2种内膜准备方案对反复种植失败患者子宫内膜孕激素受体和整合素αⅤβ3表达的影响

目的:比较自然周期(NC)和激素替代(HRT)子宫内膜准备方案对反复种植失败(RIF)患者种植窗口期子宫内膜孕激素受体(PR)、整合素αⅤβ3表达的影响,探讨这2种方案对种植窗口期子宫内膜容受性的影响。方法:收集25例NC方案和18例HRT方案RIF患者的黄体中期子宫内膜,采用免疫组化法检测2组患者种植窗口期子宫内膜PR和整合素αⅤβ3的表达。结果:2组患者子宫内膜腺上皮细胞PR、整合素αⅤβ3和间质细胞中PR表达的H-score评分比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:NC和HRT内膜准备方案对RIF患者种植窗口期子宫内膜容受性影响一致,此两种内膜准备方案均可应用于RIF患者。

整合素αⅤβ_3非肽类小分子拮抗剂的设计及其在肿瘤显像中的研究进展

整合素αⅤβ3在肿瘤血管生成中发挥着重要的作用,肿瘤血管生成又是肿瘤生长和转移的重要环节,由于整合素αⅤβ3的拮抗剂可特异性结合于整合素αⅤβ3,因此用放射性核素对其拮抗剂进行标记并将其应用于肿瘤的显像和靶向治疗,可达到早期发现和抑制肿瘤转移的作用。本文以计算机辅助药物设计在整合素αⅤβ3非肽类小分子拮抗剂设计中的研究现状为重点,对整合素αⅤβ3非肽类小分子拮抗剂的当前研究进展进行综述,展望小分子拮抗剂在未来肿瘤显像中的应用。

抗整合素αⅤβ3单抗抑制上皮性卵巢癌血管及肿瘤生成的实验研究

目的探讨抗整合素αⅤβ3单抗诱导血管内皮细胞凋亡,抑制上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)血管及肿瘤生长的作用效应.方法将EOC细胞株TYK细胞接种于鸡胚尿囊膜(chickchorioallantcic member,CAM)建立EOC CAM模型,细胞接种后12 h,分别加入抗整合素αⅤβ3抗体(实验组)和生理盐水(对照组).5 d后,应用图像分析系统检测2组CAM血管数目(number,N)、血管面积(area,A)、血管面积比(vessel area,VA/A)及肿瘤组织面积(tissue,T).脐静脉内皮细胞株(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)ECV304接种于玻连蛋白(vitronectin,Vn)表面,2 h后加入抗αⅤβ3抗体,计数0、12 h、24 h、48 h、72 h细胞凋亡率.结果实验组N、A、VA/A及T分别为(16.80±0.71)根;(10.02±4.48)mm2;25.50±11.41;(8.25±4.15)mm2,显著小于对照组的(42.20±15.32)根;(26.15±8.35)mm2;66.62±17.64;(34.26±15.83)mm2(P<0.05).抗αⅤβ3单克隆抗体诱导HUVEC时间依赖性细胞凋亡,其24 h、48h和72 h的凋亡率显著高于IgG对照组.结论抗整合素αⅤβ3单抗通过诱导血管内皮细胞凋亡而抑制卵巢癌血管及肿瘤生长,整合素αⅤβ3可作为卵巢癌治疗的一个有效靶点.

整合素素α_Ⅴβ_3受体显像剂^(18)F标记RGD肽的研究进展

血管新生是肿瘤生长、转移过程中不可缺少的生物过程。整合素αⅤβ3受体在新生血管内皮细胞和多种肿瘤细胞表面高表达,在肿瘤血管新生中起着关键作用,目前已成为肿瘤诊断与治疗的一个重要靶点。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)肽可特异性地与整合素αⅤβ3受体结合,18 F标记的RGD肽类化合物PET显像可无创、动态地定量监测整合素αⅤβ3受体表达,在肿瘤早期诊断、疗效监测及抗血管新生评价上发挥着重要作用。本文就近年来国内外18F标记RGD肽在肿瘤αⅤβ3受体显像中的研究进展作简要综述。

