血小板衍生生长因子-BB、转化生长因子-β_1联合应用对大鼠正畸牙牙周膜中整合素β_3表达的影响

目的观察大鼠正畸牙局部联合应用血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)和转化生长因子-β1(TGF-β1)后正畸牙牙周膜中整合素β3表达的变化。方法按随机数字表法,将32只大鼠随机均分为4组。建立大鼠上颌第一磨牙近中移动正畸模型,隔日于施力磨牙颊侧牙龈黏膜下分别注射1%PBS、10 ng PDGF-BB、5 ng TGF-β1、10 ng PDGF-BB和5 ng TGF-β1叠加剂量,注射体积均为0.1 mL。加力10 d后处死动物,取左上颌第一磨牙及其牙周组织,用免疫组织化学方法检测牙周组织中整合素β3的表达,进行阳性表达区域平均光密度值测量,对测量结果行方差分析,服从正态分布,再行组间t检验统计学分析。结果各实验组压力侧牙周膜细胞中整合素β3的表达强度均高于对照组(P<0.01),其中PDGF-BB+TGF-β1组与TGF-β1组或PDGF-BB组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。实验组张力侧牙周膜细胞中整合素β3的表达强度均高于对照组(P<0.05),其中PDGF-BB+TGF-β1组整合素β3表达强度较强,与TGF-β1或PDGF-BB组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论局部联合应用外源性PDGF-BB和TGF-β1对大鼠正畸牙牙周组织中整合素β3的上调作用较单独运用PDGF-BB或TGF-β1组强,二者联合应用有协同效应,共同促进了正畸牙周组织改建。

外源性LIF和IL-1对围着床期小鼠子宫内膜整合素β_3亚基表达的调节

Objective:To study regulation of external leukemia inhibitory factor(LIF) and interlukin 1(IL 1) on the expression of integrin β 3 in the mouse endometrium during peri implantation period and explore the mechanism which LIF participate in embryonic implantation.Methods:The mice were injected peritoneally with LIF,IL 1 or IL 1ra at different administration on day 2～4 of pregnancy.The level of integrin β 3 protein was measured with Westernblot method and mRNA measured with RT PCR.Results:The levels of integrin β 3 protein and mRNA were increased by LIF and IL 1(P<0.05) and which relied on administration.The level of integrin β 3 mRNA was decreased by IL 1ra (P<0.05).Conclusion:LIF and IL 1 of cytokines can improve the expression of integrin β 3 in the peri implantation endometrium of mouse.Both of them may take part in implantation by regulating cell adhesion molecules.

血小板衍生生长因子-BB与胰岛素样生长因子-Ⅰ联合应用对大鼠正畸牙牙周膜细胞整合素β_3表达的影响

目的观察血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)与胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)联合应用对大鼠正畸牙压力侧牙周膜细胞(PDLCs)中整合素β3蛋白表达的影响。方法建立SD大鼠正畸牙移动模型,隔日于正畸牙颊侧牙龈黏膜下单独或联合注射10 ng PDGF-BB及200 ng IGF-Ⅰ,加力10 d后处死大鼠,取材用免疫组织化学方法检测正畸牙压力侧牙周膜细胞中整合素β3的表达。结果 PDGF-BB、IGF-Ⅰ单独或联合应用均能增强压力侧牙周膜细胞中整合素β3表达(P<0.01);与PDGF-BB、IGF-Ⅰ单独应用比较,IGF-Ⅰ加PDGF-BB组牙周膜细胞中整合素β3表达明显增强(P<0.05和P<0.01)。结论外源性PDGF-BB和IGF-Ⅰ在大鼠正畸牙的局部注射能上调压力侧牙周膜细胞中整合素β3表达,二者联合应用具有协同效应。

