针刀干预对颈椎间盘退变兔整合素α5、β1表达的影响

目的观察针刀干预对颈椎间盘退变兔颈部肌肉形态学以及整合素α5、β1含量的影响,探讨针刀延缓颈椎间盘退变的机制。方法将24只新西兰家兔按随机数字表法分为空白组、模型组、针刀组,每组8只,采用"低头位加风寒湿刺激"法建立异常应力诱导下的兔颈椎间盘退变模型,通过颈椎核磁共振(MRI)影像学验证造模是否成功。针刀组在造模结束1周后进行干预,干预在无菌状态下以针刀治疗四步曲为参考,每周1次,共治疗4周。空白组、模型组与针刀组采用相同固定方式固定。结束后采用HE染色法观察各组实验兔颈部肌肉组织形态学变化;Western Blot法和Real-time PCR法检测椎间盘髓核中整合素α5、β1含量的变化。结果颈椎MRI结果显示,空白组矢状面可见髓核呈高亮信号状态、椎间盘高度正常,横断面可见髓核内信号均匀且与纤维环边界清晰;与空白组相比,模型组椎间盘的高度出现轻度降低,矢状面可见部分椎间盘髓核颜色较暗,呈灰色,信号强度较空白组明显减低,与空白组椎间盘横断面所见的髓核均匀分布相比,模型组髓核内部结构明显分布不均,且纤维环和髓核之间界限模糊,难以分清。HE染色显示,空白组可见肌纤维结构清晰,呈长条状平行排列,肌核少量散在纤维附近,肌细胞无变形水肿;与空白组相比,模型组肌纤维出现粗细不皱缩、变形,肌核聚集在附近,肌节不清晰,炎性浸润片状散在出现;与模型组相比,针刀组可见肌纤维挛缩改善,肌核规律分布,炎性细胞浸润明显减少。Western Blot法结果显示:与空白组相比,模型组椎间盘髓核中整合素α5、β1蛋白表达量显著降低(P<0.01);与模型组相比,针刀组整合素α5、β1蛋白含量明显增加(P<0.01)。Real-time PCR法结果显示,与空白组相比,模型组椎间盘髓核中整合素α5、β1 mRNA相对表达量均显著降低(P<0.01);与模型组相比,针刀组整合素α5 mRNA显著升高(P<0.01),β1mRNA相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验所选取的"低头位加风寒湿刺激"模型具有可行性;针刀可以修复肌肉的紊乱排列,促进组织修复;针刀延缓颈椎间盘退变的可能机制是通过力学干预调整整合素α5、β1的表达含量,达到延缓颈椎间盘退变的目的。

诱导高表达整合素α5、β1人主动脉平滑肌细胞株模型的构建

目的通过慢病毒表达载体构建高表达整合素（ITG）α5、β1人主动脉血管平滑肌细胞株（VSMC）模型，为研究整合素西、β1两个亚基和VSMC增殖和迁移的关系奠定基础。方法通过转基因技术建立高表达ITGα5株（EX-ITGα5）、高表达ITGβ1株（EX—ITGβ1）、空表达载体株（Con—Ex），荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）和Western blot法检测各组细胞ITGα5、ITGβ1基因mRNA及蛋白表达。结果两个对照组Con-EX（ITGα5：0．251±0．021，ITGβ1：0．505±0．062）、Con（未感染的空白对照细胞0．238±0．021，0．471±0．051）之间ITGαs、ITGβ1 mRNA表达量比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；与这两个对照组比较，EX-ITGα5（0．632±0．102，0．534±0．061）、EX—ITGβ1（O．271±0．031，1．172±0．110）mRNA表达量显著升高，差异有统计学意义（P〈0．05）；通过Western blot检测，各组在相对分子质量150×10^3、180×10^3出现ITGα5、ITGβ1免疫印迹，分别在EX—ITGα5、EX—ITGβ1处最强。结论成功构建高表达ITGα5、ITGβ1人主动脉平滑肌细胞株，可为研究整合素α5、β1和VSMC增殖和迁移的关系提供实验依据。

整合素α_5、β_1抗体对睾丸生精细胞凋亡的影响

目的观察整合素α_5、β_1抗体体内干预试验对Wistar大鼠睾丸生精细胞凋亡的作用。方法腹腔内注射α_5、β_1抗体,采用原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记技术,分析Wistar大鼠生精细胞凋亡情况。结果α_5、β_1试验组大鼠睾丸生精细胞明显减少(P<0.001)。结论α_5、β_1抗体具有阻止Wistar大鼠生精细胞凋亡的作用。