胰岛素样生长因子1对大鼠正畸牙牙周膜细胞整合素α_ⅴ、β_3表达的影响

目的研究重组人胰岛素样生长因子1(recombinant human insulin-like growth factor,rhIGF-1)对大鼠正畸牙牙周膜细胞整合素αⅴ、β3表达的影响,探讨胰岛素样生长因子1在正畸牙移动过程中的作用机制。方法将30只雄性SD大鼠按rhIGF-1注射浓度不同分为6组:对照组(0μg/mL)、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL、16μg/mL组,每组5只,隔日局部注射不同浓度的rhIGF-1 0.1 mL于正畸牙颊侧牙龈黏膜下,第10天处死大鼠,用原位杂交方法检测整合素αⅴ、β3在牙周组织中的表达变化。结果压力侧对照组整合素αⅴ、β3表达较低;2、4μg/mL组整合素αⅴ、β3表达高于对照组(P<0.01),8、16μg/mL组整合素αⅴ、β3表达逐渐减弱,但仍高于对照组(P<0.05)。8μg/mL组张力侧牙周膜细胞整合素αⅴ、β3表达达到峰值,高于对照组(P<0.01),16μg/mL组表达略有下降,但仍高于对照组(P<0.01)。结论外源性rhIGF-1通过增强牙周膜细胞整合素αⅴ、β3的表达,促进细胞功能,加速正畸牙周组织的改建。

血小板源性生长因子-BB及肝细胞生长因子对体外培养子宫内膜腺上皮细胞增殖及整合素αⅤβ3表达的影响

目的探讨血小板源性生长因子(PDGF)-BB及肝细胞生长因子(HGF)对体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞增殖的影响及其最佳剂量,以及PDGF-BB及HGF对子宫内膜腺上皮细胞整合素αⅤβ3表达的影响。方法 2009年10月至2010年12月在中国医科大学附属盛京医院分离人子宫内膜腺上皮细胞及基质细胞,分别在体外培养。用特异性抗体鉴定细胞纯度,用MTT法检测PDGF-BB及HGF对子宫内膜腺上皮细胞增殖的影响,并用免疫组化方法检测子宫内膜腺上皮细胞整合素αⅤβ3的表达。结果分离的子宫内膜腺上皮细胞及基质细胞纯度高,特异性抗体鉴定细胞纯度分别为95%和97%。不同质量浓度的PDGF-BB及HGF作用后吸光度值均增加。PDGF-BB组吸光度值随着质量浓度的升高而升高,HGF组在质量浓度为20μg/L时为峰值。质量浓度为10μg/L的PDGF及20μg/L的HGF作用后子宫内膜腺上皮细胞整合素αⅤβ3的表达最强。结论 PDGF-BB及HGF均能促进体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞增殖,并能促进子宫内膜腺上皮细胞整合素αⅤβ3的表达。

整合素αVβ3与多种血管形成细胞因子的相互作用

研究表明整合素αVβ3在血管形成过程中发挥了重要的作用,近年来国内外学者对其作用机制做了大量的研究,认为整合素αVβ3在血管形成过程中与多种细胞因子具有协同作用,如碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子、血小板衍生生长因子、基质金属蛋白酶、转化生长因子-β等,这种相互作用的结果促进了血管的形成。

