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武夷菌素产生菌Fosmid文库的构建及文库探针的获得 被引量:4
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作者 檀贝贝 孙蕾 +3 位作者 张克诚 杨振娟 武哲 张俊 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期116-121,共6页
以不吸水链霉菌武夷变种CK-15为材料,提取基因组DNA,经Sau3AI部分酶切后回收35—40kb之间的片段。连接到pCC1FOS载体上,经过包装转染涂布后构建得到了CK-15基因组的Fosmid文库,文库的滴度为8.8×10^5CFU/mL。随机挑取16个阳... 以不吸水链霉菌武夷变种CK-15为材料,提取基因组DNA,经Sau3AI部分酶切后回收35—40kb之间的片段。连接到pCC1FOS载体上,经过包装转染涂布后构建得到了CK-15基因组的Fosmid文库,文库的滴度为8.8×10^5CFU/mL。随机挑取16个阳性克隆,经EcoR I和Hind Ⅲ双酶切电泳分析,样品插入片段平均长度大于35kh,插入率为100%,符合构建文库的要求。根据多氧霉素、尼克霉素生物合成基因及大环内酯类聚酮合成酶基因(PKS)设计特异性引物,以基因组为模板进行PCR扩增,筛选特异性引物探针。结果用大环内酯类聚酮合成酶基因设计引物扩增出1693bp的片段经Blast比对其与大环内酯类抗生素生物合成基因相似性为95%以上。武夷菌素产生菌CK-15 Fosmid文库的构建及文库探针的获得,为武夷菌素生物合成基因的克隆奠定了基础。 展开更多
关键词 武夷菌素 基因组 FOSMID文库 文库探针
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从技术中心到NIH分子文库
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《生物技术世界》 2005年第02M期88-88,共1页
美国国立卫生研究院(NIH)最近制订出一项分子库协会的计划,作为其医学研究项目路径的一部分,来建立一个广泛的小分子化合物探针文库,对研究者免费开放。
关键词 美国国立卫生研究院 技术中心 高通量药物筛选 小分子化合物探针文库
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