斑点金免疫渗滤试验快速检测抗甲型肝炎病毒IgM抗体

目的：建立胶体金免疫渗滤试验用于快速检测抗甲型肝炎ＩｇＭ抗体．方法：将甲型肝炎抗原固相在硝酸纤维薄膜上，用来捕获血清标本中的ＩｇＭ抗ＨＡＶ，通过胶体金标记抗人ＩｇＭ而显色．斑点色泽鲜艳，结果易于判断．整个试验过程仅需２～４ｍｉｎ．结果：用本法与ＥＬＩＳＡ对比检测血清标本２７９份，两法均阳性１４８份，两法均阴性１２５份，总符合率为９７．８％．阻断试验与２－ＭＥ破坏试验证实其结果是特异的．本试验不需任何仪器设备，不受类风湿因子影响．结论：本方法可用于甲型肝炎的早期诊断和流行病学监测．

斑点免疫金渗滤试验、生物素-链霉亲和素一步法与培养法检测淋球菌抗原的对比

目的 探讨斑点免疫金渗滤试验 (DIGFA)、生物素 链霉亲和素一步法及培养法检测淋球菌抗原的优缺点。方法 同时用DIGFA、生物素 链霉亲和素一步法及培养法检测临床疑诊淋病患者 110例泌尿生殖道标本中的淋球菌抗原 ,并相互比较。结果 DIGFA和生物素 链霉亲和素一步法的敏感性、特异性分别为 97.53 %、92 .85%和 96.2 9%、89.2 8%。配对计数资料 χ2 检验 ,两法分别与培养法比较差异均无显著性 (P >0 .0 5)。结论 检测淋球菌抗原的DIG FA、生物素 链霉亲和素一步法是一种简易、快速、敏感。

斑点金免疫渗滤试验检测不育者血清抗精子抗体

目的研究一种快速鉴定抗精子抗体的新方法的临床意义。方法用化学试剂提纯精子抗原 ,将其结合于硝酸纤维素膜上 ;以胶体金颗粒结合的羊抗人 lg G作为标记抗体 ,以斑点金免疫渗滤试验 (Dot- immunogoldfiltration assay,DIGFA)检测人血清抗精子抗体。结果抗原抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10 m in内即可用肉眼观察结果 ,在 2 89例临床血清标本的检测中 ,阳性率为 2 1% ,与酶联免疫吸附试验 (EL ISA )的结果基本相符。结论斑点金免疫渗滤试验可快速测定抗精子抗体 。

应用斑点金免疫渗滤试验快速同步检测抗HIV-1,HIV-2IgG抗体

应用斑点金免疫渗滤试验(dotimmunogoldfiltrationassay,DIGFA)建立了一种同步快速检测四种抗HIV-1/2IgG抗体的HIV诊断试纸。通过基因工程技术在大肠杆菌中表达了5种HIV抗原蛋白片段(P24,GP41,GP36,GP120V3,GP120C)。这5种抗原蛋白首先被固定在硝酸纤维素膜上,然后滴加待测血清,其中的病毒抗体通过免疫反应与抗原结合,再加胶体金标记的葡萄球菌蛋白A(SPA),待其渗过膜片后,洗涤,即可形成肉眼可见的红色斑点。用已确证的21份HIV阳性血清(其中包括1份HIV-1标准阳性血清和1份HIV-2标准阳性血清)和30份阴性血清进行了试验,结果表明该快速检测方法与ELISA方法无显著差异。该检测方法不需任何仪器,仅凭肉眼即可判定结果,整个检测过程不超过5分钟。与传统的的ELISA法相比,具有方便快速,成本低廉,应用范围广等优点。同时,此HIV快速诊断试纸可以同步检测并区分针对HIV-1和HIV-2感染的不同检测标志物(抗P24、GP41、GP120和GP36抗体),这对提高快速检测的灵敏度和准确性,以及对判断HIV感染者是否临近或已进入AIDS期有着较高的应用价值。

免疫胶体金渗滤斑点试验对抗精子抗体的检测

目的 :建立一种快速鉴定抗精子抗体的新方法。方法 :用化学试剂提纯精子抗原 ,将其结合于硝酸纤维素膜上 ;以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG作为标记抗体 ,建立检测人血清抗精子抗体的免疫胶体金渗滤斑点试验。结果 :抗原抗体通过渗滤在膜上反应 ,10min肉眼即可观察到结果 ,10 0例临床血清标本的检测结果 ,本法与ELISA法基本相符。结论 :免疫胶体金渗滤斑点试验可快速测定抗精子抗体 。