基于生物信息学分析骨肉瘤的关键基因和qRT-PCR实验验证

目的利用生物信息学方法筛选出与骨肉瘤(osteosarcoma,OS)相关的关键基因,以作为OS的潜在诊断标志物和新治疗靶点。方法从基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中检索下载2个符合本研究的OS相关数据集(GSE16088和GSE42572),共包括21例OS组织样本和14例正常骨组织样本。对数据集进行矫正分析鉴定出差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。通过加权基因共表达网络分析方法(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)与DEGs筛选出交集基因。对交集基因进行疾病本体论(Disease Ontology,DO)、基因本体论(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书分析(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络分析。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估该PPI网络degree排名前10位的Hubbe基因的表达水平对OS患者的诊断效能,并以另一个OS数据集GSE19276对Hubbe基因进行验证筛选出关键基因。分析关键基因与浸润性免疫细胞的相关性。收集2020年9月1日至2022年6月30日于广西中医药大学第一附属医院住院手术的4例OS患者的OS组织及其癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)对关键基因进行实验验证。结果在OS组织与正常骨组织中共筛选出687个DEGs(上调基因523个和下调基因164个)。WGCNA关键模块基因2338个。DEGs与WGCNA关键模块基因共有交集基因545个。DO富集分析结果表明,DEGs与WGCNA结果的交集基因主要与泌尿系统癌症、肾癌、生殖细胞癌、肌肉骨骼系统癌症和胚胎癌等癌症相关。GO富集结果表明,交集基因主要参与骨化的形成、细胞外基质组织和生物矿物组织发育等生物学过程。KEGG通路富集在磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又名Akt)信号通路、过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferators-activated receptor,PPAR)信号通路及流体剪切应力和动脉粥样硬化等信号通路上。PPI网络分析中degree排名前10位的Hubbe基因为磷脂酰肌醇4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha,PIK3CA)、脯氨酰4-羟化酶亚单位α1(prolyl 4-hydroxylase subunit alpha 1,P4HA1)、整合素αⅤ(integrin alphaⅤ,ITGAⅤ)、组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)、连环蛋白β1(catenin beta 1,CTNNB1)、Ⅲ型胶原蛋白α1(collagen typeⅢalpha 1,COL3A1)、Ⅰ型胶原蛋白α2(collagen typeⅠalpha 2,COL1A2)、转导蛋白β样1X相关蛋白1(transducin beta-like 1X-related protein 1,TBL1XR1)、小核核糖核蛋白多肽G(small nuclear ribonucleoprotein polypeptide G,SNRPG)和Ras相关核蛋白(Ras-related nuclear protein,RAN)。以数据集GSE19276绘制ROC曲线验证Hubbe基因表明,P4HA1和ITGAV的准确度较高(均AUC>0.8且P<0.05)。qRT-PCR实验结果显示,P4HA1和ITGAV mRNA在OS组织中高表达(均P<0.01)。结论P4HA1和ITGAV是OS的潜在生物标志物和治疗靶点。

αv-整合素超声分子成像可视化评价基质胶血管新生

目的 探讨应用携带αv-整合素分子探针的分子成像可视化评价基质胶血管新生的可行性.方法 10只实验小鼠分别于腹部皮下注射添碱性成纤维细胞生长因子（FGF）-2的基质胶制备血管新生模型.于注射后第10 d所有小鼠经尾静脉随机先后（间隔30min）弹丸注射携抗小鼠αv-整合素单抗靶向微泡（MBα）、携同型抗体对照微泡（MBc）,并分别于注入后6 min行基质胶超声造影检查,测量基质胶的显影强度（video intensity,VI）.随后,所有小鼠均预先αMBcv-整合素单抗封闭10 min后再注入MBα和MBc行超声造影检查.最后进行基质胶组织学检查.结果 超声造影图像显示MBα组呈明显的超声显影,VI值高达（20.5±3.3）U,而MBc组仅见轻度的超声显影,其VI为（4.8±1.5）U,两者之间差异有统计学意义（P＜0.05）.预先单抗封闭αv-整合素后,MBα的VI值仅为封闭前的22.4%,两者之间差异有统计学意义（P＜0.05） 而MBα的VI值较封闭前无明显变化,两者之间差异无统计学意义（P＞0.05）.病理学检查显示基质胶中有丰富的新生血管形成,新生血管中有大量αv-整合素表达.结论 应用携带αv-整合素分子探针的超声分子成像可有效特异地评价基质胶血管新生.

