立体定向放射外科中颅神经的放射耐受性

颅内很多病变邻近颅神经,甚至推挤或包裹颅神经,在实施立体定向放射外科(SRS)治疗中必须考虑到颅神经的放射耐受性,把颅神经与脑实质的其余部分加以区别,给予适当的处方剂量,尽可能减小放射性颅神经病的发生率,临床实践中多凭经验拟定放射处方。本综述复习了近年来立体定向放射外科治疗中关于颅神经放射耐受性的研究观点。

NF-κB及其信号传导通路与肿瘤放射耐受的研究进展

研究指出核因子κB（NF-κB）与肿瘤的放射耐受性相关。作为治疗靶基因,通过对NF-κB的抑制可增加放射敏感性。然而,NF-κB信号途径在增加肿瘤细胞放射耐受性方面的具体信号通路目前还无统一结论。本研究对各相关信号传导途径作一阐述。1 NF-κB的生物学特性核因子κB（NF-κB）是能调节多种炎症和免疫基因表达的一种重要的转录调节因子。

诱导建立乳腺癌MCF-7放射耐受细胞亚株的实验研究

目的:探索诱导并建立人乳腺癌MCF-7放射耐受细胞亚株的体外实验方法。方法:体外培养MCF-7细胞株,应用梯度递增的X线对MCF-7进行诱导照射,照射剂量达到59Gy时,得到放射耐受细胞亚株(MCF-7R),扫描电镜和透射电镜观察亲本株MCF-7与放射耐受细胞亚株MCF-7R细胞超微结构,流式细胞仪检测其细胞周期分布,集落形成实验检测其放射敏感性,并计算存活分数,多靶单击模型拟合细胞存活曲线。结果:与MCF-7相比,MCF-7R外形及细胞器均出现明显改变;G_2/M期比例明显降低;(13.32%vs.9.43%)放射敏感性参数SF_2即照射2 Gy时的细胞存活分数升高34%(P<0.001),准域剂量Dq值由2.261 Gy升高至3.695 Gy(P<0.05),平均致死剂量D_o值由1.215 Gy升高至1.834 Gy(P<0.05)。结论:照射剂量梯度递增法是可行的建立人乳腺癌放射耐受细胞亚株的方法,得到的放射耐受亚株细胞形态及细胞生物学特性与亲本株细胞相比较有明显差异。

放射耐受性结肠癌细胞亚株的建立及其生物学特性

背景与目的:结肠癌是消化系统的常见肿瘤,放疗是其重要的治疗手段之一。诱导并筛选具有放射耐受性的结肠癌细胞亚株,为研究结肠癌放射耐受的机制提供实验模型。方法:应用梯度递增剂量的γ射线对SW620细胞株进行诱导照射,筛选得到放射耐受细胞亚株SW620/R。观察细胞的形态变化和生长情况,通过CCK8法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞照射的周期及凋亡的变化,克隆形成实验检测细胞克隆形成率和放射敏感性。结果:通过照射剂量梯度递增的诱导方法,成功建立了SW620/R细胞亚株。SW620/R细胞亚株形态与亲本细胞明显不同,并且在高剂量射线照射后仍能继续生长;鉴定实验显示SW620/R细胞亚株与亲本细胞相比倍增时间明显延长,克隆形成率显著下降;在细胞周期上S期的比例显著上升,并且在照射后未出现周期的阻滞现象,同时发现其自发凋亡率显著下降;克隆形成实验显示其放射耐受性明显升高。结论:成功建立了放射耐受的细胞亚株SW620/R,经鉴定其放射敏感性显著降低,且两者在增殖、克隆形成率、细胞周期和自发凋亡上差异有统计学意义(P<0.05)。

海绵窦内颅神经的放射耐受量

立体定向放射治疗正成为一种治疗颅内良性及深部肿瘤的有效手段。然而,单次大剂量照射对于颅神经的影响却鲜为人知,本项研究揭示了颅神经对大分割照射的影响。

放射耐受性肝癌细胞亚株的筛选与建立

目的诱导并筛选具有放射耐受性的单克隆肝癌细胞亚株，为进一步研究细胞抗放射生物学变化构建实验模型。方法采用人肝癌HepG2细胞进行放射诱导，分次照射，累积吸收剂量为60Gv。经细胞克隆筛选、建株。进行形态学和细胞超微结构观察，同时测定细胞生长特性以及放射敏感性变化与亲本HepG2细胞进行比较，并观察2Gy照射后细胞内放射相关抗拒基因mRNA表达水平的变化，对该细胞亚株进行鉴定，定名为HepG2／R60细胞亚株。结果通过2Gy×30次分割照射诱导，成功建立HepG2／R60细胞亚株。细胞鉴定结果显示，与亲本HepG2细胞比较，细胞形态不规则，伪足伸展，折光度清晰，细胞间连接较为松散。透射电镜观察HepG2／R60细胞表面微绒毛明显增多，线粒体丰富，高尔基体发达。细胞生长延缓，倍增时间明显延迟为34．9h，与HepG2细胞比较，放射敏感性显著降低，放射相关抗拒基因表达明显升高。结论成功建立具有放射耐受性的人肝癌细胞亚株：HepG2／R60。经鉴定与其亲本的HepG2细胞比较，其放射敏感性显著降低。

