整合素相关蛋白α2β与ανβ3在宫颈鳞癌组织中的表达及意义

目的 研究整合素相关蛋白α2β与ανβ3在宫颈鳞癌组织中的水平表达,并探讨其对疾病进展的意义。方法 收集2017年11月至2018年10月住院且手术切除的68例宫颈鳞癌患者的组织石蜡标本作为观察组,同时期住院行全子宫切除的52例子宫肌瘤患者的正常宫颈组织石蜡标本作为对照组。通过免疫组织化学法检测2组细胞膜上整合素相关蛋白α2β与ανβ3的表达水平,分析宫颈鳞状细胞癌的生物学行为与宫颈鳞状细胞癌细胞膜上α2β、ανβ3表达的关系。联合2个指标探讨整合素相关蛋白与宫颈癌临床分期及淋巴结转移的相关性。结果 观察组细胞膜上整合素α2β和ανβ3蛋白阳性表达率均显著高于对照组(P<0.05);2组细胞膜上整合素相关蛋白(α2β和ανβ3)表达在组织学分类、临床分期、淋巴结转移和浸润深度方面差异有统计学意义(P<0.05),在肿瘤大小方面差异无统计学意义(P>0.05)。α2β联合ανβ3阳性表达率与宫颈癌临床分期及淋巴结转移均呈正相关(r=0.941、0.931,P<0.05)。结论 整合素相关蛋白α2β与ανβ3表达在宫颈鳞状细胞癌组织患者标本中呈异常升高,其在疾病的发生发展中可能具有一定作用。同时,整合素相关蛋白与宫颈鳞状细胞癌的临床分期和淋巴结转移密切相关,可作为宫颈鳞癌局部浸润、远处转移的预测因素。

解整合素-金属蛋白酶8对急性酒精性肝损伤小鼠中肝细胞增殖与凋亡的调控作用

目的 探讨解整合素-金属蛋白酶8(A disintegrin and metalloprotease 8,ADAM8)对急性酒精性肝损伤小鼠中肝细胞增殖与凋亡的影响。方法 选择6~8周龄的KM小鼠30只,随机分为5组:正常对照组(n=6)、模型组(n=6)、ADAM8-sgRNA1组(n=6)、ADAM8-sgRNA2组(n=6)、ADAM8-sgRNA3组(n=6)。正常对照组小鼠不做任何处理,质粒组小鼠分别尾静脉注射3种质粒,模型组小鼠尾静脉注射等量生理盐水;将模型组和质粒组小鼠常规喂养3 d,通过一次经口灌胃50%酒精14 mL/kg诱导小鼠急性肝损伤。检测各组小鼠AST、ALT水平,HE染色观察其病理学变化,PAS染色观察肝组织糖原变化;Western blotting检测ADAM8、TNF-α、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、BCL2关联X蛋白(BCL2-associated X protein, Bax)的表达水平。结果 与模型组相比,ADAM8-sgRNA2组ADAM8的表达水平明显降低(P<0.05);与正常对照组相比,模型组PCNA的表达水平明显降低(P<0.001),TNF-α、Bax的表达水平明显升高(P<0.01);与模型组相比,ADAM8-sgRNA2组PCNA表达水平显著升高(P<0.001),TNF-α、Bax表达水平显著下降(P<0.01)。与正常对照组相比,模型组AST、ALT指标显著升高(P<0.05);与模型组相比,ADAM8-sgRNA2组AST、ALT指标显著下降(P<0.05)。HE染色和PAS染色结果显示:与正常对照组相比,模型组肝损伤明显,坏死积分显著升高(P<0.05),糖原含量显著减少(P<0.001);与模型组相比,ADAM8-sgRNA2组坏死积分明显降低(P<0.05),ADAM8-sgRNA2组糖原含量明显上升(P<0.001)。结论 ADAM8过表达可抑制急性酒精性肝损伤小鼠中肝细胞的增殖并促进肝细胞的凋亡。

