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教酒链霉菌L1105木聚糖酶基因xynA原核表达及诱导产酶优化
被引量:
2
1
作者
熊科
崔晓亭
+1 位作者
高乐
李秀婷
《中国调味品》
CAS
北大核心
2016年第9期1-4,23,共5页
教酒链霉菌(Streptomyces chartreusis)L1105产木聚糖酶性质优良,具有良好的应用价值。目前,尚未见其酶基因克隆表达的报道。研究将教酒链霉菌L1105木聚糖酶基因xynA克隆、连接、转导至原核表达系统中并研究表达系统在不同的时间、温度...
教酒链霉菌(Streptomyces chartreusis)L1105产木聚糖酶性质优良,具有良好的应用价值。目前,尚未见其酶基因克隆表达的报道。研究将教酒链霉菌L1105木聚糖酶基因xynA克隆、连接、转导至原核表达系统中并研究表达系统在不同的时间、温度及IPTG浓度下诱导表达的产酶活力水平。结果表明:教酒链霉菌L1105木聚糖酶基因原核表达载体成功构建,优化诱导表达的最终条件为诱导25h,诱导温度23℃,加入IPTG浓度为0.7mmol/L,在此条件下,获得最大的酶活力45.07U/mL,较初始酶活值3.94U/mL提高了11.43倍。研究为教酒链霉菌L1105产优良木聚糖酶的工业化应用提供了理论依据。
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关键词
教酒链霉菌l1105
木聚糖酶
基因xynA
原核表达
产酶优化
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职称材料
教酒链霉菌NRRL 3882中钙霉素生物合成后修饰基因calD的功能分析
被引量:
2
2
作者
李园莉
苟丽霞
+3 位作者
吴秋林
梁晶丹
邓子新
汪志军
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期148-156,共9页
【目的】钙霉素是二价阳离子载体,是一类含有吡咯环的聚醚类抗生素,广泛用于细胞二价阳离子的生物学功能研究。本文以钙霉素生物合成基因簇中cal D基因为研究对象,通过蛋白质同源序列比对、基因敲除、回补验证及HPLC/MS分析,对cal D基...
【目的】钙霉素是二价阳离子载体,是一类含有吡咯环的聚醚类抗生素,广泛用于细胞二价阳离子的生物学功能研究。本文以钙霉素生物合成基因簇中cal D基因为研究对象,通过蛋白质同源序列比对、基因敲除、回补验证及HPLC/MS分析,对cal D基因的功能进行表征。【方法】对cal D基因功能进行生物信息学预测。选用钙霉素产生菌Streptomyces chartreusis NRRL 3882,通过PCR-targeting的方法对cal D基因进行敲除获得突变株,再将cal D基因克隆到链霉菌整合质粒上,通过接合转移技术将cal D回补到缺失株中。使用HPLC/MS技术对菌株发酵产物进行分析。【结果】生物信息学预测Cal D蛋白酶属于氧化还原酶。获得cal D基因敲除突变株Δcal D及基因回补菌株Δcal D:cal D。HPLC/MS检测到cal D基因的缺失菌株大幅降低钙霉素产生能力,与野生型菌株相比,突变株中积累更多的3-Hydroxylcezomycin和更少的氮-去甲基钙霉素。【结论】cal D参与钙霉素的生物合成。cal D的缺失导致3-Hydroxylcezomycin的积累,推测cal D负责钙霉素生物合成途径中苯并噁唑环3位上羟基转化成酮基的氧化反应。初步阐明了cal D基因在钙霉素生物合成途径中的功能机制。
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关键词
教
酒
链
霉菌
NRR
l
3882
钙霉素
ca
l
D基因
3-Hydroxy
l
cezomycin
原文传递
题名
教酒链霉菌L1105木聚糖酶基因xynA原核表达及诱导产酶优化
被引量:
2
1
作者
熊科
崔晓亭
高乐
李秀婷
机构
北京工商大学北京食品营养与人类健康高精尖创新中心
北京工商大学食品质量与安全北京实验室
北京工商大学北京市食品风味化学重点实验室
北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心
出处
《中国调味品》
