单克隆抗体免疫放射测定法检测丝虫抗原

应用抗马来丝虫成虫单克隆抗体（ＭｃＡｂ）结合免疫放射测定法（ＩＲＭＡ），对马来丝虫成虫抗原、马来丝虫成虫排泄－分泌抗原（ＥＳ抗原）、马来微丝蚴抗原及班氏丝虫病病人血清中循环抗原进行了检测。马来丝虫成虫抗原检出的最低含量为０．４８ｐｇ，ＥＳ抗原、马来微丝蚴抗原可测得抗原结合量分别为０．３５μｇ和０．０６５μｇ，班氏丝虫病人血清中循环抗原的检测结果阳性率为８０％（４０／５０），丝虫病流行区５０份微丝蚴阴性血清及丝虫病非流行区５０份肠道蠕虫感染者血清全部为阴性。

胰岛素样生长因子-1的放射免疫测定方法的建立

胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）分别与两种载体蛋白——牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和卵清蛋白（ＯＡ）用戊二醛连接，经紫外分光光度仪扫描确定偶联成功。以ＩＧＦ－１－ＢＳＡ作为免疫原，皮内多点注射免疫青紫兰兔，制备ＩＧＦ－１抗体，经ＥＬＩＳＡ法测定，血清效价为１∶２０００，放免工作浓度为１∶１５０００。采用氯胺－Ｔ标记ＩＧＦ－１，用酸醇抽提法处理样品，去除ＩＧＦ－１结合蛋白。所建立的ＩＧＦ－１放免标准曲线，其最小检测量为０．０６ｎｇ／ｍＬ，批内误差为４．８％，批间误差为８．２％（ｎ＝１０）。

NADase细菌毒素的非放射性测定法

目的：建立一种测定ＮＡＤａｓｅ细菌毒素活性的非放射性测定法。方法：建立一个ＮＡＤ（辅酶Ｉ）依赖的显色系统，在该系统中，ＮＡＤ接受乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）从乳酸脱下来的氢，再通过ＰＭＳ（吩嗪二甲酯硫酸盐）传递给ＩＮＴ（碘化硝基四氮唑蓝），使后者还原而显色。如果ＮＡＤａｓｅ毒素分解ＮＡＤ，就会打断递氢链而抑制显色反应。结果：显色系统中，ＮＡＤ含量与显色有良好线性关系（Ｒ＝０．９８９８）。绿脓杆菌外毒素Ａ分解ＮＡＤ而抑制显色反应。以毒素含量为自变量，以毒素对显色反应的抑制为应变量，建立了对数线性回归方程Ｙ＝１２．５Ｘ０．２６，当Ｙ＝５０％时［即显色系统中的ＮＡＤ有半数（２５０ｎｇ）被分解］，Ｘ＝２０７（ｎｇ）。定义分解１ｎｇＮＡＤ的毒素活性为一个单位，则２０７ｎｇ毒素含有２５０个毒素活性单位。该方法的测定敏感性达到“ｎｇ”水平。结论：本方法是一种敏感的测定ＮＡＤａｓｅ细菌毒素活性的非放射性测定方法。

人卵泡休止素放射免疫测定法的建立

采用亲和层析纯化的人天然卵泡休止素，建立了特异的Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ放射免疫测定法，其最小检出是每管５０ｐｇ／０．１ｍｌ，组间变异系数为２．９％，批间变异系数为４．４％，血清内添加Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ其回收率在９０％，且与Ａｃｔｉｖｉｎ、ＡＣＴＨ、ＦＳＨ等无明显交叉反应，采用此法测得的健康成年人外周血Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ水平在６．６～８．１ｎｇ／ｍｌ，男、女间无明显差异。

利用放射免疫法测定水中克百威的研究

本研究建立了水样中克百威残留的放射免疫分析方法 (RIA) ,与传统的分析方法相比 ,前处理简单 ,灵敏度更高。研究结果表明 ,该方法的检出限为 0 1 75ng ml,用放射免疫测定法与高效液相色谱法检测相同水样中克百威的残留 ,两者的线性相关系数为 0 9985。

