到照射区域内，造成不同程度的放射性脊髓损伤，也就是放射性脊髓炎的发生。

BMSCs移植联合应用G-CSF对放射性脊髓损伤凋亡因子表达的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植联合应用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对放射性脊髓损伤中凋亡因子Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的影响。方法采用全骨髓贴壁法进行体外分离、培养骨髓间充质干细胞。根据实验要求将45只大鼠随机分为3组,A组为正常对照组,B组为放疗后脊髓损伤组,C组为放疗后脊髓损伤移植组,每组各15只。采用5 MeV电子线照射胸部中段脊髓,照射剂量为5 Gy/次,总剂量为40 Gy。C组在接受照射24 h后采用第三代BMSCs(106个/ml)1 ml联合G-CSF尾部静脉注射治疗每周1次。放疗结束20周后,取各组大鼠脊髓组织行HE染色,在光镜和透射电镜观察脊髓组织的形态学变化,免疫组化检测Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平,应用流式检测其凋亡水平。结果HE染色照射组神经元消失,髓鞘脱落,细胞核固缩,部分核消失。治疗组有小部分神经元,核结构不清楚,髓鞘脱落不明显。电镜结果在微形态上比较,治疗组比照射组有明显改善和好转。免疫组化结果表明照射组表达的Bax和Caspase-3阳性细胞增加,治疗组表达的Bcl-2阳性细胞增加(P<0.05)。流式凋亡检测表明治疗组的细胞凋亡率显著低于照射组(P<0.05)。结论放射性脊髓损伤的大鼠采用BMSCS移植联合应用G-CSF治疗,可以抑制Caspase-3、Bax的表达,上调Bcl-2表达,具有抗细胞凋亡作用。

粒细胞集落刺激因子治疗放射性脊髓损伤的实验研究

目的观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对SD大鼠放射性脊髓损伤的临床效果。方法将30只SD大鼠随机分为正常组、照射组和治疗组,每组10只。照射组和治疗组均采用5 Me V电子线照射胸部中段脊髓,照射剂量为5 Gy/次,总剂量为40 Gy。治疗组在接受照射24 h后采用G-CSF皮下注射治疗,每周1次,共30次。放疗结束32周后,取各组大鼠脊髓组织观察其形态学变化,检测Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平。结果照射组神经元消失,髓鞘脱落,细胞核固缩,部分核消失。治疗组有小部分神经元,核结构不清楚,髓鞘脱落不明显。治疗组Bax、Caspase-3和Bcl-2表达水平均低于照射组(P<0.05)。结论 G-CSF可以在脊髓损伤部位抑制凋亡基因表达,从而起到修复神经及恢复功能的作用。

复方树莓籽粉对小鼠放射性脊髓损伤的防护作用

观察复方树莓籽粉对小鼠放射性脊髓损伤的影响及防护作用。健康成年雄性小鼠50只,随机分为5组:空白组、模型组及不同浓度(低、中、高)的复方树莓籽粉溶液处理组,每组10只;模型组用蒸馏水灌胃,复方树莓籽粉溶液处理组用不同浓度的复方树莓籽粉溶液灌胃。给药第15天,除空白组外,其余4组在结束灌胃后即刻进行全身X射线一次性辐照,剂量为4 Gy,辐照后继续给药直至实验结束。辐照后第3天,取脊髓组织行苏木精-伊红(HE)染色与尼氏染色观察其形态学变化,免疫组化检测Fas、Caspase-9在脊髓组织中的表达情况。HE染色见模型组脊髓白质内神经纤维肿胀且排列疏松紊乱,灰质内部分神经元细胞萎缩甚至消失,伴有炎症反应;尼氏染色见模型组尼氏体溶解,神经元细胞消失;免疫组化见模型组Fas与Caspase-9染色程度较空白组显著升高(p<0.01);复方树莓粉溶液处理组Fas与Caspase-9染色程度降低,且随着浓度增高,染色程度逐渐降低(p<0.05)。复方树莓籽粉能够对抗辐照引起的脊髓损伤,并抑制Fas与Caspase-9的过表达,从而抑制细胞凋亡。且随着浓度增加,保护作用越明显。

