农杆菌介导的大豆植株整体转化

农杆菌介导的植物整体转化法主要以植物的分生组织和生殖器官作为外源基因导入的受体,通过真空渗透法、浸蘸法及注射法等方法使农杆菌与受体材料接触,以完成可遗传细胞的转化,通过抗生素筛选和分子检测鉴定转基因植株后代。以大豆幼苗的顶端生长点和叶腋生长点为靶点,通过农杆菌介导的整体转化法———注射法进行转录因子DREB1C基因的遗传转化,最终获得6株T0代PCR阳性转基因植株,转化率为9.2%。T1代植株的PCR、Southern blot和RT-PCR鉴定结果表明获得1株阳性植株,DREB1C基因以单拷贝形式整合于大豆基因组中,在200mmol.L-1NaCl胁迫条件下在转录水平得到成功表达。该方法克服了大豆组织培养再生难、转化率低的缺点,是一种高频、简单、快捷的非组培遗传转化途径。