放射免疫法测定血清抗生长激素抗体

目的 建立人血清抗生长激素 (GH)抗体放射免疫测定法。方法 (1)以聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射自显影 ,鉴定人重组生长激素 (r hGH)及其单抗纯度、检验r hGH在12 5I标记后是否改变其与抗GH抗体形成免疫复合物的能力。 (2 )将12 5I标记r hGH与血清于 37℃水浴孵育 3h ,经三次非特异性洗脱 ,测定并计算出12 5I结合率 ,并观察 75例原发性生长激素缺乏症患儿接受r hGH治疗前后不同时期共 2 6 3份血清抗GH抗体阳性变化。结果 (1)r hGH及其单抗为电泳纯 ,12 5Ir hGH可与其抗体形成免疫复合物。 (2 )测得阳性标本 6 1例 ,阳性率 2 3 2 %。结论 该测定方法可用于人血清抗生长激素抗体水平测定 ,敏感、可靠。

青蒿素、青蒿酯放射免疫测定法的建立及药物代谢动力学研究

青蒿素是我国科学家七十年代初从中药青蒿(Artemisia annua L)中分离到的抗疟有效成分,因其结构特殊,对一般恶性疟、脑型疟和间日疟疗效肯定,且对耐氯喹株疟原虫感染也有效,而毒副作用很小,引起国内外重视。为使其达到我国新药审批标准和国际注册标准,实现商品化。

用放射免疫测定法分析水中莠去津残留量的研究

以莠去津均三氮苯类结构特征 ,合成连有活性羧基的莠去津半抗原 ,通过活性酯法制备出具有生物活性的人工抗原 ,以此免疫兔子获得抗莠去津的多克隆抗体。抗体的特异性强 ,与扑灭津的交叉反应性为 93 %,与西玛津的交叉反应性为 8%。以3H标记莠去津建立的莠去津放射免疫测定法对水中莠去津添加回收率的测定表明 ,自来水的添加回收率为 88.5%～ 1 0 7.5%,运河水的添加回收率为 87.4 %～1 1 0 .9%。

环孢素A放射受体测定方法的建立与考核

目的：建立用于临床的环孢素Ａ的放射受体测定法，并与荧光偏振免疫测定法进行比较。方法：利用亲环素Ａ（ＣｙＰＡ）能在体外与环孢素Ａ（ＣｓＡ）高效结合的特性，以重组人亲环素Ａ（ｒｈＣｙＰＡ）作为特异性的结合蛋白，３Ｈ－ＣｓＡ作为示踪剂，建立ＣｓＡ的放射受体测定法。结果：方法的有效测定范围为４３．８～２８００μｇ／Ｌ，灵敏度为４３．８μｇ／Ｌ，批内变异系数为８．２％（ｎ＝８），批间变异系数为１０．６％（ｎ＝８），标本提取与测定方法的全程回收率分别为１０４．２％和１０６．３％；对ＣｓＡ及其几种类似物与ｒｈＣｙＰＡ的亲和力进行比较，以ＣｓＡ与ｒｈＣｙＰＡ的亲和力为最佳；在实际应用中与荧光偏振免疫测定法进行比较（ｎ＝３０），二者测值高度相关，ｒ为０．９６４２，回归方程为ｙ＝３９．１１２＋０．９９ｘ。结论：该方法具有灵敏可靠，特异性、重复性、稳定性和经济性好等优点，适用于ＣｓＡ全血浓度的临床测定。

人血浆中亮氨酸—脑啡肽放射免疫测定法及临床初步应用

本文报告人血浆LEK的RIA测定法,用TG—ECDI—LEK背部皮内多点免疫家兔,得高灵敏度、高特异性的ALS,工作稀度可达1:20,000,最小检出量5pg,多种肽类均无明显干扰,适用于血浆中检出微量LEK。作者用有效的样品抽提方法:快速冷分离出血浆,迅速的酸化及杆菌肽、抑肽酶等有效地防止了EK的降解,酸化血浆LEK被XAD—2树脂吸附和用水合甲醇洗脱。本法测定人血浆LEK平均为127.9±54pg/ml(m±S. E. M., n=61),范围45—200pg/ml。多种考验证明本法可靠。此法为循环中研究EK动力变化提供了条件。

用放射免疫吸附测定法检测大麦黄矮病毒及雀麦花叶病毒

放射免疫吸附测定法（Radioimmunosorbent assay RISA）是一种灵敏、快速检测植物病毒的方法,它的灵敏度高于酶联免疫吸附法（Enzyme-Linked immunoso-sorbent assay ELISA）。作者应用125I分别标记雀麦花叶病毒（Brome Mosaic VirusBMV）和大麦黄矮病毒（Barley Yellow Dwarf Virus BYDV）免疫γ-球蛋自,进了行病毒检测,取得了较为满意的结果,这为进行蚜虫带毒率的测定和病害流行测报打下基础。