外周血微RNA-122-5p和解整合素金属蛋白酶10在桥本甲状腺炎中的表达及临床意义

目的探究外周血微RNA-122-5p(miR-122-5p)和解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)在桥本甲状腺炎(HT)病人中的表达情况及临床意义。方法选择2020年1月至2022年1月在南京医科大学第四附属医院经病理诊断的HT病人86例作为HT组,同期选择经甲状腺腺瘤切除手术的非癌病人62例作为对照组。收集两组病人的一般资料并检测甲状腺功能。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组外周血中miR-122-5p表达水平,ELISA法检测两组外周血中ADAM10水平。Pearson法分析miR-122-5p或ADAM10水平与甲状腺功能参数的相关性。logistic回归分析模型评估HT的影响因素。ROC曲线用于评估miR-122-5p和ADAM10对HT发生的诊断价值。结果与对照组比较,HT组游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)[(8.79±0.85)nmol/L比(13.15±1.21)nmol/L]、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)[(3.74±0.15)nmol/L比(4.56±0.24)nmol/L]水平及ADAM10表达[(3.21±1.13)μg/L比(5.02±1.69)μg/L]降低(P<0.05);促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、C反应蛋白(CRP)水平及miR-122-5p表达(1.57±0.46比1.02±0.34)均升高(P<0.05)。HT组和对照组miR-122-5p与TGAb、TPOAb、CRP水平呈正相关(P<0.05);ADAM10与TGAb、TPOAb及CRP均呈负相关(P<0.05)。HT组中miR-122-5p与ADAM10水平呈负相关(r=−0.46,P<0.05)。MiR-122-5p、ADAM10、TGAb和TPOAb是HT发生的影响因素(P<0.05)。MiR-122-5p、ADAM10及二者联合区分HT组和对照组的最佳截断值分别为1.22、4.74μg/L、0.42,曲线下面积分别为0.83(0.76,0.89)、0.85(0.78,0.90)、0.91(0.85,0.95)。结论HT病人外周血中miR-122-5p表达升高,ADAM10水平降低,二者与甲状腺微结构损伤有关,且对HT的早期诊断具有一定价值。

解整合素-金属蛋白酶10及肝细胞配体B2在乙肝-肝纤维化-肝癌患者中的表达

目的探讨解整合素-金属蛋白酶10(ADAM10)、肝细胞配体B2(Ephrin-B2)在“肝炎-肝纤维化-肝癌”轴中的表达以及二者与肝纤维化之间的相关性。方法选取400例HBV感染患者为研究对象,以病情的严重程度分为肝纤维化组(200例)、肝细胞癌组(200例),将肝纤维化组进一步分为以下4个亚组:乙型肝炎组(56例)、轻度纤维化组(87例)、中度纤维化组(34例)、肝硬化组(23例),另外选取200例健康体检患者为健康对照组,对比组间血清ADAM10、Ephrin-B2、肝功能指标、肝纤维化指标;免疫组化检测健康肝组织、乙肝不同分级肝纤维化肝组织、肝癌组织间ADAM10与Ephrin-B2表达。采用t检验进行单因素分析,二元logistic进行多因素分析,皮尔逊相关性检测相关性,受试者工作特征(ROC)曲线进行诊断价值分析。结果ADAM10、Ephrin-B2、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、凝血酶原时间(PT)、白蛋白(ALB)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)水平在乙型肝炎组、轻度肝纤维化组、中度肝纤维化组、肝硬化、肝细胞癌组依次升高,且均显著高于健康对照组(P<0.05),免疫组化检测显示ADAM10、Ephrin-B2二者阳性表达在乙肝肝纤维化组织与肝癌组织中显著高于健康肝组织,且随着乙肝肝纤维化的进展Ephrin-B2、ADAM10表达显著升高。ADAM10高表达组和Ephrin-B2高表达组AST、ALT、PT、ALB、LN、Ⅳ-C、HA、PC-Ⅲ显著高于ADAM10低表达组和Ephri-B2低表达组(P<0.05)。患者血清ADAM10与Ephrin-B2呈显著正相关(P<0.05),ADAM10、Ephrin-B与血清AST、ALT、PT、ALB、LN、Ⅳ-C、HA、PC-Ⅲ以及肝纤维化分期呈显著正相关(P<0.05)。ADAM10、Ephrin-B2、AST、ALT、PT、ALB、LN、Ⅳ-C、HA、PC-Ⅲ为HBV感染患者患“肝炎-肝纤维化-肝癌”轴进展的影响因素。ADAM10诊断肝纤维化、肝细胞癌曲线下面积(AUC)分别为0.680、0.713,敏感度为0.821、0.794,特异度为0.577、0.639;Ephrin-B2诊断肝纤维化、肝细胞癌AUC为0.663、0.730,敏感度为0.757、0.834,特异度为0.651、0.693。结论ADAM10、Ephrin-B2与“肝炎-肝纤维化-肝癌”轴进展呈递增表达关系,ADAM10、Ephrin-B2可能在HBV感染患者肝纤维化和肝细胞癌发生和发展进程中发挥了重要作用,ADAM10、Ephrin-B2有希望成为“肝炎-肝纤维化-肝癌”轴疾病诊断和病情监测的重要血清标记物。

