microSPECT/CT显像定量评价肿瘤^(99m)Tc-3P4-RGD_2摄取及整合素α_Vβ_3表达水平的实验研究

目的:探讨99mTc-HYNIC-PEG4-E[PEG4-c(RGDfk)]2(简称99mTc-3P4-RGD2)microSPECT/CT显像定量肿瘤放射性摄取及整合素αvβ3表达水平的可行性研究。方法:对不同99mTc样品进行microSPECT/CT显像,评价样品体积、活度对放射性计数的影响;对荷脑胶质瘤裸鼠行99mTc-3P4-RGD2microSPECT/CT显像,对比基于CT、SPECT及融合图像测定的肿瘤体积与肿瘤实际体积一致性,并评价肿瘤整合素αvβ3表达水平,由病理证实。结果:99mTc样品microSPECT/CT显像放射性计数与其放射性活度呈直线相关(R2=0.999 7),Bland-Altman一致性分析显示,基于microSPECT/CT测定的肿瘤体积与肿瘤实际体积差异(%)为-2.48±8.17,显著低于microCT(15.04±79.53,t=5.60,P=0.005)和microSPECT(17.04±36.27,t=7.17,P=0.002);microSPECT/CT显像肿瘤99mTc-3P-RGD2摄取与整合素αvβ3表达呈正相关。结论:microSPECT/CT显像可定量99mTc放射性活度和成活肿瘤组织体积,有效评估整合素αvβ3受体表达,为肿瘤整合素受体靶向治疗患者筛选及药物剂量个体化提供影像学数据。

以整合素α_vβ_3为靶点的RGD配体在抗肿瘤血管新生中的应用

整合素αvβ3是一种能特异性识别RGD序列的膜受体蛋白,其与含RGD(Arg-Gly-Asp)模体的蛋白质结合的特异性在肿瘤细胞的粘附、迁移、浸润及肿瘤血管新生中起重要作用.由于整合素αvβ3在多种肿瘤细胞表面高表达而在正常细胞中低表达或不表达,因此其成为肿瘤治疗的理想靶点.肿瘤新生血管为肿瘤的生长提供营养,因此近年来抑制肿瘤血管新生也成为肿瘤治疗的重要途径.有研究显示,几种RGD毒素蛋白不但以整合素αvβ3为靶点靶向结合到肿瘤部位从而具有直接抗肿瘤细胞增殖、黏附、迁移及浸润功能,而且它们还具有抗肿瘤血管新生的作用,因此RGD毒素蛋白可从上述两方面抑制肿瘤生长与转移.本文就整合素αvβ3为靶向的RGD配体结构特点及其在肿瘤治疗中的靶向治疗和抗血管新生应用及前景加以综述.

整合素α_vβ_3在肿瘤血管生成中的作用

整合素是一种重要的黏附分子,整合素αVβ3是整合素家族中的重要成员。作为内皮细胞与细胞外基质的桥梁,整合素αVβ3通过调节内皮细胞的黏附、迁移、增殖、凋亡等功能,在肿瘤血管生成的过程中发挥重要的作用。整合素αVβ3的单克隆抗体和拮抗剂能抑制肿瘤血管的生成,可能是一种治疗肿瘤的新途径。

肿瘤整合素α_vβ_3受体显像的研究现状

整合素αvβ3受体在多种恶性肿瘤细胞表面有高水平的表达,尤其在恶性肿瘤组织新生血管内皮细胞膜,成熟血管内皮细胞和绝大多数正常器官系统则无表达或几乎不能被探及。含有RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)序列的小分子多肽是整合素αvβ3受体拮抗剂,对整合素αvβ3受体具有高度的选择性与亲和力,是一类具有潜在临床应用价值的肿瘤受体显像剂。

