DNA倍体、PCNA表达与放射敏感细胞对宫颈癌诊断和放疗效果判定的研究

目的:探讨DNA倍体、PCNA表达与放射敏感细胞对宫颈癌的诊断价值,分析和评价3项指标对选择放疗及判定疗效的意义。方法:46例临床拟诊为宫颈癌的患者放疗前测DNA倍体、PCNA表达,行细胞学和病理学检查确诊,于放疗中、后测DNA倍体、PCNA表达和细胞学、病理学检查,观察宫颈细胞的放射反应变化和判断放疗效果。结果:DNA倍体的异倍体量与宫颈癌的异型性和放射敏感性成正相关;PCNA表达与宫颈癌病理分级和放射敏感性成正相关。细胞学放疗前、后诊断与病理学对比分析,其敏感性为100%、特异性为95.65%,其敏感细胞和反应细胞能客观反映宫颈癌的放疗敏感程度和放疗效果。结论:DNA倍体、PCNA表达与细胞学检查可以作为宫颈癌定性和分级诊断的客观依据,可以作为选择放疗和判定疗效的客观指标,三者联合应用对宫颈癌的诊断与判定疗效意义更大。

Bt Cry1Ac抗性粉纹夜蛾离体细胞与敏感细胞mRNA的差异显示

为了研究昆虫对Bt的抗性机制 ,以苏云金芽孢杆菌Cry1Ac活性毒素对粉纹夜蛾离体细胞连续筛选 80代 ,获得了高抗性细胞。采用DDRT PCR技术比较了该抗性细胞与非选择敏感细胞mRNA的差异 ,经反向RNA斑点印迹杂交确证了 5个片段为两种细胞的显著差异表达序列标签(ESTs)。序列分析结果表明 ,敏感细胞特有的三种ESTs都位于cDNA的非编码区 ,两种ESTs(GenBank注册号 :S1 ,CF32 2 4 1 5 ;S3,CF32 2 4 1 7)与数据库中EST没有显著同源性 ,另一种S2(GenBank注册号 :CF32 2 4 1 6)与已登录的某些昆虫的ESTs具有一定的同源性。从抗性细胞特有的R1 (GenBank注册号 :CF32 2 4 1 3)推导出的氨基酸序列与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶有 60 %～63%的同源性 ,从抗性细胞特有的R2 (GenBank注册号 :CF32 2 4 1 4)推导出的氨基酸序列与黏蛋白类有约 30 %的同源性。这些差异表达基因可能与抗性的形成相关。

光周期敏感细胞质雄性不育小麦的初步研究

选用属Ｄ２型细胞质的粗厚山羊草（Ａｅｇｉｌｏｐｓｃｒａｓｓａ）、牡山羊草（Ａｅ．ｊｕｖｅｎａｌｉｓ）和瓦维洛夫山羊草（Ａｅ．ｖａｖｉｌｏｖｉｉ）分别与普通小麦（Ｔｒ．ａｅｓｔｉｖｕｍ）品种鄂恩１号、ＮＰＦＰ和白皮２２４连续回交进行核置换组配的９个异质系（即核质杂种）［１］，和核供体品种鄂恩１号、ＮＰＦＰ和白皮２２４，于分蘖始期（叶原基期）和拔节始期（小花分化期）分别置于１５．５～１６ｈ和２４ｈ长光照下，以武汉自然光照为对照．抽穗时套袋隔离，取样用碘液进行花粉育性观察．结果表明：（１）三个核供体品种在不同发育时期进行上述光长处理，对雄性不育和结实率没有明显影响．而异质小麦在分率始期给予２４ｈ长光照处理，花粉高度不育或全不育，在拔节始期进行上述处理，雄性不育和结实率下降程度大大减低．（２）在异质小麦中以牡山羊草对２４ｈ长光照最敏感，其次为粗厚山羊草和瓦维洛夫山羊草．（３）１５．５～１６ｈ光长对引起雄性不育虽有一定效果，但不及２４ｈ光长影响大．（４）在同一异质条件下，不同核对引起雄性不育的程度有异．（５）碘染花粉观察育性与套袋结实率的变化结果相一致．（６）Ｄ２型细胞质可作为小麦光周期敏感细胞质雄性不育来源的重要遗?

