散发性结肠癌中相关基因突变的研究进展

结直肠癌是常见的消化道肿瘤之一,其病因和发病机制十分复杂,大部分肠癌都是非遗传性的"散发性肠癌"。散发性结肠癌是一个多基因突变累积作用的结果,主要包括癌基因的激活、抑癌基因的失活及错配修复基因的缺失。近年来,从分子水平上研究散发性结肠癌的发生、发展及预后,寻找有效的治疗方法,已成为热点。本文围绕着散发性结肠癌相关基因突变的最新研究进展作一综述,为更好地研究散发性结肠癌提供一定理论依据。

基因组不稳定性在散发性结肠癌中的研究现状

结肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,其中80%以上为散发性结肠癌。散发性结肠癌是一种异性疾病,主要包括三条基因组不稳定性途径:染色体不稳定性(CIN)、微卫星不稳定性(MSI)和Cp G岛甲基化表型(CIMP)。深入探讨散发性结肠癌发生、发展中的生物学途径,对肿瘤的早期诊断和预防治疗具有重要指导意义。

hMSH6和P53在散发性结肠癌中的表达及意义

目的:探讨hMSH6和P53蛋白在散发性结肠癌(SCC)中的表达及二者与SCC临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化法检测60例SCC以及癌旁组织hMSH6和P53蛋白的表达情况。结果:SCC中hMSH6蛋白的阳性表达率明显低于癌旁组织,P53蛋白的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.01,P<0.05)。SCC中hMSH6蛋白的表达与肿瘤浸润深度和发生部位有关(P<0.05);P53蛋白的表达与SCC临床病理特征均无关(P>0.05)。SCC中,hMSH6与P53蛋白的表达呈负相关(r=-0.321,P<0.05)。结论:hMSH6和P53蛋白的异常表达与SCC的发生发展和临床病理特征有关。

hMLH1和miR-148a表达与散发性结直肠癌微卫星不稳定性的关系

目的检测散发性结直肠癌(sCRC)组织中人类错配修复基因1(hMLH1)蛋白和miR-148a表达及其与微卫星不稳定性(MSI)的关系。方法收集黄冈市中心医院病理科保存的sCRC组织标本90例及其对应癌旁正常组织。收集患者临床病历资料,采用多重荧光PCR法检测组织DNA微卫星不稳定性,免疫组化染色法检测组织hMLH1蛋白表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测组织miR-148a表达量,双荧光素酶报告实验分析miR-148a和hMLH1 mRNA靶向关系。结果90例sCRC组织中,检出MSI 29例(32.22%),hMLH1蛋白表达缺失24例(26.67%)。经荧光素酶报告基因分析,miR-148a mimics可抑制含有hMLH1 mRNA 3′UTR-WT序列的报告基因质粒的荧光素酶活性;而且hMLH1蛋白表达缺失组织中miR-148a相对表达量高于未缺失组织(P<0.05);此外MSI组织中hMLH1蛋白表达缺失率和miR-148a相对表达量均高于微卫星稳定性(MSS)组织。右半结肠和直肠部位、pN_(0/1)期、pM _(0)分期hMLH1蛋白表达缺失率和MSI比例高于左半结肠、pN_(2)期、pM_(0)期(P<0.05);另外肿瘤直径>5.0 cm、右半结肠和直肠、pT_( 3/4)期、pN_(2)期、pM_(1)分组织miR-148a相对表达量低于肿瘤直径≤5.0 cm、左半结肠、pT_(1/2)期、pN_(0/1)期、pM_(0)期组织(P<0.05)。结论约30%的sCRC患者存在hMLH1蛋白表达缺失和MSI状态;sCRC肿瘤组织miR-148a相对表达量降低,导致对hMLH1基因表达的抑制作用减弱,可能是影响sCRC肿瘤细胞MSI状态的重要原因之一。

