整体柱高效液相色谱法测定草甘膦原药中甲醛含量

建立了衍生化-高效液相色谱法对草甘膦原药中痕量甲醛含量进行测定的方法.样品中残留甲醛经超声波水浴提取, 与2,4-二硝基苯肼衍生反应, 生成的2,4-二硝基苯腙用反相整体柱色谱进行快速分离,在360 nm紫外波长下检测, 外标法定量.该分析方法在2.0 ～ 200 mg/L浓度范围呈良好线性, 添加回收率在88%～105%之间, 相对标准偏差小于5%.样品中甲醛的最小检测浓度为0.5 mg/kg. 比较了整体色谱柱和常规C18反相柱分离效果, 表明整体色谱柱可在1.5 min内实现衍生化产物的快速分离并进行定性定量, 同时发现相对于常规柱,采用整体柱提高了检测灵敏度约10倍.

整体柱高效液相色谱法测定尿中核苷的方法研究

尿中修饰核苷已被研究用作可能的肿瘤标记物,目前最常用的分析方法为反相高效液相色谱法,其不足之处是分析周期太长。为此,建立了应用整体柱的高效液相色谱方法对尿中修饰核苷进行分析,所用缓冲液为25mmol/L磷酸二氢钾溶液(pH4 55)和60%(体积分数)的甲醇水溶液,线性梯度洗脱,检测波长为260nm。12种目标核苷可被完全分离。所建立的方法在分离度、线性、重现性、灵敏度及回收率等指标上与普通反相液相色谱法相近,但分析周期大大缩短,仅为23min,适合于大量临床样品的分析。

整体柱高效液相色谱法测定草甘膦原药中甲醛含量

痕量甲醛的检测方法主要有分光光度法（其中主要包括变色酸比色法、乙酰丙酮化学滴淀法、乙酸铅试纸法、盐酸副玫瑰苯胺比色法）、色谱法（主要包括2，4-二硝基苯肼衍生法和巯基乙胺法）和示波极谱法等。国家标准方法（GB12686—2002）中草甘膦原药中甲醛的测定采用的是乙酰丙酮显色法，

柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量及营养价值评价

建立柱前衍生-高效液相色谱法测定巴戟天中氨基酸含量,采用氨基酸比值系数法评价其营养价值。采用盐酸水解法制得巴戟天氨基酸供试品溶液,以异硫氰酸苯酯和三乙胺为柱前衍生化试剂,采用高效液相色谱法,使用Ultimate Amino Acid色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)以0.1 mol/L无水乙酸钠-乙腈为流动相,梯度洗脱,柱温40℃,检测波长为254 nm,测定氨基酸含量;通过氨基酸比值、氨基酸比值系数、氨基酸比值系数分等评价其营养价值,并采用系统聚类和主成分分析对其进行分类分析。结果表明,15种氨基酸线性关系良好,相关系数r≥0.9996。16份巴戟天氨基酸总含量为17.87~102.15 mg/g,均检测到15种氨基酸,其中包含6种必需氨基酸,占总氨基酸含量的14.15%~32.06%;8种药用氨基酸,占总氨基酸含量的45.20%~56.31%。限制氨基酸为苏氨酸和亮氨酸,氨基酸比值系数分为33.87~61.31。不同巴戟天样品氨基酸组成相关性显著;主成分分析提取2个主成分,累计方差贡献率为97.085%,可将16批巴戟天分为三类。该实验测定方法简单有效,可同时分离测定15种氨基酸,精密度与重复性良好,有较高的药用价值,可为巴戟天的品质分析和资源开发利用提供参考。