机体非神经组织力学敏感细胞的研究与针推治疗作用机理的新思考

通过简要联系经络实质新的研究成果,系统介绍现代医学生物学非神经组织力学敏感细胞的研究概况和初步分析针推力学刺激的作用形式及作用对象,提出新的针推治疗作用机理思路,为进一步开拓针灸推拿学现代研究空间提供参考。

轮状病毒新敏感细胞的筛选

轮状病毒(RV)的细胞培养问题尚未完全解决,其原因之一可能与敏感细胞较少有关。为此,我们进行了RV新敏感细胞的筛选,发现恒河猴胚肾传代细胞Frhk-4感染不同血清型的人和动物RV标准株Wa、DS-1、YO、ST-3、SA-11和UK后,37℃旋转或静止培养均能产生明显CPE。培养物经ELISA测定含RV抗原,用PAGE检测有特征性RV核酸图型,电镜超薄切片检查感染细胞可见RV颗粒,证实Frhk-4是RV的敏感细胞,这在国内外尚未见报道。同时与MA104和CV-1细胞的比较研究表明,三种细胞对Wa和DS-1的敏感性及增殖滴度,以CV—1最高,Frhk-4次之,MA-104最低。

辐射敏感细胞ku80基因突变及其DNA结合活性研究

RT PCR克隆辐射敏感细胞及其亲本细胞的ku80基因cDNA ,发现辐射敏感细胞的ku80基因与双链断裂DNA末端相互作用的位置存在基因突变 ,用凝胶阻滞和DNA 蛋白质印迹进一步证实突变ku基因编码蛋白结合双链断裂末端DNA的能力下降 。

光周期敏感细胞质雄性不育小麦的研究

光周期敏感细胞质雄性不育小麦的研究①徐乃瑜严家骐王明全（武汉大学生命科学学院武汉４３００７２）１９９１年我们选育创建的（粗厚山羊草）ＮＰＦＰ等异质系小麦在张家口春播，出现花粉全不育现象。为了探讨此类型小麦雄性不育形成的机理，以及为采用两系法开拓小麦杂...

天花粉蛋白引起敏感细胞膜上G蛋白激活的初步研究

天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)是一种单链核糖体失活蛋白,具引产、抗肿瘤、抗HIV等多种生物学功能。天花粉蛋白专一性杀伤敏感细胞的机制一直未被研究清楚。本文首次以生物分子相互作用分析(BIA)证明在天花粉蛋白敏感的细胞膜上存在着能与天花粉蛋白专一结合的组分。我们进一步利用[^(35)S]GTPγS结合实验发现天花粉蛋白能够激活敏感细胞膜上的G蛋白,而对不敏感细胞没有相应的G蛋白激活。这些结果表明了在敏感细胞膜上天花粉蛋白特异受体的存在。

玉米浆半合成培养基用于流行性出血热病毒敏感细胞的实验研究

一般实验室都用199、1640、Eagle等培养基培养动物细胞,这些多系进口产品或要进口的氨基酸等作原料配制,价格昂贵。作者从某些学者成功地将玉米浆用于培养致病菌的研究工作中得到启示,试图用玉米浆培养基代替199、1640、Eagle来培养动物细胞,实验发现它能培养供流行性出血热病毒繁殖的人淋巴细胞,从而获得一种来源丰富的廉价培养基。现将试验结果报告如下。

铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血细胞凝集素抗肿瘤的作用机制及临床应用

铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血细胞凝集素(PA-MSHA)在抗肿瘤领域的应用不断增加。PA-MSHA可以通过抑制表皮生长因子受体(EGFR)通路促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞侵袭和迁移、分化以及改变耐药和细胞上皮-间充质转化(EMT)状态,同时PA-MSHA也通过Toll样受体(TLR)增强巨噬细胞和T细胞对肿瘤细胞的免疫杀伤和抑制。该文梳理并综述关于PA-MSHA抗肿瘤的机制及临床应用,认为PA-MSHA通过作用于细胞甘露糖基的调节过程改变了EGFR和TLR蛋白的糖基化。PA-MSHA可能作用的细胞膜蛋白包括更多的高甘露糖基信号通路受体,阐明PA-MSHA和甘露糖基之间的深层次关系对PA-MSHA的机制研究及临床应用意义重大。

