敌枯双(Bis-A-TDA)对果蝇(Drosophila melanogaster)的胚胎毒性及烟酰胺的解毒作用

将野生型果蝇分别培养于含0,10,100,150,200,25O,35O,500,700,1000ppm敌枯双的果蝇培养基上,在25℃交配、产卵6d.子代成蝇羽化后,每天检查其外部畸形并计数.解毒试验组加烟酰胺(NA)、敌枯双(Bis-A-TDA)各200ppm于培养基中.实验结果表明:(1)敌枯双对果蝇的胚胎毒性随剂量增加而上升.(2)烟酰胺能部分解除敌枯双对果蝇的胚胎毒性.(3)低剂量敌枯双(10—100ppm)处理,能增加子代成蝇的羽化数,有促进作用.

敌枯双及喷洒敌枯双稻米对罗猴的致畸作用

罗猴(Rhesus monkey)于妊娠d 23～27给予敌枯双及喷洒敌枯双稻米染毒。结果10.0 mg/kg灌胃染毒动物,分别于染毒后d3和d4流产;4.0mg/kg组4只孕猴中,1只孕猴在妊娠d31流产,2只仔猴分别表现为缺肢畸形和短臂畸形;以喷洒敌枯双5次的稻米(残留量分析敌枯唑0.25 ppm)喂饲动物115～120 d,1只孕猴妊娠d46流产,其余2只仔猴检查未见明显异常;对照组动物中,除妊娠d 36流产1只外,其余均未检出明显畸形.

农药敌枯双致畸作用的定性和定量研究

敌桔双对实验动物(大鼠、小鼠和猴)有致畸作用,并有明显的剂量-反应关系和种属差异,对大鼠是强致畸物(TD_(50)为2.18mg/kg)。毒物动力学研究也提示这一点。敌枯双可抑制实验动物胚胎组织DNA和RNA合成,以及抑制人胚上腭间质细胞生长(IC_(50)为1.32×10~6mol/L)。在理论上对人有潜在的致畸。两次人群流行病学调查,均未揭示使用敌枯双地区不良妊娠结局发生率有明显增加;对生产敌枯双女工妊娠结局健康调查,也未表明敌枯双对人有明显的致畸作用。居民食用喷药3次或1次后,稻米的接触日剂量为大鼠致畸阈剂量(TD_(01)为0.22mg/kg)的1/367和1/4400。在目前还未找到有效的农药取代敌枯双情况下,在切实加强危险度管理的基础上,敌枯双可以作为农药使用。

甲状腺激素干扰物二巯基敌枯双生物作用的实验研究Ⅰ 观察指标的探讨

目的 :研究二巯基敌枯双所致甲状腺的形态改变 ,探讨二巯基敌枯双是否属甲状腺激素干扰物。方法 :Wistar大鼠 60只 ,随机分为正常对照组和实验组。正常对照组给予溶剂二甲基亚砜 ,实验组给予二巯基敌枯双二甲基亚砜溶液 ,剂量为 5 0 mg/kg体重。于实验组的给药第 5 d、第 10 d和第 2 0 d,分别放血处死两组动物。测定血清中 T4,TSH的浓度 ;取动物甲状腺称重 ,常规 HE染色 ,光镜下观察。结果 :各时间点实验组血清 T4,TSH的浓度和对照组相比无显著变化 (P>0 .0 5 ) ;实验组动物的甲状腺脏器系数显著高于对照组 ,(P<0 .0 5 ) ;组织学观察到实验组在第 5 d甲状腺滤泡上皮增生 ,有的滤泡出现局灶性增生斑块 ,第 10 d复层化的甲状腺滤泡上皮细胞继续增生 ,并向间质突出 ,形成实心芽 ,第 2 0 d实心芽向继发滤泡分化 ,出现了滤泡腔。结论 :二巯基敌枯双引起甲状腺增生 。

