文冠果壳苷对侧脑室注射Aβ_(1-42)致痴呆模型小鼠学习记忆障碍的改善作用

目的考察文冠果壳苷对侧脑室注射β-淀粉样蛋白1-42(amyloid beta peptide fragment 1-42,Aβ1-42)致痴呆小鼠模型学习记忆障碍的改善作用,并初步探讨其作用机制。方法通过Y迷宫和新物体辨别实验检测小鼠的学习记忆能力;使用分光光度计检测脑内丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、谷胱甘肽(glutathione,简称GSH)含量、谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽(glutathione oxidized,简称GSSG)的摩尔比值和总抗氧化能力(total anti-oxidative capacity,T-AOC)的变化。结果与Aβ1-42模型组比较,文冠果壳苷能显著提高Y迷宫实验中小鼠自发交替反应率;显著延长新物体辨别实验中新物体探索时间并提高优先指数。生化结果显示文冠果壳苷能够不同程度地降低Aβ模型小鼠脑内的MDA含量,增加GSH含量,提高GSH与GSSG的摩尔比值,提高T-AOC活性。结论文冠果壳苷对侧脑室注射Aβ1-42小鼠学习记忆障碍具有显著的改善作用,其作用机制可能与对抗自由基损伤,抑制脂质过氧化反应有关。

文冠果壳苷对侧脑室注射Aβ_(1-42)致小鼠学习记忆障碍的改善作用

目的研究文冠果壳苷对侧脑室注射β肽淀粉样蛋白1-4(2Aβ1-42)小鼠学习记忆障碍的改善作用,并初步探讨了其作用机制。方法通过避暗和水迷宫实验检测了小鼠的学习记忆能力;使用分光光度计检测小鼠大脑组织中乙酰胆碱酯酶(AchE)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性的变化。结果小鼠侧脑室注射凝聚态Aβ1-42显著降低了小鼠被动回避学习记忆能力及空间学习记忆能力(P<0.01),并且小鼠大脑AchE和ChAT活性显著降低(P均<0.05);而文冠果壳苷能够显著减少避暗错误次数,延长潜伏期(分别P<0.05、P<0.01);剂量依赖性地缩短水迷宫实验中小鼠到达安全台的游泳时间(分别P<0.05、P<0.01),不同程度地抑制Aβ1-42模型小鼠的AchE和ChAT活性的降低(P<0.05和<0.01)。结论文冠果壳苷对侧脑室注射Aβ1-42小鼠学习记忆障碍具有显著的改善作用,其作用机制可能与保护中枢胆碱能神经细胞,改善中枢胆碱能神经系统功能等有关。

正交试验优选文冠果壳中文冠果壳苷提取工艺

目的:优选文冠果壳苷提取工艺。方法:采用单因素试验结合正交试验,以出膏率和文冠果壳苷含量为指标,优选出合理的提取工艺。结果:文冠果壳粉末用7倍量70%乙醇回流提取2次,每次5h为最优提取工艺。结论:该工艺合理、稳定可行,可作为提取文冠果壳苷生产工艺的参考。

大孔吸附树脂分离纯化文冠果壳苷的工艺研究

目的考察利用大孔吸附树脂分离纯化文冠果果壳提取物中文冠果壳苷的生产工艺参数。方法采用HPLC法,以文冠果壳苷含量为指标,分别考察大孔吸附树脂类型、样品质量浓度、最大上样量、洗脱剂的体积分数、洗脱剂用量、洗脱剂流速、分离柱径高比等参数。结果分离的柱床径高比为1∶5,最佳上样质量浓度折算成生药量为200 g.L-1,每50.0 g大孔树脂上样量为50.0 mL样品液;洗脱工艺流程为:水洗至无色、体积分数为50%乙醇洗至无色、体积分数70%乙醇洗6至7个保留体积、体积分数95%乙醇冲柱;洗脱流速为每小时2个保留体积。结论大孔吸附树脂经济易得,可反复利用;操作简单,避免了采用其他分离方法时所要求的苛刻条件;分离性能稳定,重复性高。

文冠果壳苷提取、纯化工艺及其馏分抑菌活性的研究

以文冠果壳为试材,采用超声振荡的方法,研究了超声温度、超声功率、超声时间、料液比对文冠果壳粗提物提取率的影响,通过正交实验确定最佳提取工艺条件。依次通过硅胶H柱、ODS-A反相柱对总皂苷进行分离纯化,流动相分别为甲醇乙酸乙酯、甲醇水溶液,并选用3种细菌和2种真菌考察抑菌活性。结果表明:最佳提取工艺条件是超声温度70℃,超声功率180W,超声时间30min,经HPLC分析,料液比1∶25g·mL^(-1),提取率为17.26%,对提取率的影响顺序为料液比>超声时间>超声功率>超声温度。80%甲醇馏分的文冠果壳苷含量和纯度最高,该馏分对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌有抑制作用。该研究为文冠果壳苷的提取纯化工艺优化,抑菌活性的开发提供了理论基础。