非转移性23蛋白和错配修复蛋白在散发性结直肠癌组织中的表达及与临床特征的关系

目的探讨非转移性23蛋白(NM23)和错配修复蛋白(MMRP)在散发性结直肠癌(SCC)组织中的表达及与临床特征的关系。方法收集87例SCC患者的SCC组织和癌旁正常黏膜上皮组织,采用免疫组化法检测NM23、MMRP表达情况,分析其与SCC患者临床特征的关系及NM23与MMRP的相关性。结果SCC组织中NM23阳性表达率为72.4%(63/87),高于癌旁正常黏膜上皮组织的71.3%(62/87),差异有统计学意义(P﹤0.05);SCC组织中MMRP阳性表达率为73.6%(64/87),低于癌旁正常黏膜上皮组织的100%(87/87),差异有统计学意义(P﹤0.05)。不同临床分期及淋巴结转移情况SCC患者的SCC组织中NM23阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。不同肿瘤最大径及淋巴结转移情况SCC患者的SCC组织中MMRP阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。SCC组织中NM23和MMRP表达无相关性(rs=-0.020,P﹥0.05)。结论NM23和MMRP与SCC患者临床特征关系密切,联合检测对评估和预测SCC生物学行为具有重要参考意义。

hMLH1基因甲基化与微卫星不稳定在散发性结肠癌中的意义

目的探讨人类错配修复基因(hMLH1)甲基化和微卫星不稳定性(MSI)在散发性结肠癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法收集60对散发性结肠癌手术切除新鲜肿瘤组织及自身正常黏膜组织,提取DNA并PCR扩增检测hMLH1基因甲基化水平和MSI状态,分析二者间的表达、hMLH1基因启动子甲基化与临床病理特征关系,以及MSI与甲基化关系。结果 60例研究对象中,肿瘤组织hMLH1基因启动子甲基化表阳性率为30.0%(18/60),正常组织中无hMLH1基因启动子甲基化表达阳性例数,差异有统计学意义(P<0.05)。hMLH1基因启动子甲基化与患者发病年龄及肿瘤部位有关(P<0.05)。MSI阳性率为23.3%(14/60),正常组织中无MSI表达阳性例数,差异有统计学意义(P<0.05)。在18例甲基化肿瘤组织中MSI阳性率为55.6%(10/18),而在42例非甲基化肿瘤组织中MSI阳性例数为4例(9.5%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 hMLH1基因甲基化和MSI在散发性结肠组织癌与自身正常黏膜组织的阳性表达水平存在显著差异,hMLH1基因启动子甲基化与MSI有关。

散发性结直肠癌微卫星不稳定状态与错配修复蛋白表达缺失及临床病理特征的相关性

目的:探讨散发性结直肠癌微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)情况及其与错配修复(mismatch repair,MMR)蛋白MLH1、MSH2、MSH6、PMS2表达缺失的相关性,并总结MSI散发性结直肠癌的临床病理学特征。方法:多重荧光PCR法检测散发性结直肠癌肿瘤组织DNA的微卫星不稳定性,免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)S-P法检测散发性结直肠癌肿瘤组织MLH1、MSH2、MSH6、PMS2蛋白的表达缺失,分析MSI发生与MMR蛋白表达缺失及临床病理特征的相关性。结果:75例散发性结直肠癌检出MSI 21例(28%),包括MSI-H 19例、MSI-L 2例,其他54例(72%)为MSS。检出MMR蛋白表达缺失16例(21.33%),其中15例(93.75%)为MSI-H、1例(6.25%)为MSS;MMR蛋白表达59例(78.67%),其中4例(6.78%)为MSI-H、2例(3.39%)MSI-L,其他53例为MSS。MSI组MMR蛋白缺失率(15/21,71.43%)显著高于MSS组(1/54,1.9%)(P<0.01)。MSI与患者年龄,是否黏液腺癌,肿瘤有无远处转移有关(P<0.01),其中MSI-H好发于年龄>50岁、肿瘤无远处转移、MMR蛋白缺失人群,且类型以黏液腺癌为主。结论:散发性结直肠癌肿瘤组织中MSI发生率高于MMR蛋白缺失率,并且MSI-H的散发性结直肠癌转移风险较低、预后较好。检测MSI状态对提高结直肠癌的预防、诊断和治疗水平,降低结直肠癌的发病率和病死率有着重要意义。

散发性结直肠癌组织MMR蛋白表达变化及其与患者临床病理参数和预后的关系

目的观察散发性结直肠癌(SCC)组织错配修复基因(MMR)蛋白(hMLH1、hMSH2、hMSH6)表达变化,并探讨其与患者临床病理参数和预后的关系。方法选择180例SCC患者的肿瘤组织标本,采用免疫组化法检测hMLH1、hMSH2、hMSH6蛋白表达,分析MMR蛋白表达变化与患者临床病理参数和预后的关系。结果 180例SCC患者中,MMR蛋白表达缺失(至少一项蛋白表达缺失)率为16.1%(29/180),其中hMLH1蛋白表达缺失率为10.6%(19/180)、hMSH2蛋白表达缺失率为7.2%(13/180)、hMSH6蛋白表达缺失率为5.6%(10/180)。MMR蛋白表达缺失与肿瘤直径、TNM分期、组织分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05)。MMR蛋白表达缺失者与表达正常者5年无病生存率分别为75.9%(22/29)、43.7%(66/151),5年总生存率分别为82.8%(24/29)、58.3%(88/151),二者比较P均<0.05。结论 SCC组织可出现MMR蛋白表达缺失,其表达变化与肿瘤发生、发展及患者预后有关。