长链非编码RNA在肿瘤干细胞放射耐受性中的作用

肿瘤干细胞(CSCs)指肿瘤内部一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,虽然仅占整个肿瘤细胞的小部分,却是导致肿瘤发生、扩散和复发的"起源细胞",这也正是肿瘤放疗失败的根源所在。CSCs对放疗具有耐受性,并以直接或间接方式促进肿瘤转移,因而被认为是肿瘤转移的基础。此外,CSCs的异质性可能是造成器官特异性转移的原因之一。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度>200个核苷酸,且无蛋白质编码能力的RNA分子,参与肿瘤发生和发展,并与肿瘤放射耐受性的形成密切相关。近年来肿瘤放射耐受性相关的lncRNA及其与CSCs关系的研究日益成为热点。本文就放疗后lncRNA介导的CSCs的调节以及lncRNA在肿瘤放射耐受中的作用进行综述。

基于贝叶斯统计排序和生物信息学分析法对恶性肿瘤放射耐受或抵抗相关蛋白的定量推荐

目的对已发表的基于蛋白水平的恶性肿瘤放射耐受或抵抗相关研究进行定量分析,推荐出“放射耐受或抵抗领域值得进一步研究的蛋白”。方法检索词包括“RadiationTolerance” OR“radioresistance”AND“Neoplasms”,在PubMed上检索2011-01-01-2020-06-30关于恶性肿瘤放射抵抗或耐受研究相关文献中所涉及蛋白水平的研究。梳理每个蛋白在所纳入文献中被研究的次数,定义为研究数量指数。以研究数量指数5次为界,分别设计高频组(≥5次)和低频组(<5次)的评价方案以进行推荐。高频组蛋白推荐方案基于研究质量指数评分表和贝叶斯统计法计算得到的累计排序概率图下面积值(SUCRA)进行。之后以研究数量指数和计算得到的研究质量指数均在中位数以上的蛋白作为高频组“放射耐受或抵抗领域值得进一步研究的蛋白”进行推荐。低频组蛋白采用R语言对<5与≥5次的放射耐受或抵抗相关蛋白分别进行信号通路富集后,以两者交集的信号通路中涉及的<5次的蛋白作为低频组“放疗领域值得进一步研究的蛋白”进行推荐。结果截至2020-06-30,恶性肿瘤放射抵抗或耐受研究相关蛋白研究共1 231篇,涉及蛋白共计830个。高频组蛋白51个,低频组779个。研究数量指数最高的为缺氧诱导因子-1A(HIF1A)蛋白,研究质量指数最高的为酪氨酸蛋白激酶(MET)蛋白。高频组所产生的“放疗领域值得进一步研究的蛋白”共9个,分别为NOTCH1、AKT1、EGFR、HSP90、PI3K、MMP2、RAD51、Survivin和DNA-PK。在低频组与高频组的蛋白富集所涉及信号通路中,交集有22条,低频组“放疗领域值得进一步研究的蛋白”为BRCC3、SIRT3和PLK4等58个蛋白。结论在放射耐受或抵抗的既往研究相关蛋白中,基于评分表、贝叶斯排序法及R语言生信分析等定量研究方法可进一步研究的蛋白共计67种。但是,这些蛋白的临床确切价值尚待临床前瞻性研究样本验证。

放射耐受食管鳞癌细胞系基因表达谱研究

目的构建放射耐受食管鳞癌细胞系，筛选放射耐受相关基因及探索耐受机制。方法利用放射线反复照射食管癌细胞系KYSE410，构建放射耐受细胞系KYSE410-res。检测照射前后食管癌细胞增殖与凋亡情况，通过基因芯片技术检测放射线处理前后食管癌细胞基因表达差异情况，并对差异明显的基因进行验证。采用成组t检验。结果KYSE410-res细胞较KYSE410细胞抗凋亡能力和增殖能力显著提高（P值均〈0．05）。基因芯片结果显示KYSE410-res细胞中表达上调≥4倍基因有463个，下调≥4倍基因有251个。差异表达基因的功能主要集中在细胞增殖、粘附、信号转导、血管生成、活性氧代谢、细胞损伤修复及MAPK／ERK信号通路，OAS2和UBD是重要节点蛋白。荧光定量PCR法检测HLA—DQB1、MMP1、NCAM1、ZNF521、GPC6、SELENBP1、LCN15、TFPI-2基因在KYSE410-res细胞中表达情况与基因芯片结果一致。结论MAPK／ERK信号通路的异常激活、OAS2和UBD基因的表达上调、TFPI-2基因的表达下调伴随MMPs的表达上调,可能是食管癌细胞放射耐受的机制之一。