二巯基敌枯双生物作用的实验研究Ⅱ:组织化学观察

目的 :研究甲状腺激素干扰物二巯基敌枯双所致甲状腺组织化学的改变 ,并探讨所致甲状腺增生的最佳取材时间和敏感指标。方法 :Wistar大鼠 6 0只 ,随机分成正常对照组和实验组 ,每组各 30只。正常对照组给予溶剂二甲基亚砜 ,实验组给予二巯基敌枯双的二甲基亚砜溶液 ,剂量为 5 0 m g/ kg体重。于实验组的给药第 5 d、第 10 d和第 2 0 d,分别放血处死两组动物。用酶组织化学方法观察甲状腺琥珀酸脱氢酶 (SDH)、甲状腺过氧化酶酶活性的变化 (TPO) ;用免疫酶法测定核增殖抗原 (PCNA)在甲状腺中的阳性表达。结果 :实验组各期甲状腺滤泡上皮内 SDH和 TPO酶活性明显增高 (P<0 .0 5 ) ,实验组的各期 PCNA表达阳性细胞数也明显高于同期对照组 (P<0 .0 5 )。结论 :甲状腺激素干扰物二巯基敌枯双所致甲状腺滤泡上皮内 SDH和 TPO酶活性增高是 TSH刺激的结果 ,其最佳取材时间应是 5 d以前 ,而敏感指标应该是核增殖抗原 (PC-NA)。

职业接触敌枯双的细胞遗传学效应的研究

选择生产敌枯双工人11名(男2、女9),接触浓度平均为0.45mg/m^3,年限为4～8年,研究职业接触敌枯双后细胞遗传毒理学效应。结果表明,接触组和对照组(14名)外周血淋巴细胞体外SCE和微核发生率无明显差异。敌枯双在体外对人淋巴细胞的UDS(程序外DNA合成)有诱导作用,呈剂量-反应关系。等量烟酰胺与敌枯双和细胞共培养,前者可逆转敌枯双对DNA损伤的作用。推测敌枯双在体外诱发细胞遗传毒性作用,而在接触工人中此种现象不明显,主要原因可能是作用剂量和体内烟酰胺拮抗作用的结果。

职业接触敌枯双的细胞遗传学效应的研究

本文选择生产敌枯双工人11名(2男,9女),接触浓度平均为0.45mg/m^3,年限为4-8年,研究职业接触敌枯双后细胞遗传毒理学效应。结果表明,接触组和对照组(14名,3男11女)外周血淋巴细胞体外SCE和微核发生率无明显差异。敌枯双在体外对人淋巴细胞的UDS(程序外DNA合成)

敌枯双及其代谢产物对人胚上腭间质细胞生长的抑制作用

敌枯双[N,N′-methylene-bis-(2-amino-1,3,4-thiadiazole),MATDA]及其代谢产物敌枯唑(amino-1,3,4 thiadiazole,ATDA)对实验动物有致畸作用,前者作用明显大干后者,但至今仍未发现人群食用喷药后稻米有致畸作用,推测可能由于:人对敌枯双致畸作用不敏感。

二巯基敌枯双干扰大鼠甲状腺功能的时效关系研究

目的 研究甲状腺素干扰物二巯基敌枯双干扰大鼠甲状腺功能的时间进程 ,为完善甲状腺素干扰物甄别方法体系的体内方法提供实验依据。方法 二巯基敌枯双 (5 0 mg/kg)灌胃染毒 ,分别设 1、3、5 d实验组及溶剂对照组 ,每组 16只大鼠 ,在染毒期满后处死动物 ,取血清用放射免疫法测 FT4和 TSH,同时观察甲状腺组织学改变和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达。结果 与对照相比 ,3d组出现显著的 FT4降低并伴 TSH升高 (P<0 .0 5 ) ;5 d组血清 TSH浓度高于对照组 (P<0 .0 5 ) ;组织学观察到 3d组甲状腺滤泡上皮复层化 ,5 d组出现增生斑块 ;免疫组化染色发现 3d和 5 d组甲状腺组织内 PCNA阳性表达细胞数显著增加 (P<0 .0 5 )。结论 二巯基敌枯双对大鼠血清 FT4和 TSH水平的影响发生在第 2或第 3d,组织病理学和 PCNA的免疫组化染色也证实甲状腺组织增生在染毒 3d开始进入原发增殖期。