来曲唑与克罗米酚对子宫内膜整合素α_Vβ_3和基质金属蛋白酶组织抑制因子-3表达的影响

目的 比较来曲唑（LE）与克罗米酚（CC）促排卵治疗时对植入窗期子宫内膜整合素αvβ3和基质金属蛋白酶组织抑制因子-3（TIMP-3）表达的影响。方法 收集2004年3～10月在本中心服用LE或CC促排卵治疗20例患者植入窗期子宫内膜（LE组9例，CC组11例），另取12例自然月经周期的相应时期内膜作为对照。通过免疫组织化学法测定整合素αvβ3和TIMP-3的表达强度。结果 三组子宫内膜整合素αvβ3的表达强度无显著性差异；TIMP-3表达强度CC组高于LE和对照组。结论 LE和CC都不影响植入窗期子宫内膜中整合素αvβ3的表达。CC使TIMP-3的表达信号明显加强。

雌、孕激素受体、环氧合酶-2及整合素-β_3在输卵管中的表达及与输卵管妊娠的关系

目的:探讨雌、孕激素受体(ER、PR)、环氧合酶(COX)-2及整合素-β3在输卵管妊娠中的作用。方法:采用免疫组化方法检测35例人妊娠输卵管、17例增生期正常输卵管、17例分泌期正常输卵管黏膜上皮中ER、PR、COX-2及整合素-β3的表达情况。结果:①ER、PR在增生期输卵管中有表达,在分泌期输卵管中表达率较增生期强(P<0.05)。ER、PR在妊娠输卵管中的阳性(+++)表达率比正常输卵管明显降低(P<0.05)。②COX-2在增生期和分泌期输卵管中的阳性(+++)表达率较低,在妊娠输卵管中的阳性(+++)表达率较正常输卵管明显增高(P<0.05)。③整合素-β3在妊娠输卵管中的阳性(+++)表达率与正常分泌期的输卵管无明显差异(P>0.05)。结论:①ER、PR在输卵管黏膜上皮中的表达降低和COX-2表达增强可能与输卵管妊娠相关;②整合素-β3可能不参与输卵管妊娠的发生。

靶向整合素α_vβ_3受体的新型RGDyC-PEG-PAMAM纳米探针的设计制备、^(131)I标记及其质量控制

本研究以具有优良生物学性能的聚酰胺-胺树状大分子(PAMAM)为纳米载体,将具有肿瘤靶向性的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)与纳米载体相连,并通过放射性核素^(131)I进行标记,对标记物的体内外药效学性质进行评价,探讨将其应用于肿瘤特异显像和靶向治疗的可能性。从多肽化学修饰法角度设计精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-酪氨酸-半胱氨酸(RGDyC),利用点击化学法引入双功能基团PEG(NHS-PEG-MAL),采用"一锅两步"法制备RGDyC-PEG-PAMAM纳米复合物,通过核磁共振和紫外光谱进行表征确定产物,并检测纳米粒径分布和电位,用透射电镜(TEM)观察其形态大小及分布;进一步采用氯胺T法进行^(131)I标记,并测定标记率、标记物的稳定性及脂水分配系数。所设计的RGDyC-PEG-PAMAM纳米复合物制备产率为62.09%,^(131)I对其标记率为94.68%~98.87%,标记物在体外72h后放化纯大于80%,脂水分配系数lg P(正辛醇/水)为-1.59±0.09。所设计的RGDyC-PEG-PAMAM可采用氯胺T法成功完成^(131)I标记,制备与标记过程高效、简捷,标记物^(131)I-RGDyC-PEG-PAMAM具有良好稳定性和较高亲水性,成药性良好,为后期进一步考察体外肿瘤细胞摄取与生长抑制、评估人癌裸鼠异种移植瘤模型治疗及肿瘤显像等体内外药效学研究奠定了基础,^(131)I-RGDyC-PEG-PAMAM有可能作为一个新型SPECT探针应用于肿瘤特异显像与靶向治疗。