分化型甲状腺癌中KRAS、BRAF^(V600E)基因突变与^(131)I放射治疗耐受的关系

目的探讨分化型甲状腺癌(DTC)中鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)、鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌基因同源体B(BRAF)基因突变与^(131)I放射治疗耐受的相关性。方法回顾性收集2010年3月—2015年6月于我院接受甲状腺全切除术及术后行^(131)I放射治疗的219例DTC患者的临床资料和病理组织样本,根据患者对^(131)I放射治疗的耐受情况分为耐受组和敏感组,检测病理组织样本中KRAS和BRAF^(V600E)基因的突变情况。结果耐受组年龄≥45岁、甲状腺滤泡状癌(FTC)、远处转移及转移灶≥1 cm的患者比例显著高于敏感组,差异有统计学意义(P<0.05)。KRAS基因突变在FTC中发生率较高,BRAF^(V600E)基因突变在甲状腺乳头状癌(PTC)中发生率较高;此外,KRAS和BRAF^(V600E)基因突变均与原发肿瘤最大直径、AJCC TNM分期、淋巴结转移、腺外侵犯、远处转移及转移灶大小有关(P<0.05)。耐受组KRAS和BRAF^(V600E)基因突变的发生率均显著高于敏感组(P<0.05)。年龄≥45岁、转移灶≥1 cm、KRAS和BRAF^(V600E)基因突变是DTC患者^(131)I放射治疗耐受的独立预测因素(P<0.05)。耐受组5年生存率显著低于敏感组,KRAS突变型患者5年生存率显著低于野生型患者,BRAF^(V600E)突变型患者5年生存率显著低于野生型患者,耐受组KRAS、BRAF^(V600E)突变型患者5年生存率均显著低于野生型患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 KRAS基因和BRAF^(V600E)基因突变是导致DTC患者^(131)I放射治疗耐受的独立危险因素,且对患者的预后评估具有重要意义。

远处转移分化型甲状腺癌发生放射性碘治疗耐受的危险因素及预测指标分析

目的:探讨远处转移分化型甲状腺癌(DTC)发生放射性碘治疗耐受(RAIR)的危险因素及预测指标分析。方法:将181例远处转移DTC患者分为碘难治组(RAIR组,n=61)及碘治疗有效组(RAIE组,n=120)。比较两组的临床资料及血清学指标,探究远处转移DTC发生RAIR及血清甲状腺球蛋白(Tg)的预测效能。结果:单因素分析显示,两组患者性别、远处转移部位、病灶为单侧或双侧、颈部淋巴结转移数量、是否纵膈淋巴结转移、是否伴发良性甲状腺疾病比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组年龄、病理类型及治疗前血清Tg水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示,年龄>45岁、病理类型为滤泡型甲状腺癌(FTC)、治疗前血清Tg水平>46.860μg/L为远处转移DTC发生RAIR的独立危险因素;治疗前血清Tg预测远处转移DTC发生RAIR的AUC为0.831。经过131 I治疗后,RAIR组的血清Tg升高,而RAIE组血清Tg下降(P<0.05)。结论:年龄较大、滤泡型甲状腺癌及高血清Tg是远处转移DTC发生RAIR的独立危险因素,及时识别RAIR-DTC能为患者治疗方案选择提供依据。

^(131)Ⅰ-碘化油内照射部分脾切除的实验研究-Ⅱ可行性和放射强度耐受量

目的:^(131)I-碘化油内照射性部分脾切除的可行性。材料与方法:选用杂种犬10只,分治疗组(8只)和对照组(2只),治疗组脾动脉造影后注入不同剂量的^(131)I-碘化油,对照组则仅注入碘化油,术后通过脾动脉造影、SPECT、病理和血生化及肝肾功能变化了解脾大小和形态改变,评价其部分脾切除的可行性。结果:1.术后1-2周肝功能一过性改变,4周恢复正常;血生化及肾功能无异常;2.血管造影见脾动脉分支减少、纤细,脾影缩小;3.SPECT显示脾大小和重量均缩小;4.病理证实脾脏缩小而其他器官未受损害。结论:^(131)I-碘化油介入性核素内照射方法,生物耐受性良好,可以达到部分脾切除的目的,是一种可行的治疗脾亢的新尝试。