3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸通过核因子E2相关因子2/血红素氧合酶1通路改善对大鼠放射性脊髓损伤

目的探究3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸(AKBA)对放射性脊髓损伤(RI-SCI)的治疗作用及其机制。方法HT22细胞购自上海富衡生物科技有限公司。未处理细胞为NC组,照射后为RT组,照射后加AKBA处理为RA组,将转染的阴性对照、核因子E2相关因子2(NRF2)的小干扰RNA分别转染至细胞中,照射后加入AKBA,分为RA+si-NC组和RA+si-NRF2组,30只SD大鼠采用随机数字表法分为3组:未处理为Control组(10例)、照射后为IR组(10例),照射后AKBA处理为Treat组(10例)。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活性;记录大鼠照射后瘫痪潜伏期,苏木精-伊红(HE)染色观察脊髓组织病理变化,蛋白质印迹法(Western blot)检测NRF2、血红素氧合酶1(HO-1)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6蛋白的表达,荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测脊髓组织中NRF2、HO-1的mRNA水平,计算分子对接的结合能评估AKBA和NRF2的结合状态。组间比较采用t检验。结果RA组细胞活性高于RT组(0.74±0.03比0.49±0.08,t=4.990、5.789,P<0.05),RA+si-NRF2组与RT+si-NRF2组之间差异无统计学意义(0.39±0.10比0.31±0.03,t=1.368,P>0.05),RT组IL-1β、IL-6蛋白高于RA组(1.16±0.11比0.49±0.03、1.35±0.18比0.92±0.04,t=10.565、4.061,P<0.05),RA组NRF2、HO-1蛋白高于RT组(1.10±0.05比0.84±0.09、0.93±0.03比0.82±0.03,t=4.498、4.450,P<0.05);RA+si-NRF2组IL-1β蛋白显著高于RA+si-NC组(0.86±0.03比0.51±0.11,t=5.345,P<0.05)。Treat组瘫痪潜伏期长于IR组[(133.20±3.90)d比(121.60±3.58)d,χ^(2)=21.54,P<0.05],IR组IL-1β、IL-6高于Treat组(1.15±0.17比0.57±0.10、1.31±0.16比0.47±0.12,t=4.983、7.173,P<0.05),Treat组NRF2、HO-1蛋白、mRNA高于IR组(1.11±0.14比0.60±0.17、1.09±0.12比0.43±0.10、10.41±0.65比6.78±0.34、50.61±5.45比12.84±2.22,t=4.060、7.311、11.067、14.361,P<0.05)。分子对接结合能为-11.36 kcal/mol。结论AKBA通过激活NRF2/HO-1信号通路抑制脊髓炎性反应,从而保护脊髓神经元,改善RI-SCI。

大鼠放射性脊髓损伤脊髓血流量变化规律

目的:放射性脊髓损伤(Radiation spinal cord injury,RSCI)是头颈部、胸部及上腹部肿瘤放射治疗和射线意外照射时的常见并发症,一般认为,白质坏死、脱髓鞘为其主要的病理学变化。然而,越来越多的证据表明血-脊髓屏障破裂和血管通透性增加等血管损伤远早于白质坏死和脱髓鞘改变。所以本文阐明大鼠放射性脊髓损伤病理生理过程中脊髓血流量变化规律。方法:将60只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为12组,1组为对照,其余11组采用60Co放射治疗机行30 Gy大鼠颈髓C2-T2单次照射,剂量率为153 cGy/min,源皮距为80 cm,照射时长为1153 s,照射范围为2.0×1.0 cm,对照组大鼠于麻醉后置于60Co放射治疗机下,佯照,照射前及照射后分别采用激光多普勒法测量脊髓血流量,11组大鼠于照射前以及照射后1、3、7、14、21、30、60、90、120、150、180天进行测量,以照射前测量值为基数,各时间点以基数的百分比表示该时间点脊髓血流量。结果:大鼠放射性脊髓损伤后,脊髓血流量在照射早期即有降低,照射后90天达到最低,随后脊髓血流量进入平台期。结论:阐明了大鼠放射性脊髓损伤后脊髓血流量的变化规律。大鼠放射性脊髓损伤可影响脊髓血流量,导致脊髓长期处于持续低灌流、缺血缺氧状态,最终导致脊髓不可逆性损伤。临床上放射性脊髓损伤的病人感到疲乏无力,出现神经系统的症状体征,通常死于脑疝。本文为临床上疲乏无力,出现神经系统的症状体征,死于脑疝放射性脊髓损伤的病人的早期防治提供病理生理基础。