体外受精-胚胎移植失败者子宫内膜整合素β_3及细胞间隙连接蛋白43的表达研究

目的探讨子宫内膜中整合素β_3、细胞间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)表达水平与妊娠结局的关系,进而分析其与子宫内膜容受性的相关性。方法选择行体外受精-胚胎移植失败者35例作为观察组,既往有正常生育史者15例作为对照组,于黄体中期行宫腔镜检查并取内膜,应用免疫组化方法检测子宫内膜整合素β_3和Cx43表达的HSCORE评分并进行组间比较。结果观察组与对照组子宫内膜腔上皮整合素β_3表达的平均HSCORE评分分别为0.22±0.34和0.57±0.48,组间比较差异有显著性(P=0.01),而两组子宫内膜腺上皮的整合素β_3表达未见明显差别(P>0.05)。观察组与对照组子宫内膜间质细胞Cx43表达的平均HSCORE评分分别为2.11±0.83和1.49±0.77,组间比较差异有显著性(P=0.02),而两组子宫内膜上皮部的Cx43表达未见明显差别(P>0.05)。结论体外受精-胚胎移植者妊娠失败可能与子宫内膜腔上皮整合素β_3表达降低、子宫内膜间质细胞Cx43表达升高有关。

烟碱对白细胞介素-1β诱导的培养牛脑微血管内皮细胞表达α_vβ_3整合素的增强作用

目的观察烟碱对牛脑微血管内皮细胞（Bovine cerebral microvascular endothelial cells,ＢＣＭＥＣ）表达αvβ3整合素 的影响。方法离体培养新生牛脑微血管内皮细胞；血细胞计数仪测定ＢＣＭＥＣ粘附大鼠血单核细胞（ＭＮ）的数目；应用 ＥＬＩＳＡ法检测ＢＣＭＥＣ对αvβ3整合素的表达量。结果高浓度烟碱（１０－５mol/L)单独作用于ＢＣＭＥＣ２h后，使ＢＣＭＥＣ 对 ＭＮ的粘附率从（１２．９＋０．４）％增至（１５．７＋０．６）％，且 ＢＣＭＥＣ也可表达少量的 αvβ３整合素；而当烟碱与ＢＣＭＥＣ作用２ ｈ后，再经白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）诱导４ｈ，烟碱可浓度依赖性（１０－７～１０－５mol/L）地增强ＩＬ－１β的诱导作用，增加ＢＣＭＥＣ 对ＭＮ的粘附率以及Ｅ－选择素的表达量；抗αvβ3整合素抗体（αβＡＩＡb）能显著阻断ＩＬ－１β诱导ＢＣＭＥＣ后对ＭＮ的粘 附率。结论烟碱具有增强ＩＬ－１β诱导的脑微血管内皮细胞表达αvβ３整合素的作用。

Galectin-3、整合素α_νβ_3蛋白在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨半乳糖凝集素-3（Galectin-3）、整合素ανβ3在脑胶质瘤细胞中的表达及意义。方法采用免疫组化法,检测5例正常脑组织及40例Ⅰ~Ⅳ级脑胶质瘤中的Galectin-3、整合素ανβ3蛋白表达,分析二者之间的关系。结果在正常脑组织中,Galectin-3、整合素ανβ3蛋白表达均呈阴性。脑胶质瘤患者的Galectin-3、整合素ανβ3蛋白表达主要在肿瘤细胞胞质及胞膜,Ⅰ、Ⅱ级脑胶质瘤的阳性表达率分别为39.13%、34.78%,阳性指数（LI）分别为（5.65±3.47）%、（5.35±3.46）%;Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤的阳性表达率分别为76.47%、82.35%,LI分别为（27.88±22.13）%、（23.53±17.56）%。Galectin-3、整合素ανβ3蛋白阳性表达率呈正相关（r=0.966,P〈0.05）。结论 Galectin-3、整合素ανβ3蛋白表达与脑胶质瘤的恶性程度及进展有关,检测二者表达有利于人脑胶质瘤恶性生物学行为的判断。