吉非替尼联合NP化疗对EGFR敏感突变的非小细胞肺癌患者免疫状态及预后的影响

目的 探讨存在表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)敏感突变的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者采用吉非替尼联合NP化疗方案治疗的临床疗效,并分析其对免疫状态及预后的影响。方法 依据随机数字表法将焦作市人民医院2019年3月至2022年5月收治的72例EGFR敏感突变的NSCLC患者分为两组,各36例。对照组采用NP化疗方案治疗,观察组在对照组基础上加用吉非替尼治疗,均持续治疗3个周期。比较两组临床疗效、血清肿瘤标志物[糖类抗原125(carbohydrate antigen, CA125)、神经元特异性烯醇化(neuron specific alkenation, NSE)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)、细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragmen, CYFRA21-1)]、免疫状态[自然杀伤细胞(natural killer cell, NK)、CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+]及毒副反应发生情况;并随访6个月,统计两组患者预后情况。结果 观察组临床缓解率较高,且观察组血清肿瘤标志物水平均较低(P<0.05);治疗3个周期时,观察组免疫状态指标改善均优于对照组(P<0.05);两组毒副反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);随访6个月后,观察组生存率高于对照组(P<0.05)。结论 吉非替尼联合NP化疗方案可提高EGFR敏感突变的NSCLC患者临床缓解率,降低CEA、CA125、NSE、CYFRA21-1水平,改善患者免疫状态,且具有良好安全性,有利于改善患者预后。

ESCC组织SNHG17表达及转染si-SNHG17质粒的人食管鳞癌细胞株增殖、凋亡、放射敏感性观察

目的观察食管鳞癌(ESCC)组织小核仁RNA宿主基因17(SNHG17)表达情况及转染si-SNHG17质粒的人ESCC细胞株ECA109增殖、凋亡、放射敏感性。方法取ESCC肿瘤组织与癌旁组织标本各89例份;另取ECA109细胞,并随机分为对照组(Control组,空白培养基处理)、si NC组(转染si NC质粒)、si-SNHG17组(转染si-SNHG17质粒)、si-SNHG17+inhibitor NC组(si-SNHG17与inhibitor NC共转染)、si-SNHG17+miR-375 inhibitor组(si-SNHG17与miR-375 inhibitor共转染);采用RT-qPCR法检测ESCC组织、癌旁组织和各组细胞SNHG17、miR-375、USP14 mRNA,CCK-8法检测各组细胞增殖能力(OD值),流式细胞术及Western blot法检测各组细胞凋亡能力[凋亡率及凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase3、USP14蛋白)],克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性。双荧光素酶报告基因实验分别验证SNHG17、miR-375及miR-375、USP14的靶向性关系。结果与癌旁组织比较,肿瘤组织中SN⁃HG17、USP14 mRNA表达升高,miR-375表达降低(P均<0.05)。与Control组、si-NC组比较,si-SNHG17组SNHG17表达、OD值、Bcl-2及USP14表达降低,miR-375表达、细胞凋亡率、放射敏感性、Bax及Caspase3蛋白表达升高(P均<0.05)。与si-SNHG17组、si-SNHG17+inhibitor NC组比较,si-SNHG17+miR-375 inhibitor组OD值、Bcl-2及USP14表达升高(P均<0.05),miR-375表达、细胞凋亡率、放射敏感性、Bax及Caspase3蛋白表达降低(P均<0.05)。SN⁃HG17靶向负调控miR-375表达,miR-375靶向负调控USP14表达。结论ESCC组织中SNHG17表达较癌旁组织升高;转染si-SNHG17质粒可抑制ECA109细胞增殖,促进细胞凋亡,增强细胞的放射敏感性,机制可能是上调miR-375来抑制USP14蛋白的表达。