高糖、肿瘤坏死因子促进血管内皮细胞表面整合素（α_vβ_3）表达

本文采用ＥＬＩＳＡ方法检测培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）表面玻璃连接蛋白受体（ＶｉｔｒｏｎｅｃｔｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒＶｎＲ即整合素家庭的α＿ｖβ＿３）的表达改变；用（５１）Ｃｒ－标记血小板（（５１）Ｃｒ－ｐｌａｔｅｌｅｔｅ，（５１）Ｃｒ－ｐＬ）检测ＨＵｖＥｃ的粘附功能；Ｆｕｒａ－２／Ａｍ负载ＥＣ，测定ＨＵＶＥＣ胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ（２＋）］），观察了高糖、肿瘤坏死因子－α（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α，ＴＮＦ－α）对ＥＣ粘附功能的影响。结果表明：①高糖（３０ｍｍｏｌ／Ｌ）可明显促进ＥＣ与ＰＬ的粘附（ＣＰＭ值：３６１±２ｌ．９３ＶＳ２ｌ９．６７±１６．２６，ｎ＝６Ｐ＜０．０１），抗β３亚单位单抗（β３ＭｃＡｂ）可部分阻断ＥＣ与ＰＬ粘附。ＴＮＦ－α（１０００μ／ｍ１）也有相同作用（ＣＰＭ值：４ｌ０．７±１７．６ＶＳ２１９．６７±１６．２６１ｎ＝６Ｐ＜０．０１），β３ＭｃＡｂ也部分阻断ＴＮＦ－α诱导的ＥＣ－ＰＬ间的粘附。②不同浓度高糖和ＴＮＦ－α不同时间可影响ＥＣ表面的α＿ｖβ＿３表达，并且在一定范围内有浓度和时间依赖性。③高糖和ＴＮＦ－α可明显增加ＥＣ的［Ｃａ（２＋）］ｉ，上述资料提示?

术前lncRNA TPT1-AS1和整合素β3水平与结直肠癌根治性切除术后复发转移的相关性

目的探讨术前血清长链非编码RNA肿瘤蛋白翻译调节因子1-反义RNA1(lncRNA TPT1-AS1)、整合素β3(ITGB3)水平与结直肠癌病人根治性切除术后复发转移的相关性。方法选择2019年3月至2020年3月在海南省第二人民医院进行结直肠癌根治性切除术的90例病人为结直肠癌组,选择同期在海南省第二人民医院进行健康体检的人员90例作为对照组,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清lncRNA TPT1-AS1表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清ITGB3水平,搜集病人资料,Pearson法分析lncRNA TPT1-AS1与ITGB3水平相关性,Cox回归模型分析影响结直肠癌根治性切除术后复发转移的危险因素。结果与对照组比较,结直肠癌组病人术前血清lncRNA TPT1-AS1表达水平(2.62±0.35比1.05±0.12)、ITGB3水平[(236.24±30.62)ng/L比(185.47±25.38)ng/L]显著升高(P<0.05);结直肠癌病人血清lncRNA TPT1-AS1和ITGB3水平呈正相关性(r=0.65,P<0.05);不同分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移及血管侵犯的病人血清lncRNA TPT1-AS1、ITGB3水平比较差异有统计学意义(P<0.05);lncRNA TPT1-AS1、ITGB3高表达组结直肠癌根治术后复发转移率显著高于低表达组(P<0.05);TNM分期、淋巴结转移、血管侵犯、lncRNA TPT1-AS1、ITGB3是影响结直肠癌病人术后复发转移的危险因素(P<0.05)。结论结直肠癌病人根治性切除术前血清lncRNA TPT1-AS1、ITGB3水平升高,与术后复发转移相关,可能成为结直肠癌预后判断的血清标志物。

整合素β3通过激活MAPK/ERK途径促进鼻咽癌细胞转移

鼻咽癌(NPC,nasopharyngeal carcinoma)作为我国南方及东南亚地区高发的一种头颈部恶性肿瘤,远端转移和局部复发是导致其治疗失败的主要原因。本研究通过对不同转移能力的鼻咽癌细胞进行分析,发现整合素β3(ITGB3,integrinβ3)在高转移鼻咽癌细胞中的表达明显高于低转移鼻咽癌细胞。随后的研究表明ITGB3的上调表达促进了鼻咽癌细胞迁移、侵袭、克隆形成以及黏附能力,同时促进了鼻咽癌细胞增殖并抑制其凋亡水平。进一步地,本研究发现,ITGB3主要通过激活MAPK/ERK途径,进而促进鼻咽癌细胞迁移、侵袭、克隆形成以及黏附。因此,研究揭示了ITGB3对鼻咽癌细胞转移的调控作用及其分子机制,为鼻咽癌细胞转移防治与治疗提供了新的理论基础。