α_vβ_3整合素受体靶向性超顺磁性脂质体的建立及体外磁共振观察

目的合成以RGD短肽为亲和成分的靶向性超顺磁性长循环脂质体,并通过体外细胞学实验确定其受体靶向性,探讨其用于肿瘤受体成像的可能性。方法采用薄膜法分别合成表面连接和不连接RGD的靶向性和非靶向性长循环脂质体;以流式细胞分析及共聚焦激光扫描显微镜观察靶向对比剂对HUVEC细胞的特异性标记。结果①合成的超顺磁性脂质体粒径在150nm左右,具有较高的弛豫率;②靶向性对比剂对αvβ3整合素受体具有较高的特异性亲和力;可通过受体介导的内吞作用进入细胞内;③靶向对比剂与细胞结合后,可以明显降低细胞的信号。结论RGD—超顺磁性长循环脂质体具有较高的弛豫率,能与αvβ3整合素受体特异性结合,在靶点特异性浓聚,并能经MR扫描证实。

层粘连蛋白及其受体整合素β_3在子宫腺肌病内膜-肌层界面的表达及意义

目的探讨层粘连蛋白(LN)及其受体整合素β_3(integrin-β_3)在子宫腺肌病内膜-肌层界面(EMI)的表达及意义。方法收集2015年7月至2016年6月在我院因子宫腺肌病行全子宫切除的患者共40例为病例组,因CINⅢ行全子宫切除的患者20例为对照组,应用免疫组织化学和图像分析技术检测两组EMI组织中LN和integrin-β_3蛋白的表达,同时检测病例组子宫腺肌病病灶(adenomyosis lesion,AL)组织中LN和integrin-β_3蛋白的表达。结果 LN和integrin-β_3在病例组EMI组织中的表达为(8.22±2.76)PU和(17.79±5.11)PU,LN在病例组EMI组织中的表达明显低于对照组(P<0.05),而integrin-β_3的表达与对照组比较差异无统计学意义。LN和integrin-β_3在病例组AL组织中的表达为(5.12±0.88)PU和(13.58±4.08)PU,两者均明显低于病例组EMI组织中的表达(P<0.05)。LN和integrin-β_3在病例组EMI组织中的表达无明显相关性。结论 LN参与了子宫腺肌病的发病过程,而LN和integrin-β_3还可能与子宫腺肌病病灶增大扩散有关,影响子宫腺肌病的病程发展。

种植窗期人子宫内膜LIF及整合素ανβ_3的表达及其与胚胎种植成功率的关系

目的探讨白血病抑制因子(LIF)与整合素ανβ3(Integrinανβ3)在子宫内膜的表达及其与人胚胎种植的关系。方法对42例拟行体外授精-胚胎移植(IVF-ET)妇女在IVF-ET前1周期采用免疫组化SP法和组织学积分H-score法对LIF和整合素ανβ3在种植窗期子宫内膜中的表达进行定位和半定量分析。按IVF-ET后是否妊娠将42例不孕患者分为2组:妊娠组和非妊娠组。结果种植窗期LIF和整合素ανβ3免疫组化H-score积分妊娠组分别为1.58±0.41和1.67±0.18,与非妊娠组(1.32±0.32和1.39±0.26)相比,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论种植窗期子宫内膜LIF和整合素ανβ3的表达减弱,会降低IVF-ET周期中胚胎种植的成功率。种植窗期子宫内膜LIF和整合素ανβ3的表达强弱可作为预测IVF-ET是否成功的指标之一。

应用琼脂糖流动腔模型评价携αvβ3-整合素单抗超声微泡靶向血栓效能

目的体外评价携αvβ3-整合素单抗超声微泡(MBp)靶向血栓的黏附效能。方法将采用"亲和素-生物素"桥接法构建的MBp和同型对照微泡(MB)随机注入自制琼脂糖流动腔模型内,与人血栓孵育30min后,PBS液15cm/s流速不间断冲洗血栓,分别在冲洗血栓2﹑4﹑6﹑8﹑10min时行对比超声检查并测量声强度(VI)值。结果MBp孵育组血栓VI值较冲洗前减小了28%～66%,而对照MB孵育组血栓VI值减小了87%～94%。VI值在各时间点MBP组均较MB组大(P<0.05)。结论MBp具有较好的靶向结合血栓效能,靶向血栓黏附后能抵抗一定的剪切应力。体外模拟体内剪切应力血流环境评价MBp的靶向血栓黏附效能将有助于预测MBp应用于体内血栓超声分子成像的效果。

