人类免疫缺陷病毒相关肺动脉高压患者的肺动脉管径特征及联合肿瘤坏死因子-α的诊断价值

目的观察人类免疫缺陷病毒(HIV)感染相关性肺动脉高压(PAH)患者肺动脉管径特征,研究肺动脉管径相关指标联合肿瘤坏死因子-α(TNF-α),筛查诊断HIV相关肺动脉高压的临床价值,为临床提供参考。方法选取65例HIV感染患者为研究对象进行回顾性分析,根据超声心动图检查是否合并肺动脉高压分为观察组(23例,存在PAH)和对照组(42例,无PAH)。测量两组患者肺动脉内径(PA)、肺动脉直径(dPA)及主动脉直径,并计算dPA与主动脉直径比值(rPA),记录血清TNF-α水平,分析各指标在早期筛查诊断HIV相关肺动脉高压的临床价值。结果观察组患者PA、dPA、dPA与主动脉直径比值(rPA)以及TNF-α水平显著高于对照组。Pearson线性相关分析显示,TNF-α与dPA及rPA呈显著正相关。二列相关分析显示,HIV-PAH与PA、dPA、rPA及TNF-α显著相关(P<0.05)。血清TNF-α与dPA及rPA联合检测诊断HIV-PAH的曲线下面积(AUC)为0.891,敏感度为0.870,特异度为0.881。结论肺动脉管径组合指标联合TNF-α能更好地提示HIV-PAH的存在,可以对高风险患者进行早期筛查,对高危人群进行随访或干预,这对改善患者预后具有重要意义。

超声心动图联合内皮素-1在人类免疫缺陷病毒感染相关性肺动脉高压早期诊断中的价值研究

目的研究超声心动图联合内皮素-1(ET-1)早期诊断人类免疫缺陷病毒(HIV)感染相关性肺动脉高压(PAH)的临床价值,为临床提供参考。方法选取2018年12月至2021年12月攀枝花学院附属医院收治的60例HIV感染患者为研究对象进行回顾性分析,根据是否存在早期PAH分为观察组(24例,存在PAH)和对照组(36例,无PAH)。记录两组患者超声心动图参数和血清ET-1水平,分析各参数在早期诊断HIV相关性PAH中的价值。结果观察组患者左室舒张末期内径(LVEDD)、心肌做功指数(Tei指数)、右室基底部横径(RVd)、LVEDD/RVd、平均肺动脉压(mPAP)及血清ET-1水平均显著高于对照组,右室面积变化率(FAC)及肺毛细血管楔压(PCWP)显著低于对照组。Pearson线性分析显示,肺毛细血管楔压(PCWP)与Tei指数、LVEDD/RVd及ET-1呈显著负相关,与FAC呈显著正相关(P<0.05)。mPAP与Tei指数、LVEDD/RVd及ET-1呈显著正相关,与FAC呈显著负相关(P<0.05)。血清ET-1与LVEDD/RVd联合检测诊断HIV相关性PAH的曲线下面积(AUC)为0.907(SE=0.054,P=0.002,95%CI=0.769~1.000),敏感度为0.944,特异度为0.750。结论超声心动图LVEDD/RVd联合血清ET-1有助于HIV相关性PAH的诊断,具有较高临床应用价值。

人类免疫缺陷病毒(HIV-1)整合酶抑制剂筛选及其活性测定

整合酶作用的病毒DNA整合进宿主DNA的过程是反转录病毒在宿主细胞中增殖的关键步骤.由于在正常人类细胞中不存在相似的功能蛋白,其抑制剂对人体的副作用可能很小,相对于经典AIDS治疗药物的毒副作用,整合酶抑制剂理论上要具有优势.在线性七肽库中筛选与整合酶有特异结合作用的噬菌体展示肽,选取TPSHSSR和HPERATL 2条肽,它们可以竞争性地抑制展示相应肽段的噬菌体与整合酶的结合,同时它们对整合酶的整合活性也有一定程度的抑制,半数抑制率分别为IC50=(54.56±5.18)μmol/L,IC50=(28.29±1.32)μmol/L.这些多肽可用于治疗艾滋病新药的开发应用及整合酶结构及作用机制的研究.

