救必应—玫瑰茄复方牙膏的抑菌功效评价

对以救必应粉末、玫瑰茄提取物为抑菌物质所配置的复方牙膏做抑菌试验。受试菌为金黄色葡萄球菌、牙龈卟啉单胞菌、变异链球菌。测试方法为牛津杯法和平板稀释法,并将其比较。通过实验证明平板稀释法的抑菌评价较佳。该救必应-玫瑰茄复方牙膏对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度为12.50mg/mL,对牙龈卟啉单胞菌的最小抑菌浓度为50.00mg/mL,对变异链球菌的最小抑菌浓度为300.00mg/mL。

救必应酸的单体制备及RP-HPLC法测定救必应药材及精制品中3种活性成分的含量

目的:制备高纯度的救必应酸并测定救必应药材及精制品中3种活性成分紫丁香苷、长梗冬青苷、救必应酸的含量。方法:采用醇提法制备救必应皂苷,以甲醇和氢氧化钠进一步水解,并经重结晶后得到救必应酸单体。采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定救必应药材及精制品1和精制品2中紫丁香苷、长梗冬青苷、救必应酸的含量。色谱柱为Agilent XDB C18,流动相为水-乙腈(梯度洗脱),柱温为30℃,流速为1.2 m L/min,检测波长为210 nm,进样量为10μL。结果:所制救必应酸纯度达99%以上。紫丁香苷、长梗冬青苷、救必应酸进样量分别在0.18~3.22、0.59~10.36、0.20~3.53μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0.999 9),精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均小于2.0%(n=6~7),平均加样回收率为96.08%~100.81%(RSD≤1.98%,n=6)。紫丁香苷、长梗冬青苷、救必应酸的含量在救必应药材中分别为1.61%、7.26%、1.29%(RSD≤1.08%,n=3),在精制品1中分别为0、82.59%、4.18%(RSD≤1.67%,n=3);在精制品2中分别为0、73.29%、7.41%(RSD≤1.15%,n=3)。结论:所制救必应酸纯度高、制备方法简单且安全环保。建立的RP-HPLC法简单、可靠,可满足快速测定救必应药材及其精制品含量的要求。

救必应抑菌抗炎有效部位筛选

目的:提取分离救必应,得到各不同的极性部位,进行抑菌和抗炎实验筛选。方法:以不同极性的有机溶剂提取分离救必应,各部位用试管稀释法抑菌筛选,效果显著部位先进行二甲苯诱导小鼠耳肿胀和棉球诱导大鼠肉芽肿的抗炎实验筛选,再以硅胶柱层析洗脱分离,进一步抑菌实验筛选。结果:救必应乙醇提取部位具有较强的抑菌和抗炎作用,蒸馏水提取部位有较强抑菌作用,但无抗炎作用。柱层析分离筛选之后,抑菌部位主要发生在乙醇提取部位以甲醇:氯仿(1:1)洗脱部分,水提取部位90%乙醇和70%乙醇洗脱部分。

救必应的化学成分研究

对救必应根皮的化学成分进行了系统研究。从其中分离并鉴定了12个化合物,分别为铁冬青酸(Ⅰ)、坡模醇酸(Ⅱ)、具栖冬青苷(Ⅲ)、苦丁冬青苷H(Ⅳ)、3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-3β,19α-二羟基齐墩果烷-12-烯-28-酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯(Ⅴ)、丁香脂素4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅵ)、咖啡酸4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅶ)、香草酸4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅷ)、丁香苷(Ⅸ)、芥子醛葡萄糖苷(Ⅹ)、β-谷甾醇(Ⅺ)和胡萝卜苷(Ⅻ)。其中,化合物Ⅱ、Ⅳ～Ⅷ为首次从该植物中分离得到。

救必应提取物心血管药理作用

研究表明:救必应醇提物具有降低冠脉流量、减慢心率及使心肌收缩力减弱,提高耐缺氧能力及抗心律失常作用;救必应水提物作用与醇提物相似,但减慢心率及减弱心肌收缩力的作用不明显。

救必应水提物与抗菌药联用对产ESBLs细菌的抑制效果

【目的】探讨救必应水提取物与抗菌药联合诱导细菌传代的体外抑菌活性,为救必应的综合开发利用提供参考依据。【方法】采用96孔反应板二倍微量稀释法体外检测救必应水提取物与抗菌药的最小抑菌浓度(MIC),并以1/2 MIC的救必应水提取物与抗菌药联合诱导产超广谱β-内酰胺酶(Extended spectrum beta-lactamases,ESBLs)细菌传代,然后用微量棋盘稀释法测定救必应水提取物与抗菌药联合作用后的部分抑菌浓度指数(FICI)。【结果】救必应水提取物的MIC为1.0 g/mL,以0.5g/mL的救必应水提取物与阿莫西林、左氧氟沙星、克林沙星、磺胺间甲氧嘧啶、加替沙星、头孢噻呋钠6种抗菌药联合诱导产ESBLs细菌传代后MIC显著降低,联用后的FICI分别为0.375、0.750、0.750、0.515、0.750和0.750。【结论】救必应水提取物可明显增强抗菌药对产ESBLs细菌的抗菌活性,且呈协同或相加作用。