柱前衍生-高效液相色谱法测定化妆品中16种氨基酸的含量

提出了2,4-二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生-高效液相色谱法测定化妆品中甘氨酸、亮氨酸、组氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、苏氨酸、谷氨酸、赖氨酸、酪氨酸、精氨酸、异亮氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸等16种氨基酸含量的方法。取化妆品样品5 g置于50 mL离心管中,加入5 mL水,超声10 min,加热煮沸15 min,冷却后加入15 mL 35 g·L^(−1)磺基水杨酸溶液,以转速10500 r·min^(−1)离心20 min。取全部上清液,用35 g·L^(−1)磺基水杨酸溶液定容至25 mL。取1 mL样品溶液,加入0.5 mol·L^(−1)碳酸氢钠溶液(pH 9.0)1 mL和1%(体积分数)DNFB衍生溶液1 mL,混匀,于60℃加热10 min,冷却后用0.01 mol·L^(−1)磷酸二氢钾溶液(pH 7.0)定容至5 mL,所得溶液中16种氨基酸经X Bridge C_(18)色谱柱分离,以不同体积比的含1%(体积分数)N,N-二甲基甲酰胺的0.05 mol·L^(−1)乙酸钠缓冲液(pH 6.5)-体积比1∶1的乙腈-水混合溶液为流动相进行梯度洗脱,在360 nm处检测。结果表明:16种氨基酸标准曲线的线性范围均为0.004~40.0 mg·L^(−1),检出限(3S/N)为0.1~0.2 mg·kg^(−1);对空白样品进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为89.0%~105%,测定值的相对标准偏差(n=7)均不大于10%。方法用于11种市售化妆品分析,检出的氨基酸成分多为组氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸、谷氨酸。

整体柱固相萃取-高效液相色谱法在线分析水果中的氯吡脲

建立了整体柱固相萃取-高效液相色谱/紫外检测在线联用方法并用于水果中氯吡脲的分析测定。考察了萃取溶剂的 pH 值及其流速、溶剂解吸时间及其流速等因素对氯吡脲萃取率的影响。在优化的条件下，该方法对氯吡脲的富集倍数为214倍，方法的线性范围为0.01-50.00μg / L，检出限为25 ng / L，相对标准偏差（ RSD）为3.9％。黑葡萄、猕猴桃和西瓜等水果中氯吡脲的加标回收率为87.0％-120.7％，RSD 为0.6％-9.2％。结果表明该方法快速、灵敏，能满足水果中痕量氯吡脲残留分析的要求。

聚合物整体柱微萃取-高效液相色谱法检测鸡蛋中的磺胺嘧啶和磺胺二甲嘧啶残留

建立了鸡蛋中磺胺嘧啶和磺胺二甲嘧啶残留量的聚合物整体柱微萃取和高效液相色谱检测方法。以聚（甲基丙烯酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯）毛细管整体柱作为萃取装置。为了得到较高的萃取效率，优化了影响萃取效率的参数（萃取流速、萃取体积、样品基质pH值）。样品经过匀浆、乙醇提取、磷酸盐缓冲溶液稀释、离心等步骤后直接进行萃取。鸡蛋中磺胺嘧啶和磺胺二甲嘧啶的检出限分别为11．2ng／g和8．8ng／g，在50～5000ng／g的浓度范围内具有良好的线性关系。加标回收率大于55％，日内、日间测定的相对标准偏差不高于8．2％。结果表明，方法简单、快速、灵敏度高，适用于鸡蛋中磺胺嘧啶和磺胺二甲嘧啶的常规分析。

柱前衍生-高效液相色谱法测定冰乙酸中微量乙酸酐

建立柱前衍生-高效液相色谱(HPLC)联合紫外检测分析方法测定冰乙酸中微量乙酸酐的含量。样品采用吗啡啉为柱前衍生剂,色谱柱为Atlantis T3(250 mm×4.6 mm, 5μm),以磷酸水溶液(pH 3.0)-甲醇(体积比为95∶5)为流动相,流量为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为210 nm。乙酸酐的质量浓度在2.60~25.97μg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数为0.999 9,检出限为0.8μg/mL,定量限为3μg/mL。平均样品加标回收率为92.8%~99.2%,测定结果的相对标准偏差为0.9%~2.3%(n=6)。该方法可用于冰乙酸中微量乙酸酐的含量测定。

半制备整体柱液相色谱法测定食品中泛酸的含量

目的:建立半制备整体柱液相色谱法测定食品中泛酸含量的分析方法。方法:样品中泛酸用热水提取,以磷酸二氢钾溶液和乙腈为流动相,流速2 mL·min^(-1),进样量500μL,柱温30℃,检测波长200 nm,经Merck半制备整体柱净化,在泛酸出峰处收集溶液,收集液经反相C18柱定量分析。结果:泛酸浓度在0.001~0.032μg·L^(-1)具有良好的线性关系,相关系数为0.9999,方法检出限为0.025 mg/100 g,定量限为0.08 mg/100 g,泛酸在食品中测定结果的相对标准偏差为2.4%~3.6%,加标回收率均大于90%。结论:针对含有蛋白、肽、淀粉等复杂基质的食品,本半制备整体柱液相色谱法的检测一致性较好,分离度、精密度、准确性等均符合要求。有效解决复杂基质、杂质干扰下目标峰难分离、检测结果不稳定、平行差的问题。