HIV-1整合酶基因序列分析方法验证

目的 验证实验室自建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)整合酶基因序列分析方法。该方法可用于评估HIV-1整合酶区段基因型耐药水平。方法 根据世界卫生组织自建基因序列分析方法验证的建议,从20份HIV-1阳性样本中提取RNA,扩增HIV-1整合酶区基因片段,并测序。通过与病毒质量保证(VQA)共识进行比对,评估实验室自建的HIV-1整合酶基因序列分析方案的准确性,通过扩增成功率评估其灵敏度,通过同一样本的重复检测结果评估其精密度和重现性。结果 20份样本与VQA共识的核苷酸一致率均>98%;10个高病毒载量(>10 000拷贝·mL^(-1))样本和5个低病毒载量(1 000~5 000拷贝·mL^(-1))样本的扩增成功率均为100%;4个样本的同批次5复孔和5个样本5次检测的结果均符合90%的样本配对比较核苷酸一致率>98%的要求。结论 该HIV-1整合酶基因序列分析方法的准确性、灵敏度、精密度和重现性均符合要求,适用于HIV-1整合酶基因序列分析。

人类免疫缺陷病毒-1进入细胞的分子机制及相关药物的研究

艾滋病 (AIDS)是由人类免疫缺陷病毒 (HIV)侵染表达CD4表面抗原 (CD4+ )的T淋巴细胞而引起的 .艾滋病病毒进入CD4+ T淋巴细胞首先是通过病毒与细胞膜的融合来完成的 .该融合过程涉及到病毒表面膜蛋白(gp12 0和gp41)与细胞表面受体蛋白 (CD4和CCR5等 )之间的相互作用 .根据对这些蛋白质分子结构及作用机制的认识 ,从破坏病毒与细胞的融合入手 ,设计新型的抗艾滋药物及疫苗 ,已成为目前药物开发的新热点 .

人类免疫缺陷病毒1型病毒复制负调控因子编码基因的克隆及在BCBL-1细胞和NIH/3T3细胞中的表达

目的:分离克隆人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)编码的病毒复制负调控因子(Negative factor,Nef)基因,并将其导入BCBL-1细胞和NIH/3T3细胞中进行表达。方法:根据GenBank登记的Nef基因核苷酸序列设计PCR引物,在其5′端分别引入EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点;以含有Nef基因的pCINL质粒为模板,扩增Nef基因,经双酶切后克隆进真核表达载体pCI-neo中。为了便于蛋白检测,在下游引物5′端引入Flag序列,构建重组真核表达质粒。重组质粒经酶切鉴定、核酸序列测定和分析后分别瞬时转染BCBL-1细胞和NIH/3T3细胞,用RT-PCR、Western blot分别从核酸和蛋白水平检测Nef基因的表达情况。结果:成功构建了含Nef基因的重组真核表达质粒,核酸序列分析显示,克隆的Nef基因序列全长651bp,与GenBank中登记的Nef基因序列100%同源,引入的Flag序列完全正确;RT-PCR和Western blot都在Nef预期位置检测到特异性条带。结论:HIV-1Nef基因在BCBL-1细胞和NIH/3T3细胞中获得了正确表达。

人类免疫缺陷病毒-1B和C亚型Nef蛋白特异性CD8^+ T细胞交叉应答反应的研究

目的:探讨中国人群人类免疫缺陷病毒-1B(H IV-1B亚型)Nef蛋白特异性CD8+T细胞应答在B、C亚型间的交叉反应性。方法:选取51例H IV-1B亚型感染者,采取外周血单个核细胞(PBMC),用合成的54个H IV-1B、C亚型Nef全基因序列肽库作为抗原,酶联免疫斑点吸附试验(ELISpot)方法检测H IV-1B亚型Nef蛋白特异性CD8+T细胞对B、C亚型抗原的应答反应。结果:在产生特异性应答效应的个体中,82.9%(29/35)感染个体同时识别B和C亚型肽段。感染个体在对两个亚型肽段的识别数量及应答强度上无显著差异(P=0.529和P=0.754)。H IV-1B亚型特异性CD8+T细胞能针对70.4%无论B还是C亚型的Nef肽段产生应答反应。被特异性CD8+T细胞同时识别的B、C亚型Nef肽段间氨基酸序列的同源性显著高于仅能被识别的B亚型或C亚型肽段的氨基酸序列(P=0.01)。结论:H IV-1B亚型Nef蛋白特异性CD8+T细胞应答在B、C亚型间具有良好的交叉反应性,能产生交叉反应的氨基酸序列具有较高的亚型间同源性。