靶向肿瘤血管αvβ_3整合素的脂质声学造影剂体外研究

目的 制作靶向脂质声学造影剂并评估其体外靶向造影成像的可行性。方法 制作高表达αvβ3 的黑色素瘤细胞K173 5的肿瘤细胞模型,利用新桥医院自行研制的脂质造影剂“脂氟显”,通过碳化二亚胺偶合技术,将单克隆抗体与微泡表面物质结合,制作成靶向微泡。分别与高表达αvβ3 的黑色素瘤细胞和低表达αvβ3 的黑色素瘤细胞进行体外结合实验,同时使用水流冲刷实验来验证靶向微泡与靶标结合后的抗流体剪切力的能力,从而在体外条件下研究微泡的靶向特性。结果 建立αvβ3 高表达的肿瘤细胞模型,并成功地制作出靶向肿瘤血管αvβ3 整合素的微泡,加入抗体在45ug以上时靶向抗体结合更加充分,体外试验结果提示靶向微泡与靶标有特异性结合能力,具有一定的抗流体剪切力能力。结论 靶向微泡体外试验结果提示进一步的体内靶向诊断和治疗是可行的。

血管性血友病因子、整合素β_3在人肺癌细胞H460中的表达及其与肿瘤转移的相关性

背景与目的:血管性血友病因子(von Willebr and factor,vWF)、整合素β3(integrinβ3)与肿瘤转移的机制目前研究不清楚。本研究目的是观察vWF与integrinβ3在人肺癌细胞H460中的表达,人肺癌细胞H460与vWF黏附的关系,两因子与肿瘤轻移的相关性及vWF与integrinβ3的相互关系。方法:①应用免疫组化技术观察vWF及integrinβ3在人肺癌细胞株H460的表达;②联合应用vWF黏附实验、抗体抑制实验及MTT法,观察vWF及integrinβ3与人肺癌细胞H460的黏附,及vWF与integrinβ3的相互关系。结果:①免疫组化结果显示H460细胞均表达vWF及integrinβ3。②vWF可以与H460细胞黏附,Anti-integrinβ3抑制后这种黏附降低,A值由1.59±0.06降到0.55±0.03,(P=0.01619),Anti-vWF抑制后这种黏附也降低,A值由1.60±0.06降到0.54±0.03,(P=0.01598),两者抑制黏附效果相同。结论:H460细胞表达vWF及integrinβ3,vWF可以与H460细胞黏附,vWF可能通过与integrinβ3结合发挥黏附作用,从而促进肿瘤细胞转移。

整合素αvβ_3拮抗剂-苯丁酸氮芥偶联毒素的合成及其体外抗肿瘤活性

目的合成整合素(Integrin)αvβ3拮抗剂-苯丁酸氮芥偶联毒素,并检测其体外抗肿瘤活性。方法化学合成In-tegrinαvβ3拮抗剂,并与苯丁酸氮芥通过酰胺键偶联,MTT法检测偶联毒素对人脐静脉内皮细胞ECV304和肝癌细胞HepG2的抑制作用。结果合成的偶联毒素经核磁共振和质谱分析鉴定,表明结构正确,纯度达90%以上,对HepG2细胞的抑制效果弱于苯丁酸氮芥,但对ECV304细胞的抑制特异性较好。结论Integrinαvβ3拮抗剂-苯丁酸氮芥偶联毒素可抑制HepG2和ECV304细胞的增殖,为癌症治疗提供了一个新途径。

α_vβ_3与恶性肿瘤的侵袭和转移

αvβ3 是整合素家族中的一员 ,可表达于多种不同组织来源的恶性肿瘤 ,通过诱导肿瘤血管的生成 ,调节肿瘤细胞凋亡和水解细胞外基质等作用 ,参与肿瘤的侵袭和转移过程。深入研究αvβ3 在恶性肿瘤中的表达与功能 ,有助于进一步认识恶性肿瘤侵袭转移的分子机制 。