HIF1α通过启动ALKBH5调控整合素蛋白αν表达的机制研究

目的探索缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF1α)启动N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)去甲基化酶ALKBH5改善子宫内膜容受性分子标志物整合素蛋白αν(integrinαν,ITGAV)表达的内在机制。方法利用人子宫内膜癌Ishikawa细胞,低氧以及干扰HIF1α条件下实时荧光定量PCR(real time quantity PCR,RT-PCR)或Western blotting检测ALKBH5的表达;过表达或干扰ALKBH5表达后,RT-PCR或Western blotting检测对ITGAV基因和蛋白表达的影响;荧光素酶报告基因系统分析miR-136-5p靶向ITGAV mRNA表达;RNA pull-down分析及m6A甲基化检测ALKBH5与miR-136-5p竞争性结合ITGAV mRNA上甲基化位点序列。结果低氧条件下HIF1α时间依赖性促进ALKBH5蛋白在Ishikawa细胞中的表达。过表达ALKBH5后,ITGAV的表达水平升高(P<0.001),Ishikawa细胞增殖能力增强(P<0.001);ALKBH5敲除后,ITGAV的表达水平降低(P<0.001),Ishikawa细胞的增殖能力下降(P=0.019)。miR-136-5p靶向调节ITGAV mRNA后,ITGAV mRNA(P=0.007)和蛋白表达水平(P=0.015)下调。miR-136-5p靶向调节ITGAV的序列与ALKBH5所识别的甲基化位点所在序列重叠,两者在调控ITGAV mRNA上存在竞争性。结论HIF1α通过调控ALKBH5,竞争性地结合miR-136-5p所靶向的ITGAV mRNA上特定序列,精细化调节ITGAV的表达,改善子宫内膜容受性。

人胃癌组织中微小RNA-126和解整合素-金属蛋白酶9的表达及其与临床病理参数的相关性

目的分析人胃癌组织中微小RNA-126(miR-126)及解整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)的表达及其与临床病理参数的相关性,探讨二者与胃癌发生发展的关系。方法收集2020年1月至2022年9月吉林省人民医院收治并经临床和病理组织学确诊为胃腺癌的46例患者手术切除的癌组织及距离癌组织3~5 cm的癌旁组织。采用荧光定量聚合酶链反应法检测胃癌组织和癌旁组织中miR-126及ADAM9 mRNA的表达,免疫组织化学法检测ADAM9蛋白的表达。记录患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、肿瘤分期及转移等基本信息,分析miR-126及ADAM9的表达与胃癌患者临床病理参数的相关性。结果胃癌组织中miR-126 mRNA的相对表达量显著低于癌旁组织[(0.53±0.24)比(1.00±0.00)](t=-8.613,P<0.001),ADAM9 mRNA的相对表达量显著高于癌旁组织[(1.43±0.56)比(1.00±0.00)](t=3.412,P=0.002)。ADAM9在胃癌组织中的阳性率显著高于癌旁组织[73.9%(34/46)比15.2%(7/46)],差异有统计学意义(χ^(2)=29.723,P<0.001)。胃癌组织中miR-126的表达水平与患者肿瘤分化程度、TNM分期以及远处转移有关(均P<0.05)。胃癌组织中ADAM9的表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(均P<0.05)。结论胃癌组织中miR-126的表达水平下调,ADAM9表达上调,二者之间可能存在负调节作用,且与胃癌的进展及转移关系密切。