CRF01-AE亚型人类免疫缺陷病毒的基因序列特征研究

从确诊的HIV-1感染者的全血样本中提取基因组DNA,经套式聚合酶链反应(PCR)扩增其gag蛋白P17/P24交界区基因片断后,将扩增产物进行纯化和测序,分析其氨基酸序列。进而了解所检出的病毒基因变异和分子流行病学特征。结果发现,HIV-1 CRF01-AE亚型病毒分别与3株不同来源的国际参考毒株具有紧密的亲缘关系,表明这些毒株可能分别由不同的传播路线进入我国大陆境内。

P物质、神经激肽-1受体对人类免疫缺陷病毒的调节作用

生活紧张状态和抑郁是HIV感染各阶段直至发展为AIDS的重要辅助因素。Kopnisky等报道心理改变在HIV-1疾病进程中所起的作用．发现在免疫一神经传导中脑部趋化因子特别是SP的重要性。抑郁、焦虑和紧张状态与HIV发展相关，行为状态和脑力活动的改变所引起的免疫应答间接或至少有一部分是通过神经内分泌-免疫途径介导的。紧张状态反应导致神经肽的释放改变．

上海市人类免疫缺陷病毒阳性人群HIV-1分布特征分析

[目的 ] 分析上海市人类免疫缺陷病毒 (HIV )阳性人群HIV -1分布特征 ,为制定预防HIV传播措施提供科学依据。 [方法 ] 选择 40例不同感染途径的HIV阳性者 ,提取其血浆中核酸进行扩增 ,然后进行序列测定 ,确定其HIV -1型别。 [结果 ] 3 8例分离到核酸的阳性者中 ,发现 4种HIV -1亚型 (A、B、B’和C)、2种重组亚型 (CRF0 1_AE和CRF0 8_BC)和 1种未见报道的亚型 (CRF0 1_AEenvBgagUpol)。不同人群感染毒株不同 ,经性接触传播感染者感染毒株较为广泛 ( 7种 ) ,而经血传播者都为B/B’亚型。 [结论 ] 上海地区存在着多样的HIV

人类免疫缺陷病毒-1 nef诱导凋亡及下调人类白细胞抗原-I类分子

【目的】研究人类免疫缺陷病毒(HIV)-1 nef调节细胞表面的人类白细胞抗原(HLA)-I类分子及诱导细胞凋亡情况。【方法】将293T细胞分为两组,用脂质体法将含HIV-1 nef基因的质粒及空载体分别转染细胞,Western blot检测HIV-1 nef在转染细胞中的表达,荧光抗体染色结合流式细胞术检测细胞表面的HLA-I类分子表达及细胞凋亡情况。【结果】HIV-1 nef在转染细胞中有表达。转染HIV-1 nef的细胞与转染空载体的细胞经抗HLA-A,B,C-FITC染色后,平均荧光强度分别为205±22及269±15,两者相比有显著性差异(P<0.01);经Annexin V-APC/PI染色后,阳性细胞百分率分别为(60.82±8.32)%及(8.12±5.43)%,两者相比亦有显著性差异(P<0.01)。【结论】HIV-1 nef下调细胞表面的HLA-I类分子及诱导细胞凋亡。

人免疫缺陷病毒-1整合酶及其抑制剂的研究进展

整合酶 (integrase)对于人免疫缺陷病毒 (HIV) 1逆转录病毒的复制来说是必不可少的 ,因而成为抗艾滋病 (AIDS)药物设计的一个理性的靶点。最近文献报道了大量具有抗整合酶活性的化合物 。