救必应水提取物对产ESBLs细菌的抑菌机理研究

为了探讨救必应水提取物的抑菌作用及抑菌机理,采用2倍微量稀释法和琼脂平板稀释培养计数法,测定救必应水提取物对产ESBLs(extended spectrumβ-lactamases)细菌的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC),通过对细菌生长曲线、细菌超微结构、细胞壁和细胞膜通透性变化试验、核酸合成抑制试验研究救必应水提取物的抑菌机理。结果表明,与不添加提取物的对照组相比,救必应水提取物能够影响细菌的生长规律,使细菌破损严重,细胞壁和细胞膜通透性增加,细胞质外渗,菌液中AKP含量、可溶性蛋白含量增多、大肠杆菌DNA荧光强度明显减弱。研究表明,救必应水提取物的抑菌机理是通过细菌细胞壁和细胞膜通透性的变化,抑制细菌核酸的合成实现的。

救必应不同提取物对血压影响的实验研究

以大鼠为实验动物,观察救必应不同提取部位对血压的影响。结果表明,静脉注射救必应乙醇提取物、正丁醇提取物、水提取物对正常大鼠血压都有快速的降压作用,其中以舒张压下降最为明显。救必应乙醇提取物降压维持时间最长,其次为正丁醇提取物。结果提示:救必应乙醇提取物的降压效果强于正丁醇提取物,而后者又强于水提物,说明乙醇提取物中可能含有更多降压活性成分。

救必应不同提取物与西药联合对产ESBLs细菌作用研究

试验旨在探讨4种救必应提取物与抗菌药物联合诱导细菌传代的体外抑菌活性。本试验制备了4种救必应提取物,采用96孔反应板二倍微量稀释法体外检测提取物与抗菌药物联合诱导耐药大肠杆菌传代的抑菌作用。结果显示,4种救必应提取物与抗菌药物联合诱导细菌传代对耐药大肠杆菌有不同程度的抑菌活性,其中提取物Ⅰ、Ⅲ与抗菌药物联合效果最好。提示,救必应提取物Ⅰ、Ⅲ与抗菌药物联合诱导细菌传代具有体外抗耐药菌作用。

救必应正丁醇提取物对血压及心率影响的实验研究

救必应正丁醇提取物对不同状态下血压及心率作用研究结果表明,静脉注射本品对正常大鼠及夹闭颈总动脉升压大鼠均有显著降压作用,血压下降百分率尤以后者更为明显,持续时间更为长,且有减慢心率的作用。而对失血性低血压大鼠无明显影响,十二指肠灌注本品亦可使血压显著下降,而对心率无明显影响。提示本品具有明显降压和升压状态下减慢心率的作用。

救必应正丁醇提取物抗心律失常和抗心肌缺血作用研究

救心应正丁醇提取物腹腔注射给药可减少氯仿诱发小鼠心室纤颤的发生率和氯化钡所致大鼠室性心律失常的发生率，增加引起大鼠室性心律失常的乌头碱用量，改善垂体后叶素引起的心肌缺血性心电图，提高小鼠对心肌缺氧的耐受时间，提示救必应正丁醇提取物具有抗心律失常和抗心肌缺血作用。

高效液相色谱法测定救必应及其制剂中丁香苷的含量

目的 :建立救必应及其制剂中丁香苷的含量测定方法。方法 :采用岛津Shim packCLC ODS柱 ,乙腈 水 ( 1∶9)为流动相 ,检测波长 2 6 5nm。结果 :平均回收率为 98.6 % ,RSD为 3.5 % (n =5 )。结论 :方法简便 ,结果准确 ,可用于救必应及其制剂的质量控制。

救必应中药血清与抗菌药联合对产ESBLs细菌抑菌效果的研究

本试验主要探讨救必应中药血清与抗菌药联合诱导细菌传代的体外抑菌活性。制备救必应中药血清,采用二倍微量稀释法体外检测抗菌药的最小抑菌浓度(MIC),然后救必应中药血清与抗菌药联合诱导产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)细菌传代。救必应中药血清与抗菌药联合诱导细菌传代对耐药大肠杆菌有不同程度的抑菌活性。救必应中药血清可明显地增强β-内酰胺类抗菌药、氨基糖苷类抗菌药、喹诺酮类抗菌药和卡巴氧类抗菌药对耐药菌的抑制作用。