分子印迹整体柱富集-高效液相色谱法测定植物中的痕量细胞分裂素

采用分子印迹整体柱富集-高效液相色谱法选择性分离分析了植物样品中痕量细胞分裂素的含量。结果表明,以激动素为模板分子,甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)为交联剂,甲苯与十二醇为致孔剂,可在不锈钢柱管中原位聚合制备激动素分子印迹整体柱;与非分子印迹整体柱对比,该分子印迹整体柱能选择性富集4种细胞分裂素,具有较好的重复性和高的萃取效率;在优化的实验条件下,激动素(K)、激动素核苷(KR)、反式-玉米素(tZ)和meta-topolin(mT)的平均加标回收率分别为91.9%、80.0%、87.5%和50.2%,相对标准偏差均小于11.8%。本方法已成功地用于不同植物样品中4种细胞分裂素的分离和分析。

整体柱在线固相微萃取-高效液相色谱法分析爽肤水中痕量雌激素

以甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂、甲醇及正己烷(14∶5,v/v)为二元致孔剂,通过原位聚合反应制备了聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(Poly(GMA-co-EDMA))毛细管整体柱。研究表明,制备的Poly(GMA-co-EDMA)整体柱具有良好的通透性和较低的柱压(1.5×106Pa,冲洗流速0.5 mL/min)。该整体柱对雌二醇、炔雌醇、雌酮和己烯雌酚的富集倍数分别为86、116、77和86。构建了整体柱在线微萃取接口装置,建立了整体柱在线固相微萃取-高效液相色谱(HPLC)测定爽肤水中痕量雌二醇、炔雌醇、雌酮和己烯雌酚的分析方法。该分析方法的检出限(S/N=3)为0.05~0.20μg/L。将方法应用于爽肤水中雌激素的检测,加标回收率为69.3%~111.3%,RSD<5.0%。所建立的方法简单、快速、灵敏、准确,可满足爽肤水中痕量雌激素的分析。

聚合物整体柱固相微萃取-高效液相色谱法测定中成药和保健食品中枸橼酸西地那非

采用聚(甲基丙烯酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯)聚合物整体柱固相微萃取(PMME),并与高效液相色谱联用,建立了中成药中枸橼酸西地那非的检测方法。实验优化了影响萃取效率的因素,包括萃取流速、萃取体积、样品基质pH值等参数。中成药样品经溶解和过滤后可直接进行分离分析。结果表明,枸橼酸西地那非在0.5～50μg/mL的浓度范围内具有良好的线性关系,检出限为0.05μg/mL,日内、日间测定的相对标准偏差不高于9.7%。方法已成功地应用到实际样品检测中,其加标回收率大于83.40%。该方法简单、快速、灵敏度高,适用于中成药及保健品中西地那非的分析检测。

聚合物整体柱微萃取/超高效液相色谱法测定蜂蜜中的4种磺胺类药物

以4-乙烯基苯甲酸(VBA)和4-乙烯基苯硼酸(VPBA)为混合功能单体,与二乙烯基苯(DVB)共聚制备了poly(VBA-DVB-VPBA)整体柱,用于蜂蜜中磺胺类药物的提取。该柱的官能团丰富、均匀多孔、通透性和稳定性良好,可与磺胺类药物产生多种作用形式。通过对萃取条件(包括溶液pH值、上样体积、离子强度和洗脱体积)的优化,建立了聚合物整体柱微萃取与超高效液相色谱联用(PMME/UPLC)的分析方法,对实际样品中磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺吡啶和磺胺噻唑进行了萃取分离。在最佳实验条件下,4种目标物在相应质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(r^(2))均大于0.99;该整体柱的富集因子为10.97~12.82,萃取率为73.1%~85.5%;所建分析方法的检出限为8.32~16.2 ng/mL,定量下限为27.5~53.9 ng/mL;实际样品的加标回收率为89.8%~105%,相对标准偏差(RSD)为2.0%~7.2%。该方法试剂用量少、耗时短且操作简便,能够满足食品中低浓度抗生素的实际监测需要。

