斑叶阿若母花序中交替氧化酶(AOX)的分离

斑叶阿若母(Arrm,maculatum)开花时花序组织中线粒体通过交替氧化呼吸途径产生很高的热量。从花序线粒体中分离的蛋白质浓度约14.0 mg/ml。氧电极测定的线粒体交替氧化呼吸耗氧量为32μmoles/min。用渗透压法破碎线粒体,分离线粒体膜和基质,再用非离子去污剂dBC溶解线粒体膜上的交替氧化酶(AOX)。线粒体、线粒体膜和线粒体膜可溶蛋白都具有AOX活性。而线粒体基质和线粒体膜不可溶蛋白则没有AOX活性。用快速蛋白液相层析(FPLC)法纯化了AOX.其活性可达70-100%,在-70℃中保持6个月以上仍具有活性。银染显示纯化的AOX有4个不同分子量(30-32kD)的蛋白质斑点。双向电泳表明这四个蛋白质的等电点为pH 6.4至pH 7.4。分离出的斑叶阿若母AOX为测量其氨基酸序列和探索其空间结构创造了条件。