整合素-α2和-β3基因多态性与缺血性脑卒中的相关性研究

目的探讨整合素-α2(ITGA2)基因C807T和整合素-β3(ITGB3)基因T176C多态性与缺血性脑卒中的关系及其对血脂、脂蛋白水平的影响。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和DNA测序的方法检测265例缺血性脑卒中患者和280例对照组ITGA2和ITGB3的基因型;同时按常规方法测定血浆脂质、脂蛋白水平。结果缺血性脑卒中组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)水平明显高于对照组(P<0.05),ITGB3基因T176C多态性在缺血性脑卒中组和正常人群中的分布差异无显著性(P>0.05),而ITGA2基因C807T多态性在两组人群中的分布差异存在显著性(P<0.05),等位基因频率的相对风险分析发现,T等位基因携带者患缺血性脑卒中的风险是C等位基因的1.455倍(OR=1.455,95%CI:1.134-1.866),携带T等位基因的缺血性脑卒中个体血浆TC水平显著高于不携带者(P<0.05)。结论 ITGA2基因C807T多态性与缺血性脑卒中的发病具有相关性,其中T等位基因可能是缺血性脑卒中的遗传易感基因;ITGA2基因C807T多态性可能通过影响血脂水平而影响缺血性脑卒中的发生。

高尔基体基质蛋白130、14-3-3ζ、整合素α3在中、低分化胃癌组织的表达及意义

目的:检测高尔基体基质蛋白130(Golgi matrix protein 130,GM130)、14-3-3 zeta(14-3-3ζ)、整合素α3(integrin alpha3,Integrinα3)在正常胃组织和中、低分化胃癌组织中的表达,并由此探讨其与胃癌的关系。方法:运用免疫组织化学检测(strept avidin-biotin complex,SABC)法分别检测临床收集的84例胃癌患者的胃癌组织和正常胃组织(距癌肿边缘5 cm以上的胃组织)GM130、14-3-3ζ、Integrinα3的表达情况,并结合临床病理资料进行分析;用RT-PCR和Western blot分别检测42例胃癌(低分化胃癌24例,中分化胃癌18例)和42例正常胃组织GM130、14-3-3ζ、Integrinα3的m RNA和蛋白表达情况。结果:(1)GM1301、14-3-3ζ2、Integrinα33在胃癌组织中的表达阳性率分别为88.1%、90.5%、95.2%,明显高于上述各指标在正常胃组织上的阳性表达率(52.4%、27.4%、42.9%);低分化胃癌组上述3个指标的表达较中分化胃癌组高,且2组间差异有统计学意义(P1=0.000、P2=0.007、P3=0.000)。Spearman等级相关性分析显示,胃癌中GM130、14-3-3ζ、Integrinα3之间表达呈两两正相关(P<0.05)。(2)GM130、14-3-3ζ、Integrinα3的表达均与年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤直径、肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移无关(P>0.05);而与肿瘤病理组织学分级及临床分期有关(P<0.05)。(3)RT-PCR及Western blot结果显示GM130、14-3-3ζ、Integrinα3 m RNA和蛋白质的表达在胃癌组较正常胃组织组高,低分化胃癌组较中和分化胃癌组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GM130的异常表达可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用。