敌枯双不同途径给药对大鼠胚胎发育的影响

目的研究敌枯双不同给药途经对大鼠胚胎发育的影响。方法清洁级妊娠SD大鼠30只随机分成对照组、经口染毒组、腹腔注射组,每组10只,称重和编号。孕鼠于妊娠7～16 d染毒, 妊娠20 d处死,分析胚胎发育指标与胎仔发育指标,检查有无外观畸形和骨骼畸形。结果各组间着床数比较无显著性差异(P>0．05),孕鼠第20天增重、胎鼠体重、体长、尾长、活胎数、吸收胎率指标,经口染毒组,腹腔注射组与对照组相比有极显著差异(P<0．01),死胎率腹腔注射组与对照组相比有极显著差异(P<0．01),经口染毒组与对照组相比有显著差异(P<0．05),在死胎率、吸收胎率指标上,腹腔注射组高于经口染毒组具有极显著差异(P<0．01)。骨骼畸形率、内脏畸形率腹腔注射组、经口染毒组与对照组相比有极显著差异(P<0．01),但二者之间无显著差异。结论敌枯双腹腔注射对大鼠母体毒性、胚胎毒性、发育毒性和致畸方面的作用比经口染毒更明显,值得相关研究借鉴。

二巯基敌枯双生物作用的实验研究Ⅲ:时效关系的探讨

目的 :研究甲状腺激素干扰物二巯基敌枯双所致甲状腺的形态、血清 T4 和 TSH改变 ,探讨二巯基敌枯双生物作用的时效关系。方法 :Wistar大鼠 78只 ,随机分为正常对照组和实验组。正常对照组给予溶剂二甲基亚砜 ,实验组给予二巯基敌枯双的二甲基亚砜溶液 ,剂量为 5 0 mg/ kg体重。于实验组的给药第 1d、第 3d和第 5 d,分别放血处死两组动物。测定血清中 T4 ,TSH的浓度 ;取动物甲状腺称重 ,同时光镜下观察其形态学的变化。结果 :第 3d和第 5 d实验组血浆 TSH的浓度和对照组相比 ,显著增高 (P<0 .0 5 ) ,第 5 d实验组动物的甲状腺脏器系数显著高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,组织学观察到该组甲状腺滤泡上皮局灶增生成增生斑。第 3d实验组甲状腺脏器系数与对照组比较尽管无差异 ,但组织学观察到该组甲状腺滤泡上皮已增生成复层。结论 :TSH、甲状腺的脏器系数和甲状腺的组织学观察在本实验中呈现明显的时间效应关系 ,而且最早出现生物学指标变化的时间是实验第 3d。

敌枯双和敌枯唑对人胚上腭间质细胞(HEPM)生长抑制作用

本文利用HEPM,测试了敌枯双和敌枯唑对HEPM生长的抑制作用。结果表明,两者均可抑制HEPM生长,并呈现S型剂量反应关系。敌枯双和敌枯唑IC50（细胞生长抑制为对照组50％时的剂量）分别为1.32×10-6M和1.97×10-4M。

敌枯双致恒河猴甲状腺病理形态观察

敌双枯对大小鼠的毒作用,国内已有文献报道,并发现甲状腺是其毒性作用最敏感的靶器官[四川医学院学报1983;14(3):269和1984;15(2):122]。本文对恒河猴在敌枯双作用下的甲状腺损伤进行了病理形态学观察。现将结果报告如下。

敌枯双致神经管畸形的形态学研究

本实验对敌枯双致SD大鼠神经管畸形及其发生机制进行了研究。体重200～270g未经产雌性SD大鼠合笼交配后,于第10天上午9～10时灌服1％敌枯双-花生油混悬液(10mg/kg体重),对照组灌服等量花生油。结果表明,神经管畸形发生率为52.9％,主要是脑膨出和脑膜膨出。神经管畸形发生的形态学研究结果显示,实验组部分神经上皮细胞变性坏死;线粒体肿胀,嵴模糊甚至消失;细胞游离面出现一些大的球形突起;有的细胞逸出至管腔;细胞分裂指数明显降低;中胚层细胞空泡变性,分布稀疏,数量减少,细胞移动减慢。