人类免疫缺陷病毒-1母婴传播与免疫关系的研究进展

在感染人类免疫缺陷病毒-1(H IV-1)前后以及在妊娠的不同阶段孕妇及胎儿免疫系统均有巨大变化,而感染H IV-1的孕妇免疫系统的变化及相关免疫因素对H IV-1母婴传播有着很大影响,本文主要对H IV-1母婴传播与免疫的关系加以综述。

IL-16:一种更具潜力的抗人类免疫缺陷病毒1型活性的细胞因子

IL-16是一种Mr为56×10~3的四聚体蛋白,主要由CD^(8+)T细胞分泌。近年研究发现IL-16具有良好的抗人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)活性,对不同感染阶段和病程的HIV-1感染者都具有保护作用。与RANTES、MIP-1α、MIP-1β等CC类趋化因子相比,具有明显的优势,是一种很有潜力的抗HIV-1活性分子。

外周全血HIV-1 DNA定量检测在艾滋病病毒感染诊断与病程监测中的应用性研究

目的通过研究外周全血HIV-1 DNA定量检测与其他检测指标的相关性,探讨外周全血中HIV-1 DNA定量检测在艾滋病病毒感染诊断及病程监测中的作用。方法对南昌地区部分艾滋病筛查实验室送检的65例HIV-1抗体筛查有反应的样品,分别进行HIV-1抗体确证、HIV-1 DNA定量和HIV-1 RNA定量检测、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞计数,并将HIV-1 DNA与其他各项进行统计分析。结果65例HIV-1抗体筛查有反应样品经免疫印迹法(WB)确证:50例为HIV-1抗体阳性,11例为HIV-1抗体不确定,4例为HIV-1抗体阴性。50例HIV-1抗体阳性的受检者中,检出HIV-1 DNA的有45例,检出HIV-1 RNA的有33例;11例HIV-1不确定受检者中,有6例同时检出HIV-1 DNA和HIV-1 RNA,其余均未检出HIV-1 DNA和HIV-1 RNA;4例HIV-1抗体阴性受检者中,HIV-1 DNA和HIV-1 RNA均未检出。56例艾滋病感染者(患者)的HIV-1 DNA的量值与HIV-1 RNA的量值呈显著性正相关(r=0.417,P=0.001),与CD4+T淋巴细胞数值呈显著性负相关(r=-0.29,P=0.03),与CD8+T淋巴细胞数值呈正相关,但相关性不显著(r=0.249,P=0.064)。结论外周全血HIV-1 DNA定量检测可为艾滋病早期感染诊断,监测艾滋病病程进展及高效抗病毒治疗疗效提供实验依据。

血清白介素-17A、成纤维细胞生长因子与人类免疫 缺陷病毒合并丙型肝炎病毒共感患者直接抗病毒 治疗预后的相关性

目的探究血清白介素-17A(IL-17A)、成纤维细胞生长因子(FGF)与人类免疫缺陷病毒(HIV)合并丙型肝炎病毒(HCV)共感患者直接抗病毒治疗预后的相关性。方法回顾性分析新疆医科大学第八附属医院2018年1月至2019年7月收治的51例HIV合并HCV共感患者的临床资料,根据预后情况将患者分为预后不良组与预后良好组。记录患者治疗前血清IL-17A、FGF水平,采用Logistic回归分析血清IL-17A、FGF与HIV合并HCV共感患者直接抗病毒治疗预后的关系,并分析血清IL-17A、FGF对患者预后不良风险的预测价值。结果51例HIV合并HCV共感患者中,共有12例预后不良,39例预后良好;预后不良组治疗前IL-17A、FGF水平低于预后良好组,差异具有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,HIV合并HCV共感患者直接抗病毒治疗前血清IL-17A、FGF水平异常表达与治疗预后有关(OR>1,P<0.05);经受试者工作特征(ROC)曲线检验,HIV合并HCV共感患者直接抗病毒治疗前血清IL-17A、FGF水平单项及联合预测预后不良风险的曲线下面积(AUC)均>0.80,有一定预测价值。结论HIV合并HCV共感患者经直接抗病毒治疗后预后不良风险较高,其与治疗前血清IL-17A、FGF表达下调有关,可将治疗前血清IL-17A、FGF水平作为患者预后不良的预测指标。