二氢玉米素核苷组细胞分裂素的放射免疫测定法

本文报道二氢玉米素核苷（ＤＨＺＲ）组细胞分裂素放射免疫测定法（ＲＭ）的研制结果。以尸Ｈ）二氢玉米素作示踪剂，测得兔抗ＤＨＺＲ抗血清的效价为１：１３７Ｏ（Ｂ％＝３０％）。该抗血清主要与本组细胞分裂素发生交叉反应。回收率为９６．９％，灵敏度为１２ｆｍｏｌＤＨＺＲ／管，检测线性范围为０．１～１００ｐｍｏｌＤＨＺＲ／管。批内误差ＣＶ＝４．３，批间误差ＣＶ＝２．０％。对基于同一兔抗血清的ＤＨＺＲ组细胞分裂素的ＲＩＡ、ＥＮＳＡ比较后认为，两者的主要参数基本一致，测定结果具有可比性。

生长激素和催乳素放射免疫测定法的建立与应用

目的 :建立测定大鼠垂体和血浆中生长激素 (GH)和催乳素 (PRL)含量的高特异性、高灵敏度的双抗放射免疫测定 (RIA)法 ;研究急性低氧对大鼠垂体激素GH和PRL的作用。方法 :用氯胺 T法进行抗原放射性碘标记 ;采用平衡饱和加样程序的双抗RIA法测定。结果 :用该方法测定急性低氧 (0 .5h)时血浆和垂体GH和PRL含量 ,7km低氧 ,垂体GH含量明显升高 (P <0 .0 5 ) ,血浆则相反 :7km低氧 ,明显降低垂体和血浆PRL含量 (P <0 .0 1) ;而 5km低氧对GH和PRL的作用与对照相比无统计学差异。结论 :本双抗RIA法具有高特异性、高灵敏度及简便易行等特性 ;用该法测定提示急性低氧可抑制大鼠GH和PRL的分泌。

用放射免疫测定法分析土壤中莠去津残留量的研究

根据莠去津均三氮苯类结构的特征，合成连有活性羧基的莠去津半抗原，通过活性脂法与牛血清白蛋白联接，制备出较高生物活性的人工抗原，以此免疫兔子获得抗莠去津的多克隆抗体。抗体的特异性强，与扑灭津的交叉反应性为９３％，与西玛津的交叉反应性为８％。以３Ｈ标记莠去津建立的莠去津放射免疫测定法对土壤中莠去津添加回收率的测定表明，沙土的添加回收率为８５７％～９５０％，壤土的添加回收率为８６９％～９２１％。

放射免疫测定法的创建者——罗莎琳 耶洛

R·Luft教授曾在1977年生理学、医学诺贝尔奖授奖仪式上对罗莎琳的贡献作了高度的评价，“激素(hormones)的神秘感曾刺激人们猜测和幻想，它的秘密使研究者们不知所措……，罗莎琳·耶洛(Rosalyn Yalow)建立的放射免疫测定法检测血中肽类激素使这些幻想和猜测成为现实。……罗莎琳·耶洛建立的方法给激素研究领域带来了一场真正的革命，她的成就标志着新纪元的开始”。

白三烯B_4放射受体结合测定方法的建立及其特性的分析

白三烯Ｂ＿４放射受体结合测定方法的建立及其特性的分析赵宁，朱秀媛，程桂芳（中国医学科学院，中国协和医科大学药物研究所，北京１０００５０）白三烯Ｂ４（ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅＢ４，ＬＴＢ４）是花生四烯酸（ａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃａｃｉｄ）５－脂氧酶代谢产物...

唾液和血浆皮质醇直接放射免疫测定法

目前学者们研究下丘脑——垂体——肾上腺皮质轴内分泌功能的重要手段是对血浆皮质醇(简称F)的测定,其测定过程繁琐费时,有机溶剂消耗量大。本文介绍了唾液F直接放射免疫测定和血浆TF加热直接放射免疫测定方法。用此法可避免以往抽提过程中的损失和操作误差,提高准确性和稳定性。