散发性结直肠癌组织中FHIT、MSH2蛋白的异常表达及其临床意义

背景与目的:脆性组氨酸三联体(fragilehistidinetriad,FHIT)蛋白表达缺失是胃肠道肿瘤的频发事件,但在大肠癌却有争议;最近研究表明FHIT蛋白表达失活可能是错配修复蛋白,尤其是mutS同种组织蛋白2(mutShomolog2,MSH2)改变的结果。本研究旨在探讨FHIT、MSH2蛋白在散发性结直肠癌(sporadiccolorectalcarcinoma,SCC)组织中的表达情况及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测手术切除的84例SCC及其对应癌旁正常结直肠组织和23例肠腺瘤组织标本中FHIT、MSH2蛋白的表达。结果:FHIT蛋白在SCC组织、结直肠腺瘤组织、癌旁正常结直肠组织中阳性率分别为48.81%、73.91%和100%,三者的阳性率差异有显著性(P<0.05)。FHIT蛋白表达水平与SCC患者的年龄、性别及肿瘤部位、组织学类型无关(P>0.05),而与肿瘤浸润深度、分化程度、Dukes分期和淋巴结转移有关(P<0.05),在浸润深度越深、分化程度越低、Dukes分期越晚和有淋巴结转移的癌组织中,FHIT蛋白低表达就越明显;而MSH2蛋白表达水平仅与Dukes分期有关(P<0.05)。SCC中FHIT蛋白表达与MSH2蛋白表达呈正相关(r=0.3728,P<0.01)。结论:(1)FHIT蛋白表达水平与SCC的恶性程度有关,可作为预测SCC浸润转移潜能的一项有意义的生物学指标;(2)SCC中FHIT、MSH2蛋白表达二者之间呈正相关。

散发性结直肠癌癌组织中错配修复蛋白和nm23蛋白表达与临床病理特征的关系

目的:分析散发性结直肠癌癌组织中错配修复蛋白(MMRP)和nm23蛋白表达与临床病理特征的关系以及两者相关性,旨在为治疗散发性结直肠癌患者提供参考。方法:选取2014年8月至2017年1月本院存档的680例手术切除散发性结直肠癌标本。采用免疫组化法以及组织芯片检测MMRP以及mm23蛋白的表达情况,将4种MMRP中的1种以上表达缺失定为微卫星不稳定组(MSI组),全部阳性表达设为微卫星稳定(MSS组)组。分析MMRP与mm23的表达与临床病理特征的相关性以及两种蛋白之间的相关性。结果:在本组研究中,MMRP阳性者有605例,表达缺失者有75例,缺失率为11.03%;其中MLH1缺失11例(14.67%)、PMS2缺失5例(6.67%)、MSH2缺失6例(8.00%)及MSH6表达缺失3例(4.00%),MLH1联合PMS2表达缺失19例(25.33%),MSH2联合MSH6表达缺失12例(16.00%),MLH1联合MSH2表达缺失5例(6.67%),MLH1联合MSH6表达缺失3例(4.00%),MSH2联合PMS2表达缺失3例(4.00%),MLH1联合MSH2、MSH6表达缺失2例(2.67%),MSH2联合MSH6、PMS2表达缺失3例(4.00%),4种表达均缺失3例(4.00%);nm23阴性表达278例(40.88%),阳性表达402例(59.12%);MSI表达情况在不同年龄、肿瘤部位、肿瘤直径、临床分期、淋巴结转移、组织类型等患者间存在差异(P<0.05),nm23表达情况在不同组织类型、远处转移、浸润深度、大体分型等患者间存在差异(P<0.05);经Spearman分析得出,MSI与nm23呈正相关(r=0.563,P<0.001)。结论:(1)在散发性结直肠癌患者中存在MMRP缺失,并且MLH1、PMS2缺失表达较MSH2和MSH6多见;(2)MSI及nm23与散发性结直肠临床病理特征关系密切,对散发性结直肠癌的预测以及恶性程度的评估具有参考价值,并且两者呈正相关,可能参与散发性结直肠癌的发生发展过程。