胃癌组织中Vav3表达与肿瘤侵袭转移的关系及临床意义研究

目的探讨胃癌组织中Vav3表达与肿瘤侵袭转移的关系及其临床意义。方法选取2014年5月—2015年5月于河北医科大学第四医院外三科住院并行肿瘤切除的胃癌患者92例。收集患者胃癌组织及癌旁正常组织（距肿瘤边缘〉3 cm,镜检无癌细胞）的石蜡标本,采用免疫组化法检测Vav3、Rel A、增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）在胃癌组织及癌旁正常组织中的表达;分析胃癌组织中Vav3表达强度与临床病理特征的关系;Vav3、Rel A、PCNA、MMP-2表达之间的关系采用Spearman秩相关分析。结果胃癌组织中Vav3的阳性表达率为78.3%（72/92）,高于癌旁正常组织的40.2%（37/92）（χ^2=27.572,P〈0.001）;胃癌组织中Rel A的阳性表达率为88.0%（81/92）,高于癌旁正常组织的52.2%（48/92）（χ^2=28.242,P〈0.001）;胃癌组织中PCNA的阳性表达率为73.9%（68/92）,高于癌旁正常组织的47.8%（44/92）（χ^2=13.143,P〈0.001）;胃癌组中MMP-2的阳性表达率为69.6%（64/92）,高于癌旁正常组织的48.9%（45/92）（χ^2=8.125,P=0.004）。Vav3强表达患者性别、年龄、浸润深度、远处转移情况与Vav3弱表达比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;Vav3强表达患者肿瘤分化程度、肿瘤直径、淋巴结转移程度与Vav3弱表达比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。Vav3表达与Rel A、PCNA、MMP-2表达均呈正相关（r_s=0.338,P〈0.001;r_s=0.225,P=0.031;r_s=0.267,P=0.010）;Rel A表达与PCNA表达呈正相关（r_s=0.336,P=0.001）;Rel A表达与MMP-2表达无直线相关关系（r_s=0.176,P=0.094）;PCNA表达与MMP-2表达无直线相关关系（r_s=0.188,P=0.072）。结论胃癌组织中Vav3存在过表达现象,Vav3表达增强与肿瘤转移及进展有关。Vav3可能通过调节Rel A、PCNA、MMP-2表达而参与胃癌侵袭转移。

整合素αvβ3在脑胶质瘤的表达与肿瘤恶性程度的关系

目的探讨整合素 αｖβ３与脑胶质瘤恶性程度之间的关系。方法应用免疫组化 ＳＡＢＣ法检测整合素 αｖβ３在 ４３例Ⅰ～Ⅳ级脑胶质瘤和 ＢＴ３２５人胶质瘤细胞系中的表达。结果Ⅲ～Ⅳ级脑胶质瘤阳性率及高表达率均明显高于 Ⅰ～Ⅱ级脑胶质瘤（Ｐ＜０．０５）。结论整合素 αｖβ３与脑胶质瘤恶性程度呈正相关，并可能对胶质瘤的侵袭性起正性调节作用。

携抗αvβ3-整合素单抗靶向微泡对肿瘤新生血管靶向效应的研究

目的探讨携抗αvβ3-整合素单抗靶向微泡对肿瘤新生血管的靶向效应。方法通过生物素桥接法制成携抗αvβ3-整合素单抗的靶向脂质微泡(MBa)、对照微泡携同型抗体脂质微泡(MBc);选取12只HepG2皮下移植瘤裸鼠模型(肿瘤组)和正常对照裸鼠(对照组),经尾静脉随机注射MBa、MBc和RGDfvV封闭10min后再注射MBa(Blocking+MBa),并行对比超声检查,测量声强度(VI)。分别取肿瘤组肿瘤组织和对照组正常骨骼肌组织行病理学和免疫组化检查。结果肿瘤组中MBa的VI值(17.43±3.30)U,较MBc的VI值(5.88±1.04)U增大近3倍,差异有统计学意义(P<0.01),应用RGDfvV封闭αvβ3-整合素后MBa的VI值降至(6.14±2.25)U,与MBc及对照组的各VI值比较差异均无统计学意义。免疫组化检查显示:肿瘤组织的新生血管内皮有大量αvβ3-整合素显色,可被RGDfvV封闭;而骨骼肌中仅有少量αvβ3-整合素显色。结论携抗αvβ3-整合素单抗的靶向微泡对肿瘤新生血管具有明显的靶向效应,有望用于肿瘤的诊断和疗效评估。

