抑制LITAF基因对人脑胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡和放疗敏感度的影响

目的分析人脑胶质母细胞瘤组织中LITAF基因mRNA表达情况,并通过抑制人脑胶质母细胞瘤U251细胞中LITAF基因表达,观察其对U251细胞增殖、凋亡和放疗敏感度的影响。方法分析TCGA数据库中人脑胶质母细胞瘤组织中LITAF基因mRNA表达;通过RNAi抑制U251细胞中LITAF基因表达,采用胸腺嘧啶核苷类似物(EDU)检测U251细胞增殖变化,流式细胞仪分析U251细胞凋亡的变化,克隆形成实验和流式细胞分析U251细胞放疗敏感度的变化。结果 TCGA数据库分析结果显示人脑胶质母细胞瘤组织LITAF表达显著高于正常脑组织;抑制LITAF表达后,U251细胞的增殖和凋亡未见明显变化,但在电离辐射后,LITAF抑制组U251细胞凋亡显著低于对照组,克隆形成显著高于对照组,对放疗敏感度减弱。结论 LITAF基因高表达于人脑胶质母细胞瘤组织,抑制人脑胶质母细胞瘤U251细胞中LITAF基因表达不影响细胞的增殖和凋亡,但显著降低细胞的放疗敏感度。

5-氮杂胞苷增加鼻咽癌细胞株C666-1放射敏感度的实验

目的研究5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-Aza)对人鼻咽癌细胞C666-1放射敏感度的影响及可能机制。方法用不同浓度5-氮杂胞苷(0、500、1000、3000、5000 nmol/L)处理C666-1细胞,MTT法检测C666-1细胞增殖,流式细胞仪检测C666-1细胞周期,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3、cleaved PARP及DNA损伤相关蛋白γ-H2AX的表达。结果 5-氮杂胞苷随着药物浓度的增加,对C666-1细胞生长抑制作用增强。用1 000 nmol/L 5-氮杂胞苷处理鼻咽癌细胞进行放射增敏研究。鼻咽癌细胞C666-1接受单纯电离辐射时SF2(照射2 Gy时的细胞存活率)为48%,5-氮杂胞苷联合电离辐射时SF2降为31%,放射增敏比为1.37。5-氮杂胞苷能增加电离辐射诱导凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3及cleaved PARP的表达。结论 5-氮杂胞苷增加鼻咽癌C666-1细胞对电离辐射的敏感度,可能的机制为5-氮杂胞苷能增加电离辐射诱导细胞凋亡。

NOX4在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的研究NOX4在鼻咽癌组织中的表达情况,并分析NOX4与鼻咽癌患者临床病理特征、放射治疗(简称放疗)敏感度及生存预后的关系。方法通过免疫组织化学方法检测97例鼻咽癌及20例正常鼻咽黏膜组织中NOX4的表达情况,分析NOX4与鼻咽癌患者性别、年龄、吸烟史、病理类型、临床分期、复发、远处转移等临床病理特征的关系,进一步分析NOX4与鼻咽癌患者放疗敏感度及生存预后的相关性。结果NOX4在鼻咽癌组织中的表达高于正常鼻咽部黏膜组织(P=0.008)。临床分期(P=0.003)和复发(P=0.007)与NOX4的表达有关,性别、年龄、吸烟史、病理类型、远处转移与NOX4表达无关(P<0.05)。放疗抵抗组NOX4表达高于放疗敏感组(P<0.001),logistic回归单因素和多因素分析显示NOX4是鼻咽癌放疗敏感度的独立预测因素(P<0.001)。Kaplan-Meier法绘制生存曲线,结果显示NOX4低表达的鼻咽癌患者生存明显好于NOX4高表达的患者(P<0.001),进一步Cox回归分析表明NOX4是鼻咽癌患者生存预后的独立预测因素。检测同一患者初发和复发鼻咽癌组织中NOX4的表达,结果显示复发鼻咽癌组织中NOX4表达高于初发鼻咽癌组织(P=0.002)。结论NOX4在人类鼻咽癌组织中高表达,与肿瘤放疗敏感度、复发及生存预后相关。