农药二巯基敌枯双对FRTL-5细胞合成甲状腺球蛋白的影响

目的观察农药二巯基敌枯双对FRTL-5细胞株合成甲状腺球蛋白的影响,并探讨其作用机制以及FRTL-5细胞株用于筛选环境甲状腺素干扰物的可能性。方法FRTL-5细胞分别经0.1、1.0和10.0μg/mL二巯基敌枯双染毒处理48 h后,用酶组织化学法测定培养液中甲状腺球蛋白的浓度;用活细胞爬片的酶细胞化学染色观察细胞内甲状腺过氧化物酶的表达强度,并用透射电镜观察最高浓度处理组细胞的超微结构。结果随二巯基敌枯双浓度的增大,FRTL-5细胞培养液中甲状腺球蛋白的浓度逐渐降低,其中0.1、1.0μg/mL浓度组与溶剂对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),10.0μg/mL浓度组培养液中未能检出甲状腺球蛋白;酶细胞化学染色未见染毒组细胞甲状腺过氧化物酶活性改变,图像分析结果显示其阳性细胞的积分光密度(IOD)值与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);细胞超微结构观察发现染毒组细胞出现粗面内质网扩张。结论二巯基敌枯双可能是通过损伤甲状腺滤泡细胞的粗面内质网,从而影响甲状腺球蛋白的合成与分泌;FRTL-5细胞培养液中甲状腺球蛋白的浓度可以作为体外筛选环境甲状腺素干扰物的敏感指标之一。

敌枯双对SD大鼠的致畸作用

在受精后第10d上午9～10时,给孕鼠一次性灌服0.1%敌枯双花生油混悬液10mg/kg体重。结果:孕鼠孕期平均增重明显受阻,胚胎吸收率高达30.7%,胎鼠的平均身长和体重明显低于正常对照组,畸胎发生率高达84%,查出畸形31种。证明敌枯双对SD大白鼠有明显的胚胎毒作用和致畸作用。

菸酰胺对敌枯双致小鼠畸形的预防作用

农药敌枯双的毒性作用和致畸作用,限制了它的广泛使用。国内外对其生物学活性和毒性进行了不少研究。Beaudoin和Scott等(1973)报道,菸酰胺(NAM)与敌枯双(ATDA)同时给药能预防单独给予敌枯双所致胚胎畸形。本文给妊娠小鼠注射ATDA后给予NAM,观察NAM对小鼠致畸的预防作用,着重探讨菸酰胺的给药时间和剂量对预防ATDA致畸的效果有什么影响,为NAM的实际应用研究提供资料。

敌枯双对小鼠活体精原细胞SCE频率的影响

敌枯双〔N,N＇-甲撑-双(2-氨基-1,3,4-噻二唑)〕作为抗肿瘤药物和化学农药,已证实对实验室肿瘤和水稻白叶枯病具有明显的抑制作用和良好的防治效果。由于该药对动物有强烈的致畸作用,本研究采用敌枯双为实验因素,利用改进的Kanda方法进行实验,为敌枯双的致畸作用提供精原细胞遗传物质方面的实验依据。 将实验动物随机分成三组,即实验组(敌枯双处理组),阳性对照组(环磷酰胺处理组),阴性对照组(双蒸水组)。每组6只小鼠。

敌枯双对雄性小鼠生殖细胞分裂比率及精原细胞染色体畸变的影响

本文研究丁敌枯双对BALB/C雄性小鼠生殖细胞分裂比率及精原细胞染色体畸变的影响。将实验小鼠随机分为三组,即实验组(敌枯双组),阳性对照组(环磷酰胺组)和阴性对照组(双蒸水组)。结果发现:敌枯双能明显诱发精原细胞多倍体率和裂隙率增加,抑制终变期/中期Ⅰ和中期Ⅱ细胞的减数分裂比率,促进精原细胞有丝分裂比率。实验结果还提示:在遗传毒理检测中亚急性实验是必要的,并对实验结果进行了初步讨论。