AQC柱前衍生高效液相色谱方法测定康复新液中游离氨基酸和总肽的含量

目的应用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生化技术,建立康复新液中游离氨基酸和总肽的高效液相色谱(HPLC)含量测定方法,并以总肽含量为指标对市售样品进行检测。方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Kromasil 100-5 C18色谱柱);60%乙腈(A)-0.14 mol·L^(-1)三水合乙酸钠溶液,用磷酸调节pH值至5.0(B)为流动相,梯度洗脱;柱温:39℃;流速:1.0 mL·min^(-1),检测波长:248 nm。结果14种氨基酸均能达到良好的分离效果;门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸分别在2.0~99.7、3.4~168.5、2.8~139.6、4.0~201.4、4.8~238.1、6.7~336.9、3.3~167.5、9.7~487.3、4.1~202.5、4.4~221.6、5.4~270.5、3.3~166.8、4.8~240.8、4.7~236.6μg·mL^(-1)范围内呈现良好的线性关系(r=0.9995~1.0000);游离氨基酸的平均加样回收率(n=6)为86.8%~108.1%,RSD为2.8%~4.4%,总肽酸水解氨基酸的平均加样回收率(n=6)为83.2%~102.7%,RSD为0.1%~3.1%;仪器精密度、重复性、稳定性实验的RSD均小于5.0%。结论该方法与现行质量标准的紫外分光光度法比较,二者测定的总氨基酸含量结果基本一致,但前者的专属性、重现性更优;以具有生物活性的总肽为质控指标,针对性更强,可为康复新液的质量评价提供更科学、合理的方法。

基于整体柱的固相萃取-高效液相色谱法测定尿液中4种羟基多环芳烃

建立了基于聚合物整体柱的固相萃取-高效液相色谱测定尿液中4种羟基多环芳烃(OH-PAHs)的分析方法。在注射器管中合成聚(甲基丙烯酸丁酯-乙二醇二甲基丙烯酸酯)整体柱(poly(BMA-co-EDMA)),并将其用于尿液中4种羟基多环芳烃的前处理,同时考察了上样浓度、淋洗液、洗脱液和洗脱体积对萃取效率的影响。结合高效液相色谱-荧光分析,4种羟基多环芳烃在各自的范围内线性关系良好(r≥0.999 1);方法的检出限和定量限分别为0.06~0.09 ng/mL和0.20~0.30 ng/mL;日内(n=5)和日间(n=3)精密度分别为1.4%~5.3%和2.6%~7.3%。对焦炉工人尿液样品进行加标(3 ng/mL)回收试验,回收率为78.2%~117.0%。该固相萃取柱能够有效萃取和净化尿液中4种羟基多环芳烃,并且可以重复使用。该法简单、准确,可应用于尿液中羟基多环芳烃的分析。

聚乙二醇二甲基丙烯酸酯整体柱固相萃取-高效液相色谱法测定血清中卡马西平和10-羟基卡马西平

使用乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)在注射器中构筑固相萃取整体柱,并结合高效液相色谱法,建立了测定血清中卡马西平(CBZ)和10-羟基卡马西平(MHD)的分析方法。实验考察了反应温度和反应时间对整体柱萃取性能的影响和淋洗溶液种类、洗脱溶液种类及体积对固相萃取的影响。在优化条件下,该固相萃取柱对血清中CBZ和MHD能够有效富集、净化。对0. 02～40μg/mL CBZ和0. 05～100μg/mL MHD标准溶液进行分析,结果表明,在各自的范围内CBZ和MHD线性关系良好,相关系数(r)均为0. 999。CBZ和MHD的检出限分别为0. 004μg/mL和0. 01μg/mL;在3个加标水平下,CBZ和MHD的平均回收率分别为92. 7%和94. 2%,日内(n=3)和日间(n=3) RSD≤6. 1%。该固相萃取柱批内(n=3)和批间(n=5) RSD≤5. 3%,反复使用8次的RSD≤5. 8%。该法简单、高效,适用于癫痫患者血清中CBZ和MHD的测定。

