斑点免疫层析试验检测HBsAg

斑点免疫层析试验检测ＨＢｓＡｇ长春医学高等专科学校刘大程李雅琴肖洋吉林省职工医科大学李玉斌应用胶体金标记抗ＨＢｓＡｇＭｃＡｂ，以抗ＨＢｓＡｇ包被硝酸纤维素微孔波膜，建立斑点免疫层析试验（ＤＩＣＡ），快速测定ＨＢｓＡｇ。１材料与方法①金探针的制备用柠檬...

应用斑点免疫层析、免疫磁珠法快速分离大肠杆菌O_(157)∶H_7

目的 :探讨斑点免疫层析法 (DICA)和免疫磁珠法 (IMS)在分离大肠杆菌 O1 57∶ H7(E.Coli O1 57∶ H7)上的快速性和敏感性。方法 :先用 DICA法对腹泻病人、家禽 (畜 )粪便增菌液进行快速筛检 ,再用 IMS法对所有标本做进一步检测 ,并和直接分离法作对照。结果 :DICA法阳性率为 10 .34% (43/ 4 16 ) ,IMS法检出率 1.92 % (8/ 4 16 ) ,DICA法假阳性率为 8.4 1% (35 / 4 16 ) ,无一例 DICA法假阴性 ,而直接法检出率为 0 .2 4 % (1/ 4 16 ) ,IMS法比直接法检出率有显著性提高 (P<0 .0 5 )。结论 :两法结合应用于检测 E.Coli O1 57∶ H7具有快速、省时、灵敏度高等特点 ,是开展 E.Coli O1 57∶ H7病原学检索值得推广应用的方法。

应用快速斑点免疫结合试验检测泌尿生殖道沙眼衣原体

采用新型免疫层析技术 ,以特异性沙眼衣原体单克隆抗体的快速定性检测方法 ,对 6 34例性病门诊患者泌尿生殖道标本的沙眼衣原体检测。结果 ,总CT检出率 2 0 .0 % (12 7/ 6 34 ) ,男性CT检出率 17.8% (5 8/ 32 6 ) ,女性CT检出率 2 2 .4% (6 9/ 30 8)。提示泌尿生殖道的CT感染在本地区存在 ,且构成流行 ,应引起高度重视。

五种结核病实验室检测方法对结核病诊断价值的效果评价

目的评价涂片法、BACTECMGIT960快速培养法、改良罗氏培养法、荧光定量PCR法和斑点免疫层析法在结核病实验室快速诊断方法中的作用和地位。方法对1260例结核病患者（结核病组）和100例非结核病患者（非结核病组）的各类标本采用涂片法、快速培养法、改良罗氏培养法、荧光定量PCR法进行检测，同时分离患者外周血血清进行结核抗体检测，并对这五种检测方法的结果进行分析比较。结果五种实验室检测方法对结核病组阳性标本和非结核病组阴性标本的检测结果差异均有统计学意义（χ2=466．31,χ2=216．14，P均〈0．05）。对于结核病组的涂阳和涂阴标本，快速培养法和荧光定量PCR法检测的灵敏度及准确度均高于其他三种方法，而涂片法、改良罗氏培养法、快速培养法的特异性均为100．0％，高于荧光定量PCR法和斑点免疫层析法；快速培养法的阳性检出率均较改良罗氏培养法高，差异均有统计学意义（χ2=3387．00,χ2=4233．00，P均〈0．05），平均培养时间也较改良罗氏培养法短；但快速培养法与荧光定量PCR法的阳性检出率差异均无统计学意义（P均〉0．05）。结论BACTECMGIT960快速培养法和荧光定量PCR法是诊断结核病快速、有效的检测方法，其阳性检出率高，且能缩短培养时间，BACTECMGIT960快速检测系统还能进行快速药物敏感性试验，为结核病的快速诊断提供依据。

取材方法对男性不育患者衣原体检测的影响

目的:探讨男性不育患者CT感染更好的临床检测方法。方法:分别采用精液法、尿道拭子法、尿道拭子加尿沉渣法三种方法,运用用金标斑点免疫层析法进行CT抗原检测。结果:精液法阳性率为7.5%;尿道拭子法为5.0%;尿道拭子加尿沉渣法为25.0%。结论:尿道拭子加尿沉渣法检测的阳性率最高,可作为男性泌尿生殖道CT感染检测的首选方法。

