整合膜蛋白2A与慢性粒细胞白血病耐药的相关性研究

目的:探索整合膜蛋白2A(ITM2A)在慢性粒细胞白血病(CML)耐药患者中的表达模式及临床意义。方法:采用qRT-PCR、Western blot、免疫细胞化学检测ITM2A在CML中的表达情况。为了解ITM2A可能介导的生物学效应,过表达ITM2A后流式细胞术检测CML细胞凋亡、细胞周期、髓系分化抗原表达变化。并初步探索其发挥生物学效应的潜在分子机制。结果:ITM2A在CML耐药患者骨髓中的表达明显低于敏感患者及健康供者(P<0.05);体外细胞实验成功构建CML耐药细胞株K562R,耐药株中ITM2A的表达明显低于敏感株(P<0.05);过表达K562R细胞中的ITM2A能够使K562R细胞对伊马替尼的敏感性增加(P<0.05),且阻滞细胞周期在G_(2)期,但不影响髓系分化。上调ITM2A能够使ERK信号通路的磷酸化水平降低(P<0.05)。结论:ITM2A在CML耐药患者中呈低表达,低表达ITM2A可能是CML对伊马替尼耐药的关键因子。

肠道EV71病毒感染与SCARB2受体结合miRNA生物信息学预测分析

目的应用生物信息学相关软件和技术预测分析靶向结合细胞表面肠道71型病毒(enterovirus 71,EV71)受体溶酶体整合膜蛋白2型(lysosomal integral membrane protein 2,SCARB2)的miRNA分子,为探索miRNA分子在EV71感染宿主细胞的机制研究提供理论基础。方法应用生物信息学网站软件miRWalk 2.0首先预测分析靶向结合于SCARB2的miRNA,对得到的miRNA进行验证评价,然后在GEO数据库中查找相关的miRNA差异表达芯片数据进行分析,寻找差异表达较高有意义的miRNA分子。结果通过预测分析能够与靶基因SCARB2结合的miRNA153个,同时运用R语言对在GEO数据库中检索到的芯片表达矩阵数据进行差异分析,得到1246个差异表达miRNA分子。其中与预测到的153个miRNA交集得到79个,上调的15个,miR-1827上调最显著;下调的10个,miR-182-5p和miR-125a-5p下调最显著,与靶基因的结合特异性也很好。结论miR-1827、miR-182-5p和miR-125a-5p能够特异性结合靶基因EV71病毒受体SCARB2,并且在EV71感染前后表达差异显著,可为临床提供诊疗依据。