解整合素金属蛋白酶10与激素性股骨头坏死患者骨髓间充质干细胞的增殖及成骨分化

背景:众多研究发现,激素性股骨头坏死的病理进展与骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化异常有关,其中解整合素金属蛋白酶10(A disintegrin and metalloproteases 10,ADAM10)高度参与此过程,但具体作用机制尚不清楚。目的:探讨ADAM10对激素性股骨头坏死患者来源骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响及其可能机制。方法:选择23例激素性股骨头坏死患者和17例股骨颈骨折患者,于术中无菌条件下取股骨近端骨髓,采用密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞,分别得到激素性股骨头坏死患者来源骨髓间充质干细胞(S-BMSCs)和股骨颈骨折患者来源骨髓间充质干细胞(F-BMSCs),体外培养至第3代,采用CCK-8检测两组细胞增殖活性;茜素红染色和碱性磷酸酶染色观察两组细胞成骨分化能力;qRT-PCR和Western blot检测两组细胞中ADAM10 mRNA和蛋白表达水平。采用ADAM10过表达载体慢病毒感染S-BMSCs,再联合Notch信号通路抑制剂DAPT进行处理,CCK-8检测细胞增殖活性;茜素红染色和碱性磷酸酶染色观察细胞成骨分化能力;qRT-PCR检测细胞中成骨标志物碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨钙素mRNA表达水平;Western blot检测细胞中Notch信号通路相关蛋白Notch1、NICD、Hes1表达水平。结果与结论:(1)S-BMSCs的增殖活性、成骨分化能力及ADAM10表达水平均显著低于F-BMSCs(均P <0.01);(2)ADAM10过表达后S-BMSCs增殖活性、成骨分化能力及碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨钙素mRNA表达水平和Notch1、NICD、Hes1蛋白表达水平均显著升高(P <0.05);然而,DAPT联合干预可显著抑制ADAM10过表达对S-BMSCs增殖活性和成骨分化能力的促进作用,并抑制Notch信号通路的活化;(3)结果表明,ADAM10在S-BMSCs中低表达,ADAM10过表达可增强S-BMSCs的增殖活性及成骨分化能力,其作用机制可能与激活Notch信号通路有关。

去整合素-金属蛋白酶17、Notch1及α-平滑肌动蛋白在子宫内膜异位症组织中的表达及意义

目的研究去整合素-金属蛋白酶(deintegrin metalloproteinase,ADAM)17、Notch1及α-平滑肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)在子宫内膜异位症(EMs)组织中的表达,及其与子宫内膜异位症的临床病理特征之间的相关性。方法选取2019年10月至2020年10月潍坊医学院附属医院收治的EMs病人异位内膜40例(异位内膜组)、在位内膜25例(在位内膜组),正常内膜25例作为对照组。采用免疫组化法及半定量分析法分别检测ADAM17、Notch1、α-SMA在三组中的表达。分析异位内膜组织中ADAM17、Notch1、α-SMA的表达与病理特征的关系。采用Pearson相关分析分析ADAM17、Notch1、α-SMA在三组中的表达的相关性。结果ADAM17、Notch1、α-SMA在异位内膜组中的表达高于在位内膜组(4.77±1.35比3.24±1.09,4.40±1.24比3.44±0.96,4.42±1.30比3.36±0.95),差异有统计学意义(P<0.05),在位内膜组的表达高于正常内膜组(2.36±1.22、2.24±1.01、2.16±1.028),差异有统计学意义(P<0.05)。异位内膜组中ADAM17、Notch1、α-SMA在Ⅲ~Ⅳ期中的表达高于Ⅰ~Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05)。EMs病人异位内膜组中ADAM17、Notch1、α-SMA的表达与年龄及囊肿大小差异无统计学意义(P>0.05)。ADAM17、Notch1、α-SMA在异位内膜中的表达两两之间具有正相关性(P<0.05)。结论ADAM17、Notch1、α-SMA在EMs发生及发展中起重要作用,ADAM17可能通过Notch通路参与EMs的纤维化发生并调控EMs的纤维化严重程度。

解整合素金属蛋白酶10通过介导Wnt/β-catenin信号通路促进子宫内膜癌细胞上皮-间质转化

目的:探讨解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)对子宫内膜癌(EC)细胞上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法:收集84例EC患者的新鲜癌组织及癌旁组织标本,采用qRT-PCR检测癌组织及其癌旁组织中ADAM10 mRNA表达水平。以人EC细胞株HEC-1B作为研究对象,采用ADAM10过表达慢病毒感染HEC-1B细胞,并联合Wnt/β-catenin信号通路特异性抑制剂XAV939进行干预,再将细胞分为空白对照组(blank)、慢病毒阴性对照组(Lv-NC)、ADAM10过表达慢病毒组(Lv-ADAM10)和Lv-ADAM10+XAV939组。采用qRT-PCR检测感染后各组细胞中ADAM10 mRNA表达水平;划痕和Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;Western blot法分析各组细胞中ADAM10及EMT相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达水平。结果:EC患者癌组织中ADAM10 mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05)。与blank组或Lv-NC组比较,Lv-ADAM10组细胞中ADAM10 mRNA和蛋白表达水平以及N-cadherin、Vimentin、β-catenin、Snail、MMP2和MMP9等蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05),而E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05),同时细胞迁移和侵袭能力显著增强(均P<0.05)。与Lv-ADAM10组比较,LvADAM10+XAV939组细胞中N-cadherin、Vimentin、β-catenin、Snail、MMP2和MMP9等蛋白表达水平显著降低(均P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05),且细胞迁移和侵袭能力明显降低(均P<0.05)。结论:ADAM10在EC组织中高表达,其过表达可促进HEC-1B细胞的EMT进程,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