二补助育改良方对反复体外受精-胚胎移植失败患者子宫内膜容受性的影响

目的:观察二补助育改良方对反复体外受精-胚胎移植(IVF-ET)失败患者子宫内膜容受性的影响。方法:选取2016年1月至2018年3月东直门医院、北京妇产医院及海淀区妇幼保健院多中心收集的因反复IVF-ET失败而就医患者资料,二补助育改良方药物干预3个月后,与未用药干预组比较,采集2组患者黄体中期子宫内膜活体检查,从分子生物学层面进行研究观察,以q PCR研究同源盒基因(HOX)A10 mRNA表达,以免疫组织化学法检测白血病抑制因子(LIF)、整合素αⅤβ3等指标,同时记录妊娠结局。结果:在HOXA mRNA表达中,2组差异有统计学意义(P<0.05);在LIF、整合素αⅤβ3的表达,2组差异有统计学意义(P<0.05);胚胎种植率和临床妊娠率有显著提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:二补助育改良方可以改善反复IVF-ET失败患者黄体中期子宫内膜HOXA 10mRNA、LIF、整合素αⅤβ3的表达。二补助育改良方的药效值得肯定,可以改善反复IVF-ET失败患者的子宫内膜容受性。

^(99)Tc^(m)-3PRGD_(2)单光子发射计算机断层显像在大鼠乳腺癌骨移植瘤放疗疗效评价中的价值观察

目的观察^(99)Tc^(m)-3PRGD_(2)单光子发射计算机断层(SPECT)显像在大鼠乳腺癌骨移植瘤放疗疗效评价中的价值。方法50只Wistar大鼠通过骨髓腔内注入含有大鼠乳腺癌细胞的腹水混悬液建立胫骨移植瘤模型,最终成瘤30只。将30只乳腺癌骨移植瘤大鼠按随机数字表法分为对照组、低剂量放疗组、高剂量放疗组各10只,分别于骨移植瘤部位行0 Gy、5 Gy、25 Gy的单次大剂量直线加速器放疗,各组分别于放疗前及放疗结束后第10天尾静脉注射^(99)Tc^(m)-3PRGD_(2),1 h后行SPECT显像并计算骨移植瘤部位放射性计数与对侧相应部位同等大小区域的放射性计数比值(T/NT)。显像结束后处死大鼠,采用HE染色观察大鼠胫骨组织病理改变,采用免疫组织化学法观察骨移植瘤组织整合素αⅤβ_(3)受体表达情况。采用Spearman相关性分析T/NT与整合素αⅤβ_(3)受体阳性细胞表达的关系。结果各组放疗前行^(99)Tc^(m)-3PRGD_(2)SPECT显像,骨移植瘤部位均可见显像剂浓聚影,浓聚程度无明显差异;各组放疗前T/NT比较无统计学差异。各组放疗后行^(99)Tc^(m)-3PRGD_(2)SPECT显像,显像剂浓聚程度对照组>低剂量放疗组>高剂量放疗组;各组放疗后T/NT对照组>低剂量放疗组>高剂量放疗组(P均<0.05)。HE染色可见各组胫骨组织均有骨结构破坏,对照组内肿瘤细胞密度高于高、低剂量放疗组,高、低剂量放疗组内有大量肿瘤细胞坏死,其中以高剂量放疗组肿瘤细胞坏死最多。对照组、低剂量放疗组、高剂量放疗组骨移植瘤组织整合素αⅤβ_(3)受体阳性率对照组>低剂量放疗组>高剂量放疗组(P均<0.05)。Spearman相关性分析显示,T/NT与αⅤβ_(3)受体阳性细胞表达呈正相关(r=0.847,P<0.01)。结论^(99)Tc^(m)-3PRGD_(2)SPECT显像指标变化与骨移植瘤病理改变一致,用于大鼠乳腺癌骨移植瘤放疗疗效评价的效果良好。