Ezrin在散发性结直肠癌中的表达及意义

背景与目的:细胞骨架和细胞浆膜的连接蛋白Ezrin(埃兹蛋白)被认为可能参与肿瘤的发生发展,是近年来肿瘤转移的研究热点,但Ezrin与结直肠癌发生发展的关系尚不明确。本研究探讨Ezrin在散发性结直肠癌中的表达情况及其临床病理意义。方法:应用EnV ision免疫组织化学的方法检测132例散发性结直肠癌及43例癌旁正常肠粘膜中Ezrin的表达情况,并对其有无转移(转移组74例,未转移组58例)进行分组比较。结果:①Ezrin在结直肠癌中的阳性率(79.5%)显著高于癌旁正常肠粘膜的阳性率(11.6%)(P<0.001);②Ezrin总阳性率在转移组(86.5%)高于未转移组(70.7%)(P=0.026),其中在膜的表达率转移组(31.1%)显著高于未转移组(6.9%)(P<0.001);③Ezrin在结直肠癌中的表达与年龄、性别、肿瘤大小、发生部位、分化程度、浸润深度等临床病理参数均无关(P>0.05)。结论:Ezrin的表达增高与结直肠癌转移密切相关,其从胞质表达到胞膜表达在肿瘤细胞转移过程中可能起着至关重要的作用,并可作为临床判断散发性结直肠癌转移及预后等生物学行为的重要参考指标。

散发性结直肠癌微卫星不稳定性及其与临床病理生物学的关系

目的:探讨分析中国人散发性结直肠癌微卫星不稳定的变异及其与临床病理生物学特征的关系．方法:应用荧光多重PCR方法检测105例散发性结直肠癌初诊患者微卫星状态,分析MSI结直肠癌潜在的相关临床病理生物学特征．结果:105结直肠癌中,MSI检出率24．7％,其中MSI-H 14例(13．3％),MSI-L 12例(11．4％);队列中各位点突变率分别是D5S346(5．7％), BAT26(8．6％),BAT25(10．5％),D17S250(8．6％), D2S123(10．5％);MSI结直肠癌的组织分化程度与淋巴结转移情况与MSS结直肠癌有显著的统计学差异(P=0．047,P=0．029),但在患者年龄、肿瘤位置、病理性质无显著临床意义(P>0．05)．结论:MSI结直肠癌具有低分化癌多见,淋巴结转移少等特点,淋巴结转移少可能是MSI结直肠癌具有生存优势的原因之一．

散发性结直肠癌中MMR与突变p53的表达

目的 探讨错配修复基因MMR(hMSH2与hMLH1基因 )在散发性结直肠癌发生中的作用。方法 采用PCR SSCP和PCR产物直接测序法对 41例散发性结直肠癌患者肿瘤组织及正常组织的hMSH2、hMLH1与p53基因进行检测。结果 41例散发性结直肠癌中,有 2例发生hMSH2基因突变,占 4. 88% (2 /41), 5例发生hMLH1基因突变,占 12. 20% (5 /41), 20例发生p53基因突变,占 48. 78% (20 /41)。hMLH1和hMSH2基因在p53突变患者的突变率 30. 00% (6 /20)显著高于p53未发生突变患者的突变率 4. 76(1 /21) (P<0. 05)。结论 部分散发性结直肠癌患者中存在MMR基因缺陷,其中hMLH1基因的作用大于hMSH2。MMR基因突变与p53突变密切相关。