解整合素-金属蛋白酶33基因多态性与胆管癌及血清肿瘤标志物水平的相关性研究

背景:胆管癌(cholangiocarcinoma,CC)是发源于胆管上皮细胞的恶性肿瘤,由于起病隐匿,预后较差,尚缺乏有效根治手段.解整合素-金属蛋白酶(disintegrin and metalloproteinase,ADAM)33在肿瘤、炎症的发生发展中发挥重要作用.本研究观察了C ADAM33 rs678881及rs2853209与CC的易感性的关系.目的:探讨ADAM33基因rs678881、rs2853209单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与胆管癌的易感性的关系.方法:选取2017-01/2020-06期间于我院诊治的胆管癌手术患者212例作为研究组,以同期在我院体检的健康查体者186例作为对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测研究对象血清中ADAM33基因rs678881及rs2853209位点的基因型,采用酶联免疫吸附法检测血清可溶性细胞间分子-1(soluble intercellular molecule-1,sICAM-1)水平,电化学发光法检测血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、癌细胞表面抗原(cancer cell surface antigen,CA19-9)水平.结果:研究组的ADAM33 rs678881 GC及rs678881 CC的基因分布频率较对照组高(P<0.05).研究组的ADAM33 rs678881C等位基因分布频率较对照组高(P<0.05).研究组与对照组在ADAM33 rs2853209的基因多态性方面比较无显著性差异.研究组患者CA19-9、sICAM-1及CEA水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).ADAM33 rs678881GG、GC、CC基因型患者的CA19-9、sICAM-1及CEA水平依次升高,各基因型之间水平比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论:ADAM33 rs678881 GC、CC基因型及C等位基因增加胆管癌的易感性及血清肿瘤标志物的水平,并可能参与了疾病的进展.

去整合素金属蛋白酶10和高迁移率族蛋白B1在声门型喉癌患者中的表达及预后分析

目的探讨去整合素金属蛋白酶10(a disintegrin and metalloprotease 10,ADAM10)和高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)与声门型喉癌患者病理特征及预后关系分析。方法回顾性收集2017年3月~2020年12月于南京医科大学附属南京医院确诊及治疗的声门型喉癌患者50例(观察组),另取相对喉癌组织切缘0.5cm以上部位标本作为对照组。观察并比较ADAM10和HMGB1在两组中的阳性表达率,分析其阳性表达与声门型喉癌患者的病理特征关系。单因素分析影响声门型喉癌预后的危险因素,Cox多因素回归分析声门型喉癌患者不良预后的独立危险因素。结果ADAM10和HMGB1在观察组的阳性表达率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。声门型喉癌组织中的ADAM10与淋巴结转移和T分级差异比较有统计学意义,而与年龄、性别、饮酒史、吸烟史、分化程度差异比较无统计学意义(P>0.05);HMGB1与分化程度差异比较有统计学意义(P<0.05),而与年龄、性别、饮酒史、吸烟史、淋巴结转移、T分级差异比较无统计学意义(P>0.05)。单因素分析结果表明,淋巴结转移、T分级、分化程度、ADAM10、HMGB1是患者预后的影响因素。Cox多因素回归分析结果表明,淋巴结转移、T3+T4分级、低分化程度、ADAM10阳性、HMGB1阳性为声门型喉癌患者预后不良的独立影响因素(P<0.05)。结论ADAM10和HMGB1可作为声门型喉癌不良预后的风险评估指标。

去整合素-金属蛋白质酶12在妇产科相关疾病中的研究进展

去整合素-金属蛋白酶(ADAM)是一种膜结合或分泌蛋白,其家族成员分布广、功能多,影响人体的一系列生理病理过程并参与众多疾病的调节。去整合素-金属蛋白酶12(ADAM12)作为该家族的成员之一,通过对细胞黏附、转移、侵袭、蛋白质水解、信号传递等生物学活动的影响来调节细胞表型。ADAM12在多种肿瘤、炎症、正常妊娠中等都有明显过表达,但在不良妊娠中这种过表达受到抑制甚至低于正常水平,如复发性流产和子宫内膜异位症等。低表达的ADAM12和妊娠的不良结局密切相关,先兆子痫和21-三体综合征的母体血清中ADAM12也呈低表达,提示ADAM12有筛查疾病的潜力。该综述通过回顾ADAM12的结构和功能,阐述了ADAM12在妇产科相关疾病中的研究进展。