CAS
北大核心
2016年第9期1-4,23,共5页
基金
国家自然科学基金(31371723)
北京市自然科学基金(5144026)
文摘
教酒链霉菌(Streptomyces chartreusis)L1105产木聚糖酶性质优良,具有良好的应用价值。目前,尚未见其酶基因克隆表达的报道。研究将教酒链霉菌L1105木聚糖酶基因xynA克隆、连接、转导至原核表达系统中并研究表达系统在不同的时间、温度及IPTG浓度下诱导表达的产酶活力水平。结果表明:教酒链霉菌L1105木聚糖酶基因原核表达载体成功构建,优化诱导表达的最终条件为诱导25h,诱导温度23℃,加入IPTG浓度为0.7mmol/L,在此条件下,获得最大的酶活力45.07U/mL,较初始酶活值3.94U/mL提高了11.43倍。研究为教酒链霉菌L1105产优良木聚糖酶的工业化应用提供了理论依据。
关键词
教酒链霉菌l1105
木聚糖酶
基因xynA
原核表达
产酶优化
Keywords
Streptomyces chartreusis
l
1105
xy
l
anase
xynA gene
prokaryotic expression
enzyme production optimization
分类号
TS261.12 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
教酒链霉菌NRRL 3882中钙霉素生物合成后修饰基因calD的功能分析
被引量:
2
2
作者
李园莉
苟丽霞
吴秋林
梁晶丹
邓子新
汪志军
机构
上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室
出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期148-156,共9页
基金
国家自然科学基金面上项目(No.30770016)
国家973计划项目(No.2012CB721000)
文摘
【目的】钙霉素是二价阳离子载体,是一类含有吡咯环的聚醚类抗生素,广泛用于细胞二价阳离子的生物学功能研究。本文以钙霉素生物合成基因簇中cal D基因为研究对象,通过蛋白质同源序列比对、基因敲除、回补验证及HPLC/MS分析,对cal D基因的功能进行表征。【方法】对cal D基因功能进行生物信息学预测。选用钙霉素产生菌Streptomyces chartreusis NRRL 3882,通过PCR-targeting的方法对cal D基因进行敲除获得突变株,再将cal D基因克隆到链霉菌整合质粒上,通过接合转移技术将cal D回补到缺失株中。使用HPLC/MS技术对菌株发酵产物进行分析。【结果】生物信息学预测Cal D蛋白酶属于氧化还原酶。获得cal D基因敲除突变株Δcal D及基因回补菌株Δcal D:cal D。HPLC/MS检测到cal D基因的缺失菌株大幅降低钙霉素产生能力,与野生型菌株相比,突变株中积累更多的3-Hydroxylcezomycin和更少的氮-去甲基钙霉素。【结论】cal D参与钙霉素的生物合成。cal D的缺失导致3-Hydroxylcezomycin的积累,推测cal D负责钙霉素生物合成途径中苯并噁唑环3位上羟基转化成酮基的氧化反应。初步阐明了cal D基因在钙霉素生物合成途径中的功能机制。
关键词
教
酒
链
霉菌
NRR
l
3882
钙霉素
ca
l
D基因
3-Hydroxy
l
cezomycin
Keywords
Streptomyces chartreusis NRR
l
3882, Ca
l
cimycin, ca
l
D gene, 3-Hydroxycezomycin
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
教酒链霉菌L1105木聚糖酶基因xynA原核表达及诱导产酶优化
熊科
崔晓亭
高乐
李秀婷
《中国调味品》
CAS
北大核心
2016
2
下载PDF
职称材料
2
教酒链霉菌NRRL 3882中钙霉素生物合成后修饰基因calD的功能分析
李园莉
苟丽霞
吴秋林
梁晶丹
邓子新
汪志军
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
原文传递
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