聚合物整体柱在线固相萃取/高效液相色谱法测定水果中敌灭灵与伏虫灵

构筑了以甲基丙烯酸异辛酯(EHMA)为单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂的聚合物整体柱(10 mm×4.6 mm,i.d.)作为在线固相萃取吸附剂,结合高效液相色谱紫外检测器,建立了水果中苯甲酰类农药敌灭灵和伏虫灵的分析方法。构筑的聚合物整体柱结构多孔,比表面积为164.01 m^2·g^(-1),将其作为在线固相萃取净化柱,样品在0.1 m L·min^(-1)流速下经5 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液上样,1.0 m L·min^(-1)条件下以乙腈-水(65∶35,体积比)洗脱后,进入C_(18)柱分析。该方法在0.1~50.0 mg·L^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.998),对敌灭灵和伏虫灵的检出限分别为0.007 2、0.009 mg·kg^(-1),定量下限分别为0.024、0.030mg·kg^(-1)。在0.03、0.3、1.5 mg·kg^(-1)3个加标水平下的回收率为89.5%~102%,日内和日间相对标准偏差不大于6.8%。

移液枪头式整体柱直接固相微萃取-高效液相色谱法测定尿液中苯二氮卓类药物

本文采用甲基丙烯酸2-羟乙酯(HEMA)与乙二醇二甲基丙烯酸酯在移液器枪头中共聚制备固相微萃取整体柱,用于直接处理尿液中3种苯二氮卓类药物(BZDs)。实验考察了单体用量、聚合时间及固相微萃取条件对BZDs萃取效率的影响,评价了其吸附性能。当HEMA用量为40 mg,聚合温度60℃时,固相微萃取整体柱对目标物吸附效率达98.9%~100%,且对尿液中杂质的吸附率低于10%。取3 mL尿液样品,无需处理,直接上样至该柱,经4 mL纯净水冲洗,1 mL乙腈洗脱,得到的样品结合高效液相色谱仪分析。方法对3种BZDs在2.5~1000 ng/mL浓度范围呈现良好线性关系(r=0.999),检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)为0.8~1.5 ng/mL和2.5~5.0 ng/mL,回收率为86.2%~107%。本方法构筑的萃取柱制备简单,能实现对原始尿液的直接、高效萃取,操作便捷。

聚[2-(丙烯酰氧基)乙基]三甲基氯化铵-乙二醇二甲基丙烯酸酯整体柱固相萃取结合高效液相色谱法测定尿液中3种苯二氮■类药物

以[2-(丙烯酰氧基)乙基]三甲基氯化铵(DAC)为单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂在注射器中制备聚合物整体柱,用其固相萃取尿液中溴西泮(BRZ)、劳拉西泮(LRZ)和地西泮(DZP)3种苯二氮[艹卓]类药物(BZDs),并采用高效液相色谱法(HPLC)分析。实验考察了整体柱聚合时间及固相萃取条件(淋洗溶液、洗脱溶剂种类和体积)对BZDs萃取效率的影响。结果表明,仅聚合4 h得到的整体柱对BZDs吸附效率为100%。取尿液样品4 mL上样,用4 mL H2O冲洗,1 mL乙酸乙酯洗脱,采用高效液相色谱分析。在最优条件下,3种BZDs在4.0~1 000 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.999),检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为1.0~1.2 ng/mL和3.3~4.0 ng/mL;在10、25和50 ng/mL加标水平下回收率为81.4%~102%,日内(n=3)和日间(n=3)相对标准偏差分别为1.2%~4.5%和2.5%~8.3%。该整体柱可对尿液中3种BZDs有效净化,且富集达12~15倍。方法构筑的聚合物整体柱制备简单,萃取高效,可成功用于尿液中3种BZDs的分析。

柱前衍生化高效液相色谱法分析当归多糖的单糖组成

采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化反相高效液相色谱(HPLC)法,建立了9种常见单糖的分离模式,并成功地用于当归多糖的单糖组成分析,具有良好的重复性。结果表明,当归多糖由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖7种单糖组成,其摩尔比为0.57∶1.00∶0.13∶3·06∶8.16∶7.17∶12.69。该HPLC方法是简单、快速、灵敏、方便的分析技术,可用于当归多糖的质量控制。