解整合素-金属蛋白酶33基因多态性与胆管癌及血清肿瘤标志物水平的相关性研究

背景胆管癌(cholangiocarcinoma,CC)是发源于胆管上皮细胞的恶性肿瘤,由于起病隐匿,预后较差,尚缺乏有效根治手段.解整合素-金属蛋白酶(disintegrin and metalloproteinase,ADAM)33在肿瘤、炎症的发生发展中发挥重要作用.本研究观察了C ADAM33 rs678881及rs2853209与CC的易感性的关系.目的探讨ADAM33基因rs678881、rs2853209单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与胆管癌的易感性的关系.方法选取2017-01/2020-06期间于我院诊治的胆管癌手术患者212例作为研究组,以同期在我院体检的健康查体者186例作为对照组,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测研究对象血清中ADAM33基因rs678881及rs2853209位点的基因型,采用酶联免疫吸附法检测血清可溶性细胞间分子-1(soluble intercellular molecule-1,sICAM-1)水平,电化学发光法检测血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、癌细胞表面抗原(cancer cell surface antigen,CA19-9)水平.结果研究组的ADAM33 rs678881 GC及rs678881 CC的基因分布频率较对照组高(P<0.05).研究组的ADAM33 rs678881C等位基因分布频率较对照组高(P<0.05).研究组与对照组在ADAM33 rs2853209的基因多态性方面比较无显著性差异.研究组患者CA19-9、sICAM-1及CEA水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).ADAM33 rs678881GG、GC、CC基因型患者的CA19-9、sICAM-1及CEA水平依次升高,各基因型之间水平比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论ADAM33 rs678881 GC、CC基因型及C等位基因增加胆管癌的易感性及血清肿瘤标志物的水平,并可能参与了疾病的进展.

动态心电图联合血清内皮微粒钙整合素结合蛋白1对冠心病无症状心肌缺血的诊断价值

目的 探讨动态心电图联合血清内皮微粒(EMP)、钙整合素结合蛋白1(CIB1)对冠心病无症状心肌缺血的诊断价值。方法 选取2020年3月至2022年9月收治的疑似冠心病无症状心肌缺血患者220例为研究对象,经冠状动脉造影(CAG)检查结果分为CAG阳性组(n=120)和CAG阴性组(n=100)。采用化学发光法检测血清EMP、CIB1表达水平。分析对比动态心电图与血清EMP、CIB1单一检测和联合检测对冠心病无症状心肌缺血的诊断效能;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清EMP、CIB1对冠心病无症状心肌缺血发生的诊断价值。结果 CAG阳性组患者血清中血清EMP水平[(1 425±261)×10^(6)/L]、发作持续时间[(273±50)s]显著高于CAG阴性组[(1 185±126)×10^(6)/L,(47±4)s],血清CIB1水平(33±4)显著低于CAG阴性组(47.0±4.3),差异有统计学意义(P<0.05);CAG阴性组ST段压低1 820次,CAG阳性组ST段压低318次,发作时间主要集中6:01~12:00。CAG阴性组与CAG阳性组患者心肌缺血ST段压低发作时间分布比较差异无统计学意义(P>0.05);受试者工作特征曲线(ROC)显示,血清EMP、CIB1诊断冠心病无症状心肌缺血的曲线下面积(95%CI)分别为0.820(0.763,0.869)、0.873(0.822,0.914),截断值分别为1296×10^(6)/L、39.7,对应的灵敏度分别为72.5%、90.8%,特异度分别为84.0%、74.0%。二者联合诊断的曲线下面积(95%CI)为0.917(0.872,0.950),灵敏度为71.67%,特异度为92.00%;EMP、CIB1、动态心电图三者联合检测的敏感度及准确率均高于单一指标检测(95.8%与72.5%、90.83%、70.83%,P<0.001、<0.001;90.0%与77.7%、83.2%、73.6%,P<0.001、=0.121、<0.001、=0.036)。结论 血清EMP、CIB1水平联合动态心电图检测可提高冠心病无症状心肌缺血患者的诊断准确率、敏感度,具有较高的诊断价值。