β-Catenin蛋白在散发性结直肠癌中的异常表达和基因突变

目的:观察β-Catenin蛋白在散发性结直肠癌(SCRC)中胞质胞核异常表达特征和基因突变发生率,并探讨其与临床病理的相关性.方法:用免疫组织化学EnVision二步法检测90例SCRC与22例散发性结直肠腺瘤标本的β-Catenin蛋白在胞质胞核中的异常表达.以PCR扩增和直接测序检测上述标本中β-Catenin基因突变.结果:正常结直肠黏膜中β-Catenin蛋白表达定位于细胞膜上,未见胞质胞核中的异常表达.SCRC中β-Catenin蛋白在胞质与胞核的异常表达率显著高于散发性腺瘤中的异常表达率(88.9%vs59.1%,41.1%vs18.2%,P<0.05).SCRC的β-Catenin异常胞质表达率与肿瘤生长方式,分化程度相关(P<0.05);胞核异常表达率在溃疡型生长高于在隆起型生长(50.0%vs26.5%,P<0.05).胞核异常表达往往出现在肿瘤的浸润前沿.90例SCRC中仅发现1例β-Catenin基因突变;22例散发性结直肠腺瘤中未检测出突变.结论:β-Catenin蛋白胞质胞核异常表达可能在SCRC的发生发展中起重要作用.在SCRC中β-Catenin基因突变可能不是β-Catenin蛋白异常表达的主要原因.

错配修复、微卫星不稳定性与散发性结直肠癌

目的 探讨DNA错配修复基因、微卫星不稳定性与散发性结直肠癌发生发展的关系。方法 采用放射性同位素为基础的聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,对 4 8例散发性结直肠癌中错配修复基因和四个位点微卫星不稳定性进行了检测。结果 4 8例散发性结直肠癌中hmsh3、hmsh6基因突变率分别为 10 4 %和 2 5 % ,四个位点微卫星不稳定性阳性率分别为D2S12 3(12 5 % )、BAT 2 6 (18 8% )、D17S2 6 1(10 4 % )、D17S799(8 3% ) ,hmsh3、hmsh6基因突变和微卫星不稳定性多为分化不良的癌 ,多位于右半结肠 ,而与患者的性别、淋巴结转移、Ducks分期无关。结论 错配修复基因突变与微卫星不稳定性是散发性结直肠癌发生的早期分子事件 。

天津地区人群hMLH1和hMSH2基因多态性与散发性结直肠癌易感性的关系

为探讨错配修复基因hMLH1和hMSH2单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)与散发性结直肠癌(Sporadic colorectal caner,SCRC)发病易感性之间的关系,文章采用聚合酶链式反应-变性高效液相色谱方法和序列分析技术,检测了天津地区600例SCRC患者和600例健康对照个体hMLH1394G/C、hMSH2943-1G/A、hMSH21917T/G和hMSH22783C/A的基因型频率分布。结果显示:SCRC患者组hMSH22783C/A3种基因型C/C、C/A、A/A频率(90%、9%、1%)与对照组(95%、4.8%、0.2%)相比差异具有统计学意义(χ2=11.91,P<0.01)。与hMSH22783C/C基因型相比,C/A和A/A基因型能增加SCRC发病风险(OR值分别为1.77和11.94,95%CI分别为1.03～3.03和1.38～103.2)。多态性位点联合分析显示,SCRC组与对照组单倍型分布差异有统计学意义(χ2=38.38,P<0.01);与394G/943-1G/2783C单倍型相比,394G/943-1G/2783A单倍型显著增加SCRC的发病风险(OR=2.18,95%CI:1.40～3.40)。结果提示hMSH22783C/A多态性可能成为预测SCRC发病风险的独立因素,394G/943-1G/2783A单倍型可能增加SCRC的发病风险。

83例散发性结直肠癌D22S274位点杂合缺失分析

目的 抑癌基因的杂合缺失 (LOH)被认为是结直肠癌形成的关键步骤之一 ,当一条等位基因已经异常的抑癌基因发生杂合缺失可导致肿瘤的形成。本实验通过对 83例散发性结直肠癌D2 2S2 74位点杂合缺失情况作一研究 ,并探讨其意义。方法 微卫星DNA标记D2 2S2 74与 83例结直肠癌病例的肿瘤和正常组织进行PCR反应。 83例散发性结直肠癌 ,男 4 0例 ,女4 3例 ,年龄 31至 84岁 ,中位年龄 6 6岁。PCR产物在ABIPrism 377自动荧光测序仪进行电泳 3小时 ,以GeneScan3.1和Genotyper 2 .1软件进行遗传位点扫描以及杂合缺失分析。LOH与临床病理参数之间的关系比较采用 χ2 检验 ,P <0 .0 5被视为有统计学意义。结果 D2 2S2 74 (2 2 q13.32 13.33)位点的杂合缺失率 34.0 4 %。直肠癌的杂合缺失率为 5 0 % (9/ 18) ,高于近端结肠癌的 12 % (2 / 17) (P =0 .0 18) ,远端结肠癌的杂合缺失率为 4 2 % (5 / 12 )较近端结肠的杂合缺失率高 ,但无统计学差异 ,然而将远端结肠、直肠一起考虑 ,它们的杂合缺失率 (14 / 30 ,4 7% )高于近端结肠 (2 / 15 ,13% ) (P =0 .0 15 ) ,提示远端结肠、直肠癌与近端结肠癌发生机制可能有所不同。结论 2 2 q13.32 13.33区域可能存在与结直肠癌发生相关的抑癌基因。

