丙泊酚对人骨肉瘤细胞增殖、侵袭及整合素聚集的影响及机制分析

目的研究丙泊酚对人骨肉瘤细胞的增殖、侵袭及整合素聚集的影响,并分析其作用机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞,将其分为5组,分别是:空白对照组(不做处理,CK组)、阴性对照组(用脂肪乳处理,NC组),丙泊酚低、中、高浓度组(低:60.0μg/L;中:100.0μg/L;高:120.0μg/L),根据各组浓度设置选择对数期细胞将丙泊酚加入6孔板进行干预,各组处理时长均为72 h。MTT(四氮唑盐)法检测细胞增殖、细胞克隆形成实验检测细胞的生长与克隆形成、Transwell法检测细胞的迁移与侵袭、Western blot(蛋白免疫印记)法检测丙泊酚对人骨肉瘤细胞相关蛋白表达的影响;免疫荧光检测整合素蛋白α5β1的表达。结果培养12 h、24 h,48 h,72 h后,相比于CK与NC组,低、中、高浓度的丙泊酚组人骨肉瘤细胞吸光值明显减少(P<0.05),并呈现浓度依赖性(P<0.05),且随着丙泊酚作用时间的延长,人骨肉瘤细胞增值率显著降低(P<0.05)。人骨肉瘤细胞的克隆、迁移及侵袭数目、迁移与侵袭相关蛋白纤维连接蛋白(NF蛋白)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白9(MMP-9)、高迁移率族盒蛋白4(SOX4)以及整合素蛋白α5β1的表达水平在不同不浓度丙泊酚组中均明显低于CK与NC组,并呈现浓度依赖性(P<0.05)。结论丙泊酚对人骨肉瘤细胞的增殖、侵袭及整合素聚集具有抑制作用,抑制机制可能是下调SOX4蛋白的表达,且在本研究浓度及作用时间范围内,其作用效果随剂量和时间的增加而增强。