支气管哮喘急性发作期患儿外周血去整合素金属蛋白酶8、干扰素调控因子1水平观察

目的观察支气管哮喘急性发作期患儿外周血去整合素金属蛋白酶(disintegrins metalloproteinase,ADAM)8、干扰素调控因子(interferon regulatory factor,IRF)1的水平变化。方法支气管哮喘急性发作期患儿91例(急性发作组),按照全球哮喘防治倡议标准将其分为轻度组27例、中度组35例、重度组29例,并于同期随机选取60例支气管哮喘缓解期患儿为缓解组,60例健康体检儿童为对照组。采用荧光定量PCR法检测各组研究对象外周血ADAM8 mRNA、IRF1 mRNA,Western blotting检测外周血ADAM8、IRF1蛋白,并检测各组肺功能指标,包括第1秒用力呼气量(forced expiratory volume in one second,FEV1)、用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、用力呼气峰流速(peak expiratory flow,PEF)。结果急性发作组中轻度组、中度组、重度组患儿外周血ADAM8 mRNA、IRF1mRNA表达水平高于缓解组和对照组(P均<0.05),且轻度组、中度组、重度组患儿外周血ADAM8 mRNA、IRF1mRNA表达水平逐渐升高(P均<0.05)。急性发作组中轻度组、中度组、重度组患儿外周血ADAM8蛋白、IRF1蛋白水平高于缓解组和对照组(P均<0.05),且轻度组、中度组、重度组患儿外周血ADAM8蛋白、IRF1蛋白水平逐渐升高(P均<0.05)。急性发作组患儿外周血ADAM8 mRNA与IFR1 mRNA水平呈正相关(r=0.793,P<0.05),ADAM8 mRNA水平与肺功能指标FEV1、FVC、FEV1/FVC、PEF呈负相关性(r分别为-0.659、-0.702,-0.683、-0.761,P均<0.05),IFR1 mRNA水平与肺功能指标FEV1、FVC、FEV1/FVC、PEF呈负相关性(r分别为-0.712、-0.735,-0.728、-0.756,P均<0.05)。结论支气管哮喘急性发作期患儿外周血ADAM8、IRF1水平升高,可能与小儿支气管哮喘的发生、发展有关,检测外周血ADAM8、IRF1有助于支气管哮喘急性发作期患儿病情判断。

寿胎丸加减方对超排卵小鼠种植窗期子宫内膜整合素β3蛋白表达的影响

目的探讨寿胎丸加减方对超排卵小鼠种植窗期子宫内膜整合素β3蛋白表达的影响。方法将70只昆明未孕小鼠按随机数字表法分为3组:中药组30只、阿司匹林组30只和对照组10只。建立控制性排卵小鼠模型。模型建立成功后,中药组、阿司匹林组、对照组分别给予寿胎丸加减中药、阿司匹林、0.9%氯化钠注射液进行干预。在小鼠种植窗期取子宫中段组织,采用免疫组化PV二步法检测子宫内膜组织中整合素β3蛋白的表达。结果中药组小鼠子宫内膜整合素β3蛋白强阳性表达率明显高于阿司匹林组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。阿司匹林组小鼠子宫内膜整合素β3蛋白强阳性表达率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论寿胎丸加减方可提高超排卵小鼠种植窗期子宫内膜整合素β3蛋白的表达水平,改善子宫内膜的容受性。

解整合素-金属蛋白酶33在不同严重程度哮喘患者血清中的表达水平及其与气道慢性炎症的关系

目的解整合素-金属蛋白酶33(ADAM33)是哮喘重要的易感基因之一,与哮喘发病和气道高反应性密切相关。文中评估ADAM33在不同严重程度哮喘患者血清中表达水平及其与气道慢性炎症的关系。方法回顾性分析2015年5月1日至2016年5月1日期间于南京总医院就诊的轻-中度哮喘(n=54)、重度哮喘(n=35)和对照组(n=30)患者,分别检测血清总Ig E水平、外周血嗜酸性粒细胞(EOS)计数和血清中ADAM33、IL-4和IL-13表达水平,并进行相关性分析。结果轻-中度哮喘组、重度哮喘组和对照组患者血清中ADAM33表达分别为(23.8±6.21)、(64.8±12.8)和(18.3±4.49)pg/m L,重度哮喘组和轻-中度哮喘组血清ADAM33表达均显著高于健康对照组,且重度哮喘组血清ADAM33表达也同样高于轻-中度哮喘组(P<0.05)。相关分析结果显示,ADAM33表达与IL-4和IL-13呈正相关性(r=0.79、r=0.81,P<0.05),而与EOS计数和血清总Ig E无相关性(r=0.54、r=0.46,P>0.05)。结论 ADAM33在不同严重程度哮喘患者血清中的升高可反映哮喘的严重程度。血清IL-4和IL-13表达水平与ADAM33的正相关提示ADAM33的表达水平可能受到Th2类细胞因子的调控。