MicroRNA-625-5p、CD64对获得性免疫缺陷综合征结核病患者的诊断及预后价值研究

目的探究microRNA-625-5p(miR-625-5p)、CD64对获得性免疫缺陷综合征(AIDS)结核病患者的诊断及预后价值。方法选取2020年6月—2022年7月在江西省赣州市第五人民医院住院的76例AIDS患者为研究组。另取同期该院未患结核病的72例AIDS患者为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-625-5p的表达,流式细胞术检测外周血中性粒细胞和单核细胞表面CD64水平。结果研究组miR-625-5p相对表达量低于对照组(P<0.05),CD64水平高于对照组(P<0.05)。受试者工作特征曲线结果表明,miR-625-5p、CD64诊断AIDS患者合并结核病的敏感性分别为81.6%(95%CI:0.710,0.895)、82.9%(95%CI:0.725,0.906);特异性分别为66.7%(95%CI:0.546,0.773)、70.8%(95%CI:0.589,0.810)。两者联合诊断的敏感性和特异性分别为85.5%(95%CI:0.756,0.925)、88.9%(95%CI:0.793,0.951)。预后不良组HIV感染时间、CD64水平均高于良好组(P<0.05),CD4^(+)T、miR-625-5p水平均低于良好组(P<0.05)。多因素一般Logistic回归分析结果表明,HIV感染时间[OR=5.484(95%CI:1.874,16.042)]和CD64水平[OR=2.713(95%CI:1.022,7.207)]是患者预后不良的危险因素(P<0.05);CD4^(+)T水平[OR=0.357(95%CI:0.139,0.918)]和miR-625-5p相对表达量[OR=0.198(95%CI:0.074,0.530)]是患者预后不良的保护因素(P<0.05)。ROC曲线结果表明,miR-625-5p、CD64预测AIDS结核病患者预后的敏感性分别为79.3%(95%CI:0.603,0.920)、72.4%(95%CI:0.528,0.873);特异性分别为76.6%(95%,CI:0.620,0.877)、53.2%(95%CI:0.381,0.679);两者联合预测的敏感性和特异性分别为82.8%(95%CI:0.642,0.942)和78.7%(95%CI:0.643,0.893)。结论microRNA-625-5p和CD64可作为AIDS合并结核病的有效生物标志物,其不仅能提高诊断的准确性,还能预测患者的预后情况。

融合表达小鼠IgG2b-Fc可增强人类免疫缺陷病毒1型Gag DNA疫苗的免疫原性

为阐明小鼠IgG2b-Fc对DNA疫苗免疫原性的增强作用,首先构建表达人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)CN54Gag基因的DNA疫苗及表达Gag与小鼠IgG2b-Fc融合基因的DNA疫苗,限制性酶切和DNA测序结果表明这两个疫苗均构建成功,蛋白免疫印迹结果也显示其正确表达。然后,利用上述DNA疫苗接种C57BL/6小鼠,比较两个DNA疫苗所诱导的特异性体液免疫反应和特异性细胞免疫反应。结果显示,融合表达小鼠IgG2b-Fc对特异性细胞免疫和体液免疫反应均有增强作用,但只有对特异性体液免疫反应的增强作用有统计学意义。

抗人类免疫缺陷病毒-1活性小分子生物效应机制的研究

目的 研究小分子化合物大环多胺类MP A、MP B和MP C抗人类免疫缺陷病毒 (HIV) 1的生物活性机制。方法 通过核酸Tm测定及圆二色 (CD)光谱法观察大环多胺类化合物对聚腺尿苷酸PolyA∶PolyU构象的影响 ;核酸断裂实验用琼脂糖凝胶电泳法、流式细胞计数法研究其对细胞凋亡和周期的影响 ;计算机分子模型Docking计算从理论上判断其与TARRNA结合的可能性。 结果 ①MP A、MP B和MP C不仅可引起PolyA∶PolyU构象的变化使其发生断裂 ,而且可抑制Tat RNA相互结合。②MP A、MP B和MP C可影响细胞亚二倍体的含量。③分子模型理论计算结果与实验结果基本一致。结论 大环多胺MP A、MP B和MP C可能通过与病毒基因组RNA的作用抑制HIV 1RNA与Tat蛋白的结合而发挥抗HIV 1的活性。