电离辐射敏感细胞株SX—9NDA损伤修复特点的研究

为探讨影响细胞辐射敏感性的分子机理,采用一株诱变得来的辐射敏感细胞SX-9(Do=0.65Gy)为材料,研究其DMA损伤修复特点,并与其野生型细胞SR-1小鼠乳癌细胞FM3A的衍生株(Do=1.2Gy)进行比较。

基于多通路神经网络模型预测药物敏感性响应

准确预测药物敏感性响应是当前个性化治疗的关键。利用深度学习强大的特征学习能力,提出一种基于多通道神经网络模型的预测方法。首先,采用深度学习算法对细胞系的多组学特征分别处理,采用多个图神经网络模块提取药物分子图的多级子结构特征;然后,引入共同注意力机制评价各通路特征组合对药物-细胞系敏感性响应的影响,优化细胞系和药物特征;最后,通过深层神经网络模型预测。通过基于GDSC和CCLE数据集的测试,并与RefDNN、DeepCDR和GraphCDR算法进行比较,验证算法性能。

LS区存在对光流敏感细胞

猫视皮层LS（Lateral supersylvian）区细胞的感受野面积远大于初级视皮层细胞,对运动光棒有良好的反应,约有80％的细胞对方向敏感,主要处理运动信息。有人认为它相当于猴子的MT（Middle temporal）区。MT区的作用是将来自初级视区的信息输入进行加工,进而输出给MST（Middle superior temporal等高级视区,最终形成对旋转、收缩/扩张、平移、形变等由本体运动引入的大范围较复杂的光流信息的反应。尚不清楚猫视皮层是否存在能对较复杂光流信息反应的高级脑区,对光流信息加工方式是否与猴相同。基于猫LS区细胞感受野网膜位置与最佳运动方向关系的研究,Sherk等认为,LS区细胞可能参与对光流刺激的信息加工。然而,直接用光流刺激进行的研究,在猫中尚未见报道。我们采用旋转、收缩/扩张、平动等刺激模式研究,结果显示LS区一些细胞对旋转、收缩/扩张等光流刺激敏感。

2013年至2015年江西省脊髓灰质炎实验室细胞敏感性监测分析

目的评价江西省疾病预防控制中心脊髓灰质炎(脊灰)实验室2013年至2015年所用细胞系对脊灰病毒的敏感性,为维持无脊灰工作提供可靠的质量保证。方法选择江西省脊灰实验室2015年制备的Sabin株Ⅰ﹑Ⅱ﹑Ⅲ型质量控制株,以及国家脊灰实验室提供的合格的无支原体污染的RD和L20B细胞系,采用96孔微量培养板滴定法测定2013年至2015年江西省江西省疾病预防控制中心脊髓灰质炎(脊灰)实验室所用细胞系对脊灰病毒的敏感性。结果江西省脊灰实验室2013~2015年细胞敏感性试验结果 :人横纹肌肉瘤细胞(RD)细胞均值及标准差为:Ⅰ型7.32±0.23,Ⅱ型6.97±0.20,Ⅲ型6.88±0.23;转人脊灰病毒受体的小鼠肺细胞系(L20B)细胞均值及标准差为:Ⅰ型7.03±0.19,Ⅱ型6.93±0.14,Ⅲ型6.62±0.18,与江西省脊灰实验室质量控制标准株(Laboratory quality control standard,LQC)的参考值相比其滴度均波动在±0.5log10CCID50/0.1ml以内。结论 2013年至2015年江西省江西省疾病预防控制中心脊髓灰质炎(脊灰)实验室所用细胞系对脊灰病毒的敏感性良好。