人粘液表皮样癌 MEC-1 细胞放射敏感性的研究

用克隆形成法测定了人粘液表皮样癌ＭＥＣ－１细胞的放射存活曲线。Ｘ线和γ线照射的平均致死剂量（Ｄ０）分别为１．５４Ｇｙ和１．３７Ｇｙ；用ＭＴＴ比色法测定Ｘ线照射后人粘液表皮样癌ＭＥＣ－１细胞、人舌癌Ｔｃａ８１１３细胞和人腺样囊性癌ＳＡＣＣ－８３细胞的存活曲线，３种细胞的（Ｄ３７）值分别为４．５６、９．４４和７．８６Ｇｙ。结果表明，ＭＥＣ－１细胞与其它两种细胞比较具有较高的放射敏感性。

DNA双链断裂修复蛋白表达水平与肿瘤细胞放射敏感性的关系研究

目的:检测肿瘤细胞株中DNA双链断裂修复蛋白(Ku80、DNA-PKcs和ATM)的表达水平和放射敏感性参数,探讨3个蛋白预示肿瘤细胞放射敏感性的价值。方法:培养4株人宫颈癌细胞HeLa、SiHa、C33A和Caski,3株人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-453,及1株人肺癌细胞A549,Western blot检测这8株细胞中Ku80、DNA-PKcs和ATM蛋白的表达水平;流式细胞仪检测X线(10 Gy,6 MV)照射48 h后的凋亡率;克隆形成实验检测SF2(surviving fraction at 2 Gy)值和α、β值;Pearson线性相关分析蛋白表达水平与照射后凋亡率、SF2值和α/β比值的相关性。结果:3种蛋白在同一株细胞中的表达及同一蛋白在不同细胞株的表达均存在明显差异;DNA-PKcs的表达水平与SF2之间存在正相关关系(r=0.723,P=0.043);Ku80和ATM的表达与SF2值间无明显相关关系(P>0.05)。3种蛋白与凋亡率和α/β比值均无相关性(均P>0.05)。结论:DNA-PKcs蛋白表达越高,细胞对放射线越抵抗,其表达水平可能成为指示肿瘤细胞放射敏感性的指标。

康莱特增强中晚期食管癌患者对放疗的耐受性

目的观察放疗联合应用康莱特对中晚期食管癌患者耐受情况的影响。方法回顾31例康莱特联合放疗治疗中晚期食管癌患者白细胞计数、KPS评分、治疗间断时间、疗效,并与对照组31例进行比较分析。结果放疗后治疗组的白细胞水平和KPS评分明显高于对照组;康莱特治疗组治疗间断时间为1.43±0.48天,显著低于对照组的3.24±1.02天,P<0.05;治疗组的1年、2年生存率为77.4%和53.3%,比对照组的58.1%和35.5%稍高,但没有显著性差异。结论联合应用康莱特可以提高中晚期食管癌放疗患者的耐受性,减少治疗间断时间。

放射治疗对口腔颌面部组织瓣修复影响的临床观察

目的研究放射治疗对口腔颌面部组织瓣立即整复的影响和组织瓣的放射治疗耐受性，为头颈部癌根治术组织缺损立即整复后行术后放射治疗提供临床依据。方法游离组织瓣６６块，带蒂组织瓣２２块。观察８８块口腔颌面部修复组织瓣（术前放射治疗组１４块，术后放射治疗组７４块）的成活及愈合情况，观察术后放射治疗组组织瓣的近期和远期放射反应。结果术前放射治疗组１４块组织瓣１２块（８５．７％）全部成活，１块全部坏死，１块部分坏死。术后放射治疗组７４块组织瓣７３块（９８．６％）全部成活，１块部分坏死。术前放射治疗组组织瓣的成活率及愈合良好率明显低于术后放射治疗组（Ｐ＜０．０１～０．０５）。另外，术后放射治疗组组织瓣的急性放射反应明显轻于相邻的正常组织（３５．１％比８３．８％，Ｐ＜０．０１），远期反应也不常见；不同类型的修复组织瓣的放射治疗耐受性差异无显著性，组织瓣修复后放射治疗无１例发生瓣坏死。结论口腔颌面部修复组织瓣有良好的放射治疗耐受性，可安全接受全疗程的常规术后放射剂量照射。

人脑胶质瘤克隆细胞的放射敏感性

本实验以体外集落形成单位为终点指标,观察了人脑胶质瘤细胞DEF 7A的4个克隆细胞株 K_1、K_2、K_4及K_5受小剂量 0、0.1、0.2、0.5、1.0和2.0 Gy X线照射及受大剂量0、4、8、10和12Gy照射后细胞的种植系数、存活分数及剂量存活曲线。结果表明,K_1细胞的D_0值为4.56Gy,K_2的D_0值为4.43Gy,K_4的D_0值为3.63Gy,K_5的D_0值为4.58Gy。说明DEF7A人脑胶质瘤的4个克隆细胞具有不同的放射敏感性。