整合素β3与VEGFR-3在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨整合素β3、血管内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3)在胃癌发生、发展中的作用。方法用免疫组织化学SP法检测65份胃癌术后癌组织标本(观察组)中整合素β3、VEGFR-3表达[定量以淋巴管密度(LMVD)表示],并与20份距胃癌组织10 cm的正常胃黏膜组织标本(对照组)作对比。结果观察组整合素β3阳性表达率及LMVD均明显高于对照组(P均<0.01)。观察组整合素β3阳性表达者LMVD明显高于阴性表达者(t=4.30,P<0.01),整合素β3阳性表达与LMVD呈正相关(r=0.473,P<0.01)。结论整合素β3和VEGFR-3与胃癌的淋巴管形成及浸润转移密切相关,可作为胃癌预后综合性评估的有效指标。

携抗αvβ3-整合素单抗靶向微泡对肿瘤新生血管靶向效应的研究

目的探讨携抗αvβ3-整合素单抗靶向微泡对肿瘤新生血管的靶向效应。方法通过生物素桥接法制成携抗αvβ3-整合素单抗的靶向脂质微泡(MBa)、对照微泡携同型抗体脂质微泡(MBc);选取12只HepG2皮下移植瘤裸鼠模型(肿瘤组)和正常对照裸鼠(对照组),经尾静脉随机注射MBa、MBc和RGDfvV封闭10min后再注射MBa(Blocking+MBa),并行对比超声检查,测量声强度(VI)。分别取肿瘤组肿瘤组织和对照组正常骨骼肌组织行病理学和免疫组化检查。结果肿瘤组中MBa的VI值(17.43±3.30)U,较MBc的VI值(5.88±1.04)U增大近3倍,差异有统计学意义(P<0.01),应用RGDfvV封闭αvβ3-整合素后MBa的VI值降至(6.14±2.25)U,与MBc及对照组的各VI值比较差异均无统计学意义。免疫组化检查显示:肿瘤组织的新生血管内皮有大量αvβ3-整合素显色,可被RGDfvV封闭;而骨骼肌中仅有少量αvβ3-整合素显色。结论携抗αvβ3-整合素单抗的靶向微泡对肿瘤新生血管具有明显的靶向效应,有望用于肿瘤的诊断和疗效评估。

妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和整合素β 3(Integrin β 3)的表达

目的研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和整合素β3(Integrin β3)在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达,并探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系及两者的相关性。方法采用免疫组织化学染色(SP法)分别检测In-tegrinβ3、MMP-9在10例妊娠期高血压疾病患者及10例正常妊娠者胎盘组织中的表达。结果妊娠期高血压疾病组胎盘Integrinβ3表达明显高于正常妊娠组(P<0.01)。妊娠期高血压疾病组胎盘MMP-9表达明显低于正常妊娠组(P<0.01),且随病情的加重MMP-9的表达有下降趋势,有统计学意义(P<0.05)。结论本研究显示:与正常妊娠组比较妊娠期高血压疾病患者胎盘组织integrinβ3表达明显增加、MMP-9的表达明显减少,且随病情加重有减少趋势。表明integrinβ3、MMP-9可能参与妊娠期高血压疾病的发生和发展。

食管鳞状细胞癌中整合素α_3β_1及基质金属蛋白酶-7的表达及生物学意义

目的探讨整合素α3β1及基质金属蛋白酶-7(MMP-7)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及临床意义。方法收集湖北医药学院附属太和医院及湖北医药学院附属东风医院2000年1月～2005年7月ESCC病例135例为ESCC组,另随机抽取同期40例正常食管组织为对照组。采用免疫组化方法检测两组整合素α3β1、MMP-7的表达情况;采用Spearman法检验整合素α3β1和MMP-7表达的相关性。结果整合素α3β1、MMP-7在ESCC组中阳性表达率(82.96%、61.48%)均高于在对照组中的阳性表达率(12.50%、5.00%),差异均有高度统计学意义(均P<0.01);ESCC组中整合素α3β1的表达与MMP-7呈正相关(r=0.418,P<0.01)。结论整合素α3β1可以上调MMP-7的活性,两者的高表达与ESCC的发生发展密切相关。