整合素α_vβ_3在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨整合素vα3β在乳腺癌中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学法(S-P法)检测整合素vα3β在62例乳腺癌中的表达。结果:研究发现在乳腺癌组织中整合素vα3β表达上调,随着肿瘤的增大其表达明显上调,差异有显著性(P<0.01)。结论:整合素vα3β在乳腺癌的发生、发展及恶性进展过程中起重要作用。

αvβ_3整合素在小细胞肺癌骨转移细胞株SBC-5中的表达及意义

目的:分析αvβ3整合素在特异性小细胞肺癌骨转移细胞株中的表达,探讨肺癌骨转移的机制。方法:RT-PCR、Western-blot和免疫荧光染色检测小细胞肺癌特异性骨转移细胞株SBC-5和非骨转移细胞株SBC-3中αvβ3整合素的表达差异。结果:αvβ3整合素在SBC-5细胞株中的表达显著高于SBC-3细胞株。结论:αvβ3整合素可能与小细胞肺癌骨转移的发生相关,可能促进了小细胞肺癌骨转移的发生。

化疗对骨肉瘤α_V和β_3整合素表达影响的研究

目的:探讨化疗对骨肉瘤αV、β3整合素表达的影响。方法:免疫组化法检测20例化疗前和31例化疗后骨肉瘤αV、β3整合素的表达情况。结果:αV、β3整合素在骨肉瘤细胞呈强阳性表达,而正常骨细胞均呈阴性表达,P=0.000;化疗后两者表达明显下降,P=0.000。秩和检验表明,化疗后αV整合素与肿瘤Enneking分期(P=0.014)、侵袭(P=0.007)、复发(P=0.021)明显相关;β3整合素表达与肿瘤复发明显相关,P=0.003。多因素分析显示,化疗后αV整合素表达水平是影响骨肉瘤侵袭独立因素,化疗后β3整合素是影响骨肉瘤复发独立因素。结论:αV、β3整合素可能成为骨肉瘤诊断的辅助指标;化疗可能通过下调骨肉瘤细胞αV、β3整合素表达而改变其相应的生物学活性;αV、β3整合素可能分别是影响骨肉瘤侵袭、复发的独立因素;αV、β3整合素可能作为判断骨肉瘤化疗预后的指标及化疗药物作用的靶分子。

整合素αvβ3结构与激活及其肿瘤靶向药物的研究进展

整合素αvβ3在肿瘤生长及转移过程中发挥重要作用,是一个治疗癌症的靶点。整合素αvβ3结构域众多,激活过程非常复杂,其中激活关键的结构域有β-propeller结构域、βI结构域以及thigh结构域。此外,针对αvβ3已经开发出很多肿瘤相关靶向药物,如肿瘤显影药、靶向运输治疗药以及直接抗肿瘤药。就整合素αvβ3与癌症、结构与激活以及αvβ3肿瘤相关靶向药物这几方面进行综述,为进一步研究整合素αvβ3的结构功能以及药物提供了一定理论基础。

整合素αvβ3与肿瘤关系的研究进展

在我国,恶性肿瘤已经成为导致居民死亡的主要原因之一,但其发生发展机制尚未完全阐明,并且急需找出新的治疗靶点和手段。整合素(integrin, ITG)是一种能够介导细胞与细胞之间、细胞与基质之间相互黏附的一类细胞膜上的跨膜糖蛋白。研究证明,整合素是由α与β两个亚基组成的一种在肿瘤新生血管中特异性高表达、而在正常组织血管中低表达甚至不表达的异二聚体。近年来,国内外大量的研究证明,在肿瘤的发生发展过程中,整合素αvβ3的表达与其密切相关,并且在肿瘤的治疗及诊断中具有重要意义。本文主要就整合素αvβ3与肿瘤的关系进行概述。