救必应酸酯类衍生物的合成、鉴定及其体外抗肿瘤活性研究

目的:合成并鉴定救必应酸酯类衍生物,并评价其体外抗肿瘤活性。方法:以救必应酸为原料,通过28位酯化、3β位和23位羟基与酸酐反应合成救必应酸酯类衍生物;采用高分辨质谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱及理化性质对合成的救必应酸酯类衍生物进行结构鉴定。采用MTT法评价紫杉醇(阳性对照)、救必应酸及救必应酸酯类衍生物对人宫颈癌细胞He La、人恶性黑色素瘤细胞A375、人肺腺癌细胞SPC-A1、人肝癌细胞HepG2的体外抗肿瘤活性[以半数抑制浓度(IC50)为指标]。结果:共合成了6个救必应酸酯类衍生物,分别为救必应酸甲酯(化合物1)、3,23-O-双(乙酰基)救必应酸甲酯(化合物2)、3,23-O-双(丙酰基)救必应酸甲酯(化合物3)、3,23-O-双(丁酰基)救必应酸甲酯(化合物4)、3,23-O-双(邻苯二甲酰基)救必应酸甲酯(化合物5)及3,23-O-双(丁二酰基)救必应酸甲酯(化合物6)。与紫杉醇比较,化合物5和化合物6对HeLa、A375、HepG2、SPC-A1细胞的抗肿瘤活性与其相似,差异无统计学意义(P>0.05),救必应酸及其他化合物的IC50显著减小(P<0.05)。结论:本研究合成了6个救必应酸酯类衍生物,其中化合物5、6具有显著的体外抗肿瘤活性,可为后续研究提供参考。

救必应及其常用同属药用植物高效薄层指纹图谱研究

目的以丁香苷、具栖冬青苷和铁冬青酸为对照建立救必应药材主要有效成分的高效薄层指纹图谱,分析比较取自救必应不同部位和不同横切面厚度的茎皮的指纹图谱,并与较易与之混淆的同属药用植物毛冬青及岗梅的指纹图谱进行比较。方法采用硅胶GF254高效预制薄层板,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(体积比8∶24∶5∶2∶2)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液显色后获得薄层荧光色谱指纹图谱,经指纹图谱系统解决方案软件(ChromafingerTM)生成共有模式,并进行相似度与主成分分析。结果救必应薄层荧光色谱指纹图谱由11条特征荧光斑条组成。将荧光色谱图像与轮廓扫描图谱结合分析,建立了救必应指纹图谱模式。结论救必应不同药用部位之间、不同厚度药材之间及与其同属药用植物之间指纹图谱差异均较大,应加以区别,不可混用。

救必应中总苷类物质提取技术研究

目的制定中药救必应中总苷类物质的提取工艺。方法以高效液相色谱法测定的长梗冬青苷、紫丁香苷提取得率为指标,以L9(3)4正交设计进行提取工艺中多项参数的优化,采用优化的参数进行实验室提取,通过对提取物成分分析判断该工艺的可行性。结果救必应中总苷类物质最佳提取工艺为:每次用12倍量的50%乙醇为溶剂,加热回流90 min,提取3次。总苷类提取物的得率为19.5%,其中含长梗冬青苷(292 mg/g)、紫丁香苷(59.5 mg/g)、芥子醛葡萄糖苷、丁香树脂醇4’-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、丁香树脂醇4’,4’’-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷等苷类化合物。结论采用优化的实验室工艺进行提取,提取物中含有多个苷类物质。对提取物的分析表明该提取工艺切实可行。

救必应酸在大鼠体内的口服生物利用度研究

目的:研究救必应酸在大鼠体内药动学和口服生物利用度。方法:建立测定大鼠血浆中救必应酸浓度的RP-HPLC法。考察大鼠经灌胃和尾静脉给予40 mg·kg^(-1)的救必应酸后血药浓度变化。采用3p97软件计算分析药动学参数和口服生物利用度。结果:灌胃组大鼠的Cmax为(0.81±0.22)μg·ml^(-1),Tmax为(45.24±5.13)min,T1/2为(101.47±8.25)min,AUC为(76.3±13.68)μg·min-1·ml^(-1);静脉注射组的T1/2为(73.68±11.02)min,AUC为(1 687.4±29.54)μg·min^(-1)·ml^(-1)。救必应酸口服利用度为4.52%。结论:救必应酸的口服生物利用度较差。

救必应中长梗冬青苷提取工艺正交试验优化

目的:研究长梗冬青苷最佳提取工艺条件。方法:采用正交试验设计研究不同浓度的乙醇、乙醇体积、提取时间和提取次数对长梗冬青苷提取率的影响;采用高效液相色谱法测定提取物中长梗冬青苷含量。结果:救必应中长梗冬青苷最佳提取条件为加入6倍量70%乙醇,回流提取3次,每次1 h。结论:本法提取效率高,适合大量提取,可用于工业化生产。

救必应的形态组织学与高效液相色谱法鉴别

本文报道救必应的形态组织学与高效液相色谱法鉴别研究结果。为救必应的鉴别提供依据。

救必应超临界CO_2萃取物的GC-MS分析

为了寻找有效成分,开发救必应这一药物资源,笔者对救必应超临界CO_2萃取物进行GC-MS分析,得到72个峰,确定了其中51个成分及其相对含量。