解脲支原体六种检测方法结果比较

目的 :探讨 6种检测方法对解脲支原体的敏感性 ,为不同条件医疗机构提供选择较为合适检测的依据。方法 :通过六种不同解脲支原体检测方法对泌尿生殖道感染患者以及分别对男女性患者的检测结果比较。结果 :PCR杂交梳、PCR、培养检测解脲支原体无显著性差异 ;PCR杂交梳与DIFA、DIGCA、ELISA检测解脲支原体有显著差异性 ;PCR杂交梳、PCR、培养、DIFA、DIGCA、ELISA。结论 :显示PCR杂交梳、PCR、培养检测解脲支原体用于临床检测是比较好的方法 。

淋病奈瑟菌外膜Porin I蛋白基因的构建、表达和鉴定

目的构建、克隆淋病奈瑟菌外膜PorinI(PI)蛋白基因,并进行表达、纯化和鉴定。方法用PCR法克隆淋病奈瑟菌外膜PI蛋白基因,再与pGEX-4T-2载体连接成表达重组体pGEX-4T-2/PI;经大肠杆菌P2392表达后,用SDS-PAGE、切胶、电洗脱回收等方法纯化GST-PI融合蛋白;然后用特异性淋球菌外膜PI蛋白的单克隆抗体进行斑点免疫层析试验鉴定该蛋白。结果成功地获取了pGEX-4T-2/PI表达重组体,经诱导表达后能获得高表达的GST-PI融合蛋白,其相对分子质量为60000;斑点免疫层析试验显示其为淋病奈瑟菌外膜PI蛋白特异性的。结论本研究将有利于进一步研究淋病奈瑟菌外膜PI蛋白的功能。

肛肠部沙眼衣原体感染的临床实验室研究

目的探讨肛肠部沙眼衣原体(Ct)感染的实验室筛查和临床诊断,以提高临床检出率,减少误诊、误治的发生。方法采用涂片查包涵体、斑点免疫层析试验(DICA)和(或)PCR-荧光探针法,对53例疑似肛肠部Ct感染患者进行检测和临床分析。结果 53例肛肠部感染的分泌物Ct抗原阳性率为52.8%,总误诊率为75.0%;对2种采样方式选取的30例标本检测阳性率作一致性分析,两种采样方法的检测结果存在一致性(U=4.065,P<0.05);15例分泌物3种方法检测Ct,PCR与包涵体测定配对定性资料χ2检验分析,差异有统计学意义(P<0.05);PCR与免疫金标法测定配对,差异无统计学意义;免疫金标法较佳,包涵体法检出率最低。结论临床医师应重视肛肠部Ct感染的筛查和诊断,应用斑点免疫层析试验作检测是高效的选择,不要用染色涂片法检测包涵体检测肛肠部沙眼衣原体感染。

三种方法在不同状态低值血清HIV Ag/Ab筛查中的效果评价

目的通过对HIV Ag/Ab不同状态低值血清的筛查,评价化学发光法(CLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和斑点金免疫层析试验(DICA)的筛查效果。方法对18份HIV抗体确诊试验阳性血清样本分别用正常血清、脂血血清、溶血血清和黄疸血清进行1∶2、1∶4、1∶8和1∶16稀释,采用CLIA、ELISA和DICA对稀释后血清进行HIV Ag/Ab复孔检测。结果 CLIA检测脂血组、溶血组和黄疸组HIV Ag/Ab分别为(1.38+2.26)、(1.46+2.27)、和(1.53+2.34)S/CO,均高于正常组的(1.42+2.29)S/CO(P均<0.01)。脂血、溶血和黄疸对CLIA方法的干扰率分别为(4.71+8.15)%、(5.86+6.77)%和(10.44+8.72)%,黄疸组高于脂血组和溶血组(P均<0.01);ELISA检测溶血组和黄疸组HIV抗体分别为(11.63+22.12)和(9.76+16.86)S/CO,均高于正常组的(8.90+16.97)S/CO(P<0.01)。溶血和黄疸对ELISA干扰率分别为(28.08+23.80)和(10.10+32.45)%,均高于脂血组的(-4.00+15.18)%(P均<0.01);ELISA检测正常组、脂血组、溶血组和黄疸组HIV抗体低值血清的阳性率分别为94.44%、93.06%、94.44%和100.00%,均高于CLIA法的63.89%、66.67%、66.67%和70.83%以及DICA法(P均<0.01)。结论脂血、溶血和和黄疸能干扰CLIA和ELISA检测HIV Ag/Ab的效果,因此在检测该类样本出现低值阳性结果时,应重新采血并建议随访。