大鼠放射性脊髓损伤后神经元数量变化规律

目的:临床放射治疗中,中枢神经系统是主要的剂量限制器官之一。随着放射治疗学的发展,放射性脊髓损伤的发病率明显增高,其主要病理学变化是血管损伤,伴白质坏死及脱髓鞘。但是对于放射性脊髓损伤后神经元的变化情况未见报道。本文主要阐明大鼠放射性脊髓损伤后180天的时间内,神经元数量的变化情况。方法:将60只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为未照射组和照射组,照射组采用60Co放射治疗机行30 Gy大鼠颈髓C2-T2单次照射,剂量率为153 cGy/min,源皮距为80 cm,照射时长为1153秒,照射范围为2.0×1.0 cm。未照射组大鼠于照射前灌注取材,照射组大鼠于照射后1、3、7、14、21、30、60、90、120、150、180天进行灌注取材,标本经石蜡包埋,切片后采用尼氏染色法染色,采用Image Pro-Plus(IPP)图像分析软件计量直径大于20μm的神经元数量。结果:正常神经元胞膜完整,胞浆内有清晰蓝染的尼氏体颗粒。大鼠放射性脊髓损伤后,神经元数量在照射后7天即有明显下降。随着时间的延长,神经元数量继续降低,照射后90天达到最低值。照射后180天,神经元数量有所恢复,但无法恢复至正常水平。结论:阐明了大鼠放射性脊髓损伤后神经元数量的变化规律,放射性脊髓损伤后可减少脊髓神经元数量,导致脊髓神经元变性、凋亡、坏死,最终导致脊髓运动功能不可逆性损伤,为临床上放射性脊髓损伤的预防提供理论依据。

鼻咽癌放射治疗后放射性脑脊髓损伤的探讨

目的探讨鼻咽癌放射治疗后放射性脑脊髓损伤的临床和影像学诊断;放射性脑脊髓损伤与照射剂量、照射技术之间的关系。方法对20例鼻咽癌放射治疗后引起脑脊髓损伤患者的临床表现和CT及MRI的影像学表现进行了回顾性分析。结果单侧颞叶损伤12例,双侧颞叶损伤8例,其中颞叶伴脑干损伤6例,颞叶、脑干、颈段脊髓损伤2例。放射性脑脊髓损伤部位的CT片表现为颅底线上指状低密度影;MRI片多表现为T1WI等信号或低信号,T2WI为高信号或混合信号。鼻咽癌放射治疗后放射性脑脊髓损伤的范围与放疗照射野的大小和照射剂量有关。结论放射性脑脊髓损伤可根据临床表现、CT/MRI的影像学特征、结合病史做出诊断。脑脊髓损伤的范围与照射野技术相关。

MRI对放射性脑脊髓损伤的评价(附6例分析)

目的 :评价MRI对放射性脑脊髓损伤的诊断及鉴别诊断价值。方法 :总结分析6例经临床手术病理证实的脑脊髓损伤的MRI表现。结果 :4例放射性脑损伤 ,2例放射性脊髓损伤 ,其MRI表现为 :主要累及脑白质 ;T1WI呈不均匀低信号 ,T2WI呈不均匀高信号。Gd -DTPA增强扫描 :4例病灶均见不均匀异常对比增强。结论 :结合放射治疗病史 。