文冠果壳苷诱导人恶性黑色素瘤A375.S2细胞的凋亡及机制

目的观察文冠果壳苷对人恶性黑色素瘤A375.S2细胞增殖抑制作用及诱导凋亡的机理。方法采用四甲基噻唑蓝法(MTT法)检测化合物对细胞的生长抑制作用,光学显微镜及荧光显微镜观察细胞形态学变化,免疫印迹法(Western blotting)检测p-p38、p38、核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)p65及核转录抑制因子-κB(nuclear factor kappa B inhibitor,I-κB)蛋白表达水平,检测细胞核内NF-κB p65表达水平。结果文冠果壳苷可浓度依赖性地抑制A375.S2细胞增殖,并优于5-氟尿嘧啶(5-FU);10μmol·L-1文冠果壳苷作用于A375.S2细胞,形态学观察发现明显的凋亡小体和核固缩;Western blotting检测发现文冠果壳苷可时间依赖性地降低p-p38、p38、NF-κB p65及I-κB的蛋白表达水平;文冠果壳苷抑制NF-κB p65自细胞浆到细胞核的转位。结论文冠果壳苷可能通过抑制NF-κB和p38的活化诱导人恶性黑色素瘤A375.S2细胞凋亡。

文冠果壳苷对大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤的改善作用及机制初探

目的考察文冠果壳苷对大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤的改善作用,并从改善突触功能的角度,探讨其作用机制。方法利用大脑中动脉阻塞法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,TTC染色法计算脑梗死面积,HE染色法观察海马CA1区神经细胞病理形态改变,透射电镜观察大脑皮层缺血半暗带区神经元及突触超微结构改变,Western blotting检测突触相关蛋白SYP、PSD95及GAP43的表达。结果文冠果壳苷显著改善模型大鼠神经功能缺失症状,减少脑梗死面积,改善海马CA1区神经细胞的病理改变,并改善脑缺血半暗带区神经元及突触超微结构的损伤,增加突触相关蛋白SYP、PSD95及GAP43的表达。结论文冠果壳苷可显著改善大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤,其机制可能与促进突触重塑和/或减轻突触结构与功能的损伤有关。

基于GEO数据库与网络药理学探讨文冠果壳苷抗阿尔兹海默症的作用机制

利用GEO数据挖掘技术、网络药理学和分子对接技术,深入探究文冠果壳苷在治疗阿尔兹海默症中的作用机制。方法 通过Pharmmaper、SEA数据平台获取文冠果壳苷的生物功能作用靶点;通过R软件limma包对GEO平台阿尔兹海默症数据集GSE138260进行差异基因筛选;构建文冠果壳苷作用靶点与疾病相关靶点韦恩图,筛选文冠果壳苷治疗阿尔兹海默症的潜在作用靶点;利用Cytoscape软件及STRING数据库构建“关键靶点-通路”网络图、蛋白相互作用(PPI)网络图;借助R语言对潜在靶点进行GO和KEGG富集分析;利用PyMOL软件对文冠果壳苷与核心靶点间进行分子对接。结果 共获得文冠果壳苷作用靶点228个,阿尔兹海默症基因芯片的差异基因4836个;通过韦恩图得到文冠果壳苷治疗阿尔兹海默症的潜在靶点50个;根据Dgree值大于中位数筛选出10个核心靶点;GO富集分析涉及57个生物过程、17个细胞组分、28个分子功能;KEGG富集分析得到33条相关信号通路;分子对接显示文冠果壳苷与9个核心靶点具有稳定的结合能力。结论 文冠果壳苷主要通过多靶点、多通路对阿尔兹海默症产生治疗效果。

文冠果壳苷大鼠体内绝对生物利用度和体外代谢研究

目的 采用LC-MS/MS测定大鼠血浆中文冠果壳苷的浓度,研究其在大鼠体内的口服绝对生物利用度和体外代谢行为。方法 大鼠分别灌胃文冠果壳苷40 mg·kg^(–1)和尾静脉注射文冠果壳苷2 mg·kg^(–1)后,不同时间点采集血样。采用LC-MS/MS分析方法测定大鼠血浆中文冠果壳苷的含量,运用DAS 3.3.2软件计算相关的药动学参数,并通过肠道菌群和肝S9体外孵化试验研究文冠果壳苷的代谢行为。结果 应用于经胃和静脉给药的文冠果壳苷线性浓度范围分别为1.56~100μg·L^(–1)和200~40 000μg·L^(–1),专属性、精密度、准确度、基质效应、提取回收率以及稳定性均符合生物样本分析要求。灌胃给药后大鼠血浆中文冠果壳苷的ρ_(max)、AUC_(0-t)分别为(38.33±33.21)μg·L^(–1)和(100.77±28.85)μg·h·L^(–1);静注给药后大鼠血浆中文冠果壳苷的ρ_(max)、AUC_(0-t)分别为(24 428.01±10 386.18)μg·L^(–1)和(17 355.24±10 498.71)μg·h·L^(–1);文冠果壳苷在大鼠体内的绝对生物利用度为0.028%。与孵化前样品相比,肠道菌群培养48 h和肝S9培养2 h后,文冠果壳苷分别降解为孵化前的90.7%和99.3%。结论 建立的LC-MS/MS分析方法可应用于文冠果壳苷在大鼠体内的药动学研究。文冠果壳苷在大鼠体内的口服绝对生物利用度仅为0.028%,这可能是由于极低的胃肠道吸收引起的。

文冠果果壳化学成分与生物活性研究进展

通过国内外文献调研显示,文冠果果壳中的化学成分主要有三萜、多酚(包括黄酮、酚酸、香豆素等)、甾醇、生物碱等。文冠果果壳的生物活性主要包括改善学习记忆功能、抗癌、抑制酪氨酸酶、治疗心脑血管疾病、抗氧化、抗炎和抑制胰脂肪酶活性等。其中文冠果壳苷(xanthoceraside)是文冠果果壳中量最高的三萜皂苷类成分,具有多种显著的生物活性。文冠果果壳作为文冠果榨油等使用的废弃物,具有进一步开发利用的药用价值。