散发性结直肠癌微卫星不稳定性与Mt-p53及bcl-2蛋白表达的研究

目的 探讨散发性结直肠癌微卫星不稳定性民Mt-p53及bcl-2蛋白表达的关系。方法 应用聚合酶链式反应（PCR）技术检测了48例散发性结白肠癌中四个位点的微卫星不稳定性,同时应用免疫组织化学技术对癌基因bcl-2、抑癌基因Mt-p53蛋白的表达。结果 ①48例散发性结直肠癌中四个微卫星位点D2S123、BAT-26、D17S261、D16S799的微卫垦不稳定性检出率分别为12.5％、18.8％、10.4％、8.3％;②Mt-p53蛋白和bcl-2蛋白阳性个分别为66.7％和77.1％;③微卫星不稳定性与mt-p53和bcl-2蛋白的表达均相差个显著（P>0.05）。结论 微卫星不稳定性引起散发性结直肠癌的RER途径是不同于由抑癌基因p53失活及癌基因bcl-2的激活引起的LOH途径的新致癌机制。

散发性结直肠癌中hMSH2与PTEN的表达及临床意义

目的:研究错配修复蛋白hMSH2与PTEN在散发性结直肠癌的表达变化及两者之间的关系,以进一步探讨其临床意义.方法:采用SP免疫组织化学两步法对42例散发性结直肠癌、相应近端癌旁组织(距癌组织3cm)和远端癌旁组织(距癌组织>10cm)及15例正常结直肠组织进行hMSH2与PTEN蛋白表达检测.同时Western blot法检测42例散发性结直肠癌、相应远端对照组织hMSH2与PTEN蛋白表达.分析散发性结直肠癌发病机制及hMSH2与PTEN蛋白表达与临床病理之间的关系.结果:结直肠癌组织中,hMSH2与PTEN蛋白失表达率(阴性率)均低于正常结直肠组织及近端癌旁组织、远端癌旁组织(χ2hM S H2=7.967,χ2PTEN=11.67,均P<0.05).PTEN蛋白表达与肿瘤分化程度呈正相关(rs=0.727,P<0.05),与Dukes分期、侵润深度、淋巴结转移、肝转移均呈负相关(rs=-0.727,-0.718,-0.718,-0.535,均P<0.05).hMSH2蛋白表达与上述临床病理特征未见明显相关.h M S H2与P T E N蛋白表达在散发性结直肠癌中呈正相关(rs=0.679,P<0.05).与远端对照组织相比42例胃癌组织中hMSH2蛋白低表达率为59.52%(25/42),PTEN低表达率为45.24%(19/42).结论:PTEN表达与其临床病理特征相关;在散发性结直肠癌发生、发展过程中错配修复蛋白hMSH2表达缺失伴有PTEN蛋白表达下调.

散发性结直肠癌中hMLH1基因启动子区CpG岛MVPs图谱的绘制与分析

目的 绘制散发性结直肠癌患者hMLH1基因启动子区CpG岛甲基化可变位点（methylation variable posi—tions，MVPs）图谱，分析MVPs图谱与hMLH1蛋白表达的关系，寻找CpG岛中影响蛋白表达的关键CpG位点。方法采用重亚硫酸盐测序方法检测患者hMLH1基因启动子区CpG岛甲基化状态；采用免疫组化方法检测相应蛋白表达水平。结果 CpG岛1（CGI—Ⅰ）甲基化阳性率为20％（6／30）；CpG岛2（CGI—Ⅱ）甲基化阳性率为13．33％（4／30）。hMLH1蛋白表达阳性率为50％（15／30）。经X^2检验，CGI—Ⅰ甲基化与hMLH1蛋白表达缺失存在显著性差异（P〈0．05）、CGI-Ⅱ甲基化与hMLH1蛋白表达缺失无差异（P〉0．05）。结论 CGI—Ⅰ甲基化可能导致hMLH1蛋白不表达，其中1～28CpG位点为导致hMLH1蛋白表达缺失的关键区域。