放射性脑脊髓损伤临床分析

放射性脑脊髓损伤（REMP）是放射治疗严重后遗症之一．头颈部恶性肿瘤放射也难以完全避开颢叶下极、脑于及颈段脊髓，放射治疗后发生脑脊髓损伤的危险。病情严重者极大地影响患者的生活质量和生存期。部分放射性脑脊髓损伤需要外科治疗，自1990至2006年共收治的放射性脑脊髓损伤患者24例，治疗效果良好．对放射性脑脊髓损伤的外科治疗指征及方法进行探讨。现结合文献报告如下。

放射性脑脊髓损伤的中西医结合康复治疗

目的 探讨放射性脑脊髓损伤的临床综合治疗疗效。方法回顾性分析放射性脑脊髓损伤32例，急性期采用大剂量激素冲击疗法，慢性期及恢复期采用中西医结合的综合治疗，与采用传统疗法治疗的患者进行对照。结果治疗组32例。完全恢复6例，基本恢复10例，部分恢复12例，未恢复4例。对照组10例。基本恢复1例，部分恢复4例，未恢复5例。结论急性放射性脑脊髓损伤应采用大剂量激素冲击疗法；中西医结合有助于慢性期和恢复期的治疗。

鼻咽癌放射治疗后脑脊髓损伤的临床和影像学诊断

目的 探讨鼻咽癌患者放射治疗后脑脊髓放射性损伤的临床和影像学诊断。方法 对 32例鼻咽癌放射治疗脑脊髓放射性损伤患者的临床表现、CT及MRI表现进行回顾性分析。结果 32例中共发现 4 5个损伤病灶 ,颞叶 30个 (占脑损伤病灶的 70 % ) ,脑干 13个 ,颈段脊髓 2个。其中 6例放射性颞叶损伤无临床症状。CT对颞叶放射性损伤的检出率为 87% ,对脑干损伤的检出率仅 2 9%。放射性颞叶损伤在CT图象上主要表现为指状低密度。MRI检查T1WI图象上放射性脑脊髓损伤均表现为低或等信号 ,T2 WI图象上为高信号或混合信号 ,颞叶损伤可伴有周围指状分布水肿信号 ,86 %病灶有增强效应 ,中间有不增强区。结论 放射性脑脊髓损伤的临床表现无特征性 ,亦可无症状 ,CT及MRI表现具有一定的特征性 ,结合病史可做出诊断。MRI在诊断脑干、脊膜损伤上优于CT。

5-Fu、DDP联合放疗对脊髓损伤的观察

目的 本文将对5-Fu、DDP这两种药物放疗增敏作用对正常组织(脊髓)的晚期损伤的影响进行探讨。方法 本实验将48只Wister大白鼠随机分成四组,每组12只,分为空白组,单照组,单化组,放化组,采用^(60)Co产生γ射线照射,照射野为胸段脊髓,500cGY/次,共5次,每日1次,总剂量为2500 cGY。化疗组:于第1,3,5天腹腔注射DDP 6 mg/kg,5-Fu 150 mg/kg。放化组经上述处理后,30分钟后放。空白组腹腔注射生理盐水。照射后6个月取材,经形态学分析,统计学处理。结果四组脊髓尼氏体变化有显著性差异(P<0.01)。结论 DDP和5-Fu的放疗增敏作用对脊髓有显著影响,即损伤加重。

放疗中出现放射性脱髓鞘反应1例

放射性脱髓鞘反应由放射线所致,多见于头颈部及躯干部恶性肿瘤放射治疗后。有些患者会有触电样感觉异常的Lhermitte＇s征。放射性脱髓鞘反应有潜伏期,大多在放射治疗结束后1年左右发病。Schultheiss报道，放射性脊髓损伤潜伏期小于6个月者少见。