基于AMPK-ACC信号通路探究miR-543对肺癌细胞放疗敏感性的机制研究

目的:放射抗性是非小细胞肺癌(Non-small cell lung carcinoma,NSCLC)放疗的一个重要障碍。据报道,miR-543在包括NSCLC在内的各种类型的癌症中是一种肿瘤促进因子。本研究旨在探索miR-543在调节NSCLC细胞放射敏感性中的潜在作用。方法:qRT-PCR检测miR-543的表达;CCK8、集落形成实验和流式细胞术等手段探究miR-543对NSCLC细胞生物学功能的影响。WB检测AMPK-ACC信号通路相关蛋白的表达。利用回复实验和辐射处理实验进一步验证miR-543通过AMPK-ACC信号通路对NSCLC细胞的恶性进展和放疗抗性的影响。结果:miR-53在NSCLC组织和细胞中均表达上调。沉默miR-53可以抑制NSCLC细胞的增殖能力,促进细胞周期阻滞和凋亡的发生,减弱放疗抗性。此外,miR-53参与调控AMPK-ACC信号通路,而使用compound C(AMPK-ACC信号通路的抑制剂)可以减弱miR-53沉默对NSCLC细胞行为及放疗敏感性的影响。结论:本研究的结果表明,miR-53可以通过调控AMPK-ACC信号通路增强NSCLC细胞的放疗抗性的机制,提示靶向miR-53可能是改善NSCLC的放射治疗敏感性的潜在治疗靶点。

基于TGF-β/Smad信号通路探究HSF1基因对CAL-27细胞放疗抵抗作用机制

目的基于TGF-β/Smad信号通路探究HSF1基因对CAL-27细胞放疗抵抗作用机制。方法用人口腔鳞癌细胞CAL-27建立放疗抵抗模型,随机分为抵抗组(放射抵抗CAL-27细胞)、NC组(放射抵抗CAL-27细胞转染空载体)、HSF1组(放射抵抗CAL-27细胞转染HSF1shRNA干扰慢病毒载体)。18只SD裸鼠分为口腔癌抵抗组(注射放射抵抗CAL-27细胞)、沉默HSF1组(注射HSF1shRNA干扰慢病毒载体放射抵抗CAL-27细胞),每组各9只。RT-PCR与Western blot检测HSF1、TGF-β、Smad2、Smad3、Smad7基因及蛋白水平。流式细胞仪检测各组口腔癌细胞凋亡情况。双荧光素酶报告基因分析HSF1与TGF-β/Smad2/Smad3靶向关系,游标卡尺测量瘤体并计算瘤体体积。结果放疗前,CAL-27口腔癌细胞形态无变化。放疗后,放疗抵抗口腔癌细胞株排列更加紊乱且细胞数目明显增加。抵抗组CAL-27口腔癌细胞中HSF1、TGF-β、Smad2、Smad3、Smad7基因与蛋白表达水平与NC组比较无显著差异(P>0.05)。与NC组相比,HSF1组CAL-27口腔癌细胞中HSF1、TGF-β、Smad2、Smad3基因与蛋白表达水平降低,Smad7基因与蛋白表达水平升高(P<0.05),HSF1与TGF-β、Smad2及Smad3表达水平呈现正相关性(P<0.05),与Smad7表达水平呈现负相关性(P<0.05)。抵抗组CAL-27口腔癌细胞凋亡率与NC组比较无显著差异(t=0.891,P=0.394),NC组细胞凋亡率低于HSF1组,组间比较差异显著(t=24.110,P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验发现,与pcDNA3.1相比,转染pcDNA3.1-HSF1后野生型TGF-β/Smad2/Smad3活性升高。口腔癌抵抗组裸鼠瘤体体积明显高于沉默HSF1组(t=7.379,P<0.001)。结论沉默HSF1表达可促进口腔癌放疗抵抗细胞凋亡,降低裸鼠瘤体体积,其作用机制可能与调控TGF-β/Smad有关,可提高口腔癌放疗敏感性。

LncRNA-miRNA轴在结直肠癌进展和治疗抗性中的作用

表观遗传因素是生物学和病理机制的关键调节因子,它们可以与不同的分子通路相互作用。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)作为表观遗传因子通过靶向调控微小RNA(microRNA,miRNA)及相关信号通路,在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中发挥促癌或抑癌作用。因此,根据特定的lncRNA/miRNA相互作用,明确lncRNA-miRNA轴对于CRC的诊断、预后及精准靶向策略具有重要价值。本文就lnc RNA-mi RNA轴在CRC增殖、迁移、侵袭和治疗抗性中的作用及机制进行总结与讨论。

DNA-PKcs抑制剂在胶质母细胞瘤治疗中的作用与前景

胶质母细胞瘤是人类中枢神经系统肿瘤中恶性程度最高、预后最差的一类肿瘤,尽管目前对于胶质母细胞瘤可采取手术、辅助放射、化学药物等治疗方式,其预后仍然较差。新的起源学说认为胶质母细胞瘤中的胶质瘤干细胞可能起源于脑室下区,并且与该区的神经干细胞相关。而这种具有干细胞特性的肿瘤细胞与其他干细胞一样,拥有极强的DNA损伤修复能力,并且可以通过这种DNA损伤修复作用来增强肿瘤对于放射治疗的顽固抗性。该文探讨通过抑制DNA损伤修复的关键酶来拮抗胶质母细胞瘤的放疗抗性,提高患者预后的可能性。

中晚期食管鳞癌组织SOX2和Twist1表达及对放化疗疗效影响

目的研究SOX2和Twist1在中晚期食管鳞癌组织中表达情况及其与中晚期食管鳞癌同期放化疗疗效的关系。方法收集2014-04-06-2019-10-27郑州大学附属肿瘤医院收治的40例Ⅱ~Ⅲ期食管鳞癌患者肿瘤组织及相应的癌旁组织标本,采用免疫组化方法检测SOX2和Twist1表达水平;患者均行同期放化疗,治疗结束后4周进行近期疗效评价和远期生存随访。根据近期疗效分为敏感组和抗拒组。分析疗效与SOX2和Twist1的相关性。结果治疗结束后4周评价疗效,其中完全缓解、部分缓解和未缓解分别为13、15和12例。所有患者中位随访时间为17个月(95%CI为13.901~20.099),1年、3年和5年总生存率分别为62.5%、30.3%和25.3%。敏感组Twist1阳性表达率为3.57%(1/28),低于抗拒组的41.67%(5/12),χ^(2)=6.807,P=0.009;SOX2阳性表达率为32.14%(9/28),低于抗拒组的75%(9/12),χ^(2)=6.234,P=0.013。中晚期食管鳞癌组织中Twist1与SOX2表达不相关,r=0.124,P=0.446。生存分析显示:SOX2阴性表达组(评分<3分)生存率高于阳性表达组(评分≥3分),差异有统计学意义,χ^(2)=5.263,P=0.022;Twist1阴性表达组(评分<3分)生存率高于阳性表达组(评分≥3分),差异有统计学意义,χ^(2)=16.850,P<0.001。COX多因素回归分析显示,淋巴结转移情况(HR=6.092,95%CI为1.151~32.236,P=0.034)和SOX2表达(HR=13.106,95%CI为1.966~87.373,P=0.008)为患者独立预后因素。结论中晚期食管鳞癌组织中SOX2和Twist1均高表达,且与放疗敏感性和生存有关联,二者表达水平没有相关性。SOX2和Twist1可能是预测中晚期食管鳞癌放疗疗效新的分子标志物。