解整合素-金属蛋白酶33基因T1位点多态性与哮喘相关性研究

目的探讨解整合素-金属蛋白酶33(ADAM33)基因中的T1位点不同基因型及等位基因的分布频率,与支气管哮喘及血浆IgE水平的相关性。方法对122例陕西关中地区汉族哮喘儿童(哮喘组)及137例对照儿童(对照组)应用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测位点多态性;通过ELISA法检测血浆IgE水平。结果与对照组相比,哮喘组血浆总IgE水平显著上升(P<0.001)。在该地区儿童中只检测到T1位点的2种基因型(TT和CT),哮喘组2种基因型的分布频率分别为85.2%和14.8%,对照组分别为86.1%和13.9%,两组分布频率差异无统计学意义(χ2=0.041,P>0.05);哮喘组的T等位基因和C等位基因频率分别为92.6%、7.4%,对照组分别为93.1%、6.9%,两组分布差异也无统计学意义(χ2=0.038,P>0.05)。259例(包括对照组和哮喘组)样本和122例哮喘样本的血浆IgE水平在不同基因型均无差异。结论在陕西关中地区汉族儿童中,ADAM33基因T1位点基因多态性与哮喘不相关,也不影响血浆IgE水平。

解整合素金属蛋白酶19(ADAM19)与子痫前期的相关性研究

通过对孕妇胎盘组织和外周血中解整合素金属蛋白酶19(ADAM19)的检测,探讨ADAM19与子痫前期发病的关系.将病人分为研究组(子痫前期组)和对照组(正常妊娠组),子痫前期组病人中早发型50例,晚发型44例,对照组病人50例.于临近分娩时取静脉血,分娩后取胎盘组织,应用免疫组织化学技术和免疫印迹技术对胎盘组织中ADAM19蛋白进行检测,用ELISA法检测两组血浆中ADAM19的水平.结果显示,胎盘组织中ADAM19分布在多种滋养层细胞中,包括细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞和一些绒毛间质结缔组织细胞、毛细血管中,其阳性信号定位于细胞膜上和细胞质中;ADAM19的蛋白表达正常胎盘中为0.34±0.03,晚发型子痫前期组为0.53±0.02,早发型子痫前期组为0.82±0.03,三者间比较差异均有统计学意义(P<0.01).正常孕妇血浆中ADAM19为(4.52±0.10)μg/L,晚发型子痫前期为(4.32±0.11)μg/L,早发型子痫前期(3.78±0.10)μg/L.早发型子痫前期组与对照组比较有统计学差异(P<0.001),晚发型子痫前期组与对照组比较无统计学差异(P>0.05),早发型与晚发型子痫前期比较有统计学差异(P<0.001).结果表明,子痫前期胎盘组织中ADAM19过度表达可能与子痫前期的发生和发展有关,ADAM19有可能作为预测子痫前期发病的分子标志.

β4整合素结合蛋白调控成纤维细胞胞外基质生成的实验研究

目的探讨β4整合素结合蛋白(ITGB4BP)对成纤维细胞胞外基质生成的调控作用。方法分别构建、包装能在哺乳动物细胞中促进和抑制ITGB4BP表达的腺病毒表达载体pAdEasy-ITGB4BP-EGFP和慢病毒表达载体Lentivirus-FIV-H1/U6-copGFP-ITGB4BP-RNAi,经筛选鉴定有效后,分别感染人正常皮肤成纤维细胞和增生性瘢痕(HTS)成纤维细胞,利用ELISA检测细胞培养上清内基质金属蛋白酶(MMP-9)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)的表达情况。结果正常皮肤成纤维细胞内IT-GB4BP高表达后,引起MMP-9、TGF-β1和collagenⅠ表达降低;反之HTS成纤维细胞内ITGB4BP表达抑制后,MMP-9、TGF-β1和collagenⅠ表达增高。结论ITGB7BP对MMP-9、TGF-β1和collagenⅠ表达具有重要调节功能。提示ITGB4BP可能具有抗纤维化的重要功能,为下一步深入探讨HTS的形成机制提供了重要依据。