放线菌WS-13661活性产物的快速鉴别

放线菌WS-13661的代谢产物对农业病原真菌具有很强的抑制活性。试验对其HPLC半制备组分进行生物测定,表明其活性部位在15～20 min;根据HPLC及UV图谱确定其活性成分为五烯类化合物,对其质谱数据进行分析确定了其分子离子峰,经数据库比对,确定其活性成分为钦氏菌素衍生物。

发酵方式对放线菌WS-22011次生代谢产物的影响

以放线菌WS-22011为研究对象,通过研究摇瓶发酵和发酵罐发酵两种不同发酵方式下WS-22011产生的次生代谢产物多样性及产量随时间变化的动态趋势,确定WS-22011最佳发酵方式及兼顾代谢产物多样性、产量的最佳发酵时间。结果表明,对于WS-22011菌株来说,在发酵罐发酵和摇瓶发酵两种发酵方式下产生的次生代谢产物及多样性基本一致,两种发酵方式均可以保证次生代谢产物的多样性和产量,但次生代谢产物最大总产量出现的时间有所差异,从节约时间及成本考虑,可首选发酵罐发酵;而如果需得到所有的次生代谢产物,则首选摇瓶发酵,且发酵时间需适当延长。通过制备分离得到了4个具有较高活性的化合物,LC-MS分析结果表明为碰撞霉素。

放线菌WS-24926产生的刀豆霉素分离纯化及含量测定

从武汉地区土壤中分离到一株放线菌WS-24926,其发酵提取物具有较强的抑制真菌作用。以放线菌菌株WS-24926发酵提取物中的活性代谢产物为目的,应用高效制备液相色谱经过两次分离纯化,得到6个化合物。根据紫外吸收光谱、分子离子峰、物理性状及活性情况等确定组分1、组分2、组分3、组分4、组分6与刀豆霉素B、G、C、A、E较为相似。对菌丝提取物中的刀豆霉素含量进行测定,刀豆霉素B含量最高,为29.20 mg/L,刀豆霉素G含量为2.72 mg/L;刀豆霉素C的含量为0.92 mg/L;刀豆霉素A的含量为12.83 mg/L;刀豆霉素E的含量为18.67 mg/L。化合物5还未明确归属,含量较高,为28.51 mg/L。

放线菌菌株WS-13182产生的活性物质的分离纯化

微生物天然产物分离纯化是获得天然产物活性化合物的重要环节。以分离放线菌菌株WS-13182发酵提取物中活性物质为研究对象,采用制备液相色谱-梯度洗脱法,考察了不同色谱柱和流动相配比对样品分离度的影响,建立了适宜的分析、制备分离条件:采用美国SunfireC18柱(150*2.1mm(i.d)),粒径3.5μm,流速为0.3mL/min,流动相为乙腈和水,加入0.2%乙酸(体积比),梯度洗脱,乙腈的浓度在25min内由40%变至100%(体积比)。将该分析条件放大到制备液相色谱上,从放线菌菌株WS-13182的发酵提取物中制备得到8个化合物,其中6个化合物纯度达90%以上,经LC-MS鉴定为同系物。