河北省脊髓灰质炎实验室细胞系敏感性实验方法的建立

目的评价河北省疾病预防控制中心脊髓灰质炎(脊灰)实验室所用细胞系对脊灰病毒的敏感性,制备河北省脊灰实验室质量控制的标准毒株(QC)。方法96孔微量培养板滴定法。结果河北省脊灰实验QC3次独立的细胞敏感性实验结果的滴度波动±0·5log10CCID50,同时用中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家脊灰实验室提供的已知滴度的中国sabin参考株(ChinaSabinTestReferenceStrain;CSTRS)作平行对照,CSTRS株3次滴度结果与其本身提供的参考值相比较,其滴度波动也均在±0·5log10CCID50。结论河北省脊灰实验室QC结果符合实验要求,脊灰实验室所用细胞系对脊灰病毒的敏感性未下降。

苦参碱对结肠癌耐药细胞化疗药物敏感性及自噬水平的影响

目的探讨苦参碱对结肠癌耐药细胞化疗药物敏感性及自噬水平的影响。方法分别采用浓度为0.5mg/ml、1 mg/ml、2 mg/ml、4 mg/ml、8 mg/ml苦参碱作用于结肠癌细胞HCT-8/VCR,分别在24 h、48 h,采用CCK-8法检测苦参碱对结肠癌细胞HCT-8及其耐药细胞HCT-8/VCR的抑制作用,并计算出抑制率;运用Western Blotting检测自噬相关基因P62、Beclin-1、LC3蛋白表达。采用流式细胞术检测苦参碱作用耐药细胞后的细胞凋亡率。结果在苦参碱作用24 h和48 h后,HCT-8细胞增殖的抑制作用随着苦参碱浓度的增加而增强,苦参碱对HCT-8细胞增殖的抑制作用呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.001)。对各组细胞的凋亡率检测发现,采用苦参碱的实验组的细胞凋亡率大大高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。在苦参碱应用24 h后,HCT-8/VCR细胞质中出现了自噬泡。Western Blotting检测显示随着苦参碱浓度的增加,P62、Beclin-1、LC3蛋白的表达水平也随之增强。结论苦参碱能够提高结肠癌耐药细胞的自噬水平,逆转结肠癌耐药细胞HCT-8/VCR的多药耐药性,诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖。

PDCD4对肝癌细胞生物学功能的影响机制及其在化疗敏感性中的作用

目的探讨程序性细胞死亡-4(PDCD4)对肝癌细胞生物学功能的影响机制及其在化疗敏感性中的作用。方法应用q RT-PCR和Western Blot检测肝癌细胞HepG2、SMMC-7721、MHCC97H和正常的肝细胞L02中PDCD4的水平。采用肝癌细胞Hep G2为研究对象,将转染PDCD4过表达载体(p Ds Red2-N1-PDCD4)的HepG2细胞设置为PDCD4过表达组;将60μmol/L替莫唑胺作用24 h的HepG2细胞设置为替莫唑胺组;将正常肝癌细胞Hep G2(不加替莫唑胺)设置为对照组;将转染pDs Red2-N1-PDCD4载体后经60μmol/L替莫唑胺作用24 h的Hep G2细胞设置为联合组。采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western Blot检测细胞中Bax、Bcl-2、MMP-9表达水平。结果 PDCD4在肝癌细胞HepG2、SMMC-7721、MHCC97H中的表达水平均低于正常的肝细胞L02(P﹤0.01),肝癌细胞HepG2中的PDCD4表达水平最低;PDCD4过表达组、替莫唑胺组、联合组的肝癌细胞存活率均明显低于对照组(P﹤0.01);PDCD4过表达组、替莫唑胺组、联合组的肝癌细胞凋亡率均明显高于对照组(P﹤0.01);PDCD4过表达组、替莫唑胺组、联合组肝癌细胞中Bax的表达水平均明显高于对照组(P﹤0.01);Bcl-2、MMP-9的表达水平均明显低于对照组(P﹤0.01);联合组肝癌细胞中Bax的表达水平明显高于PDCD4过表达组和替莫唑胺组(P﹤0.01)。结论 PDCD4在肝癌细胞中低表达,PDCD4可抑制肝癌细胞的增殖,促进肝癌细胞的凋亡,增加肝癌细胞的化疗敏感性,其作用机制可能与Bax、Bcl-2、MMP-9有关。