斑点金免疫渗滤试验同步检测抗斯氏狸殖吸虫IgM和IgG抗体的研究

目的寻求简便、快速、可靠的方法,用于斯氏狸殖吸虫病早期诊断及疗效考核。方法建立检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的斑点金免疫渗滤试验(DIGFA),并对48例患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究。结果斯氏狸殖吸虫病患者经有效药物治疗后3月、6月、1年、1.5年连续采血,经DIGFA检测连续观察的结果表明,IgM抗体出现较早,阴转较为明显和迅速,治疗后3月的阴转率就达47.9%(23/48),1年的阴转率可达89.6%(43/48);而IgG抗体则出现较晚,阴转缓慢,治疗后1.5年的阴转率仅为18.8%(9/48)。结论DIGFA为检测抗斯氏狸殖吸虫抗体的有效方法,检测IgM抗体可用于早期诊断及疗效考核,IgG抗体的检测主要用于回忆性诊断,却不能用来判断治愈或诊断再感染。

定量测定HCG的斑点金免疫渗滤试验的临床评价

目的 评价斑点金免疫渗滤试验 (DGIFA)定量测定血清和尿液人绒毛膜促性腺激素 (HCG)的可靠性。方法 分别用化学发光免疫分析法 (CLIA)和DGIFA定量测定HCG试剂盒 (HCG DOT)及DGIFA定量仪测定 4 0份血清样品的HCG含量 ,分别用胶体金免疫层析定性试验 (GICA)和HCG DOT及DGIFA定量仪测定2 70份尿液样品的HCG水平 ;作回收试验和不精密度试验。结果 CLIA和DGIFA定量测定血清样品HCG的相关性好 ;GICA检测阴性的 16 2份尿液样品用HCG DOT测定有 9份为背景红色所致的假阳性 ,1份为血尿导致的假阳性 ,另 2份为阳性 ;GICA检测阳性的 95份和可疑阳性的 13份尿液样品用HCG DOT测定 ,结果均为阳性 ;HCG DOT定量测定高、低浓度HCG血清样品和HCG尿液样品的变异系数 (CV)分别为 5 .38%、4 .13%和 4 .73%、6 .0 1% ;HCG DOT定量测定血清和尿液的HCG回收率分别为 94 .7%和 89.9%。结论 DGIFA定量测定尿液HCG ,对尿液GICA结果可疑者可在妊娠早期作出明确的判断 ;DGIFA定量检测血清和尿液HCG的精密度良好 ,回收率较高 ,适合门急诊应用。

用斑点金免疫渗滤试验检测牛结核分枝杆菌IgG抗体

用牛结核分枝杆菌制备牛结核菌糖脂抗原 ,并固定在NC膜上 ,将牛IgG单克隆抗体与胶体金连接。通过临床检验 ,在结核菌素皮肤试验 99例阳性牛中 ,斑点金免疫渗滤试验阳性 60例 ;皮肤试验 13 9例阴性牛中 ,金标阴性 111例。该法简便快速 。

金标免疫渗滤斑点试验在TORCH筛查中的应用

金标免疫渗滤斑点试验(Dot Immunogold Filtration Assay,DIGFA),是将免疫斑点渗滤试验与胶体金免疫标记相结合的方法.20世纪90年代初我国已开展了DIGFA的应用研究,并获得成功.由于其操作简单、快速、不需仪器设备,可单人份使用而被广泛采用 .本院于1999年1月至2001年4月共完成500例血清抗体检测,现报道如下.

生物素-亲合素斑点免疫金渗滤试验检测血清中登革病毒4型抗原

目的建立用斑点免疫金渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）检测血请中登革病毒抗原的方法。方法一株ＤＶ４型特异性单克隆抗体点加于硝酸纤维膜上，以捕获血清中的ＤＶ４抗原。借助黄病毒组反应性单克隆抗体、生物素化革抗鼠ＩｇＧ抗体、金标ＳＰＡ和金标亲合素，建立用ＤＩＧＦＡ检测血清中登革病毒抗原的方法。结果常规ＤＩＧＦＡ检测的敏感性高于病毒分离，而生物素一亲合素ＤＩＧＦＡ（ＢＡ－ＤＩＧＦＡ）的敏感性又高于常规的ＤＩＧＦＡ。常规ＤＩＧＦＡ可检测到５、０ＴＣＩＤ５０的病毒抗原，ＢＡ－ＤＩＧＦＡ可检测到４３ＴＣＩＤ５０的病毒抗原。结论作者建立的ＢＡ－ＤＩＧＦＡ简便、快速、敏感、特异，可用于快速诊断登革病毒４型感染。

斑点金免疫渗滤试验结核抗体检测临床应用的评价

目的 探讨斑点金免疫渗滤试验抗结核抗体检测在结核病的诊断和疗效观察中的应用价值。方法 对528例肺结核、324例非结核疾病、38例健康对照,分别进行结核分枝杆菌抗体斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)与痰涂片、L-J培养、TB-DNA检查对比,及观察100例DIGFA阳性患者的治疗后抗结核抗体动态变化。结果 对396例肺结核、243例非结核疾病、38例健康对照的阳性率分别为80.3%(318/396)、7.4%(18/243)、2.6%(1/38),临床敏感性为80.3%,特异性为93.1%,与痰涂片、L-J培养、TB-DNA检查的阳性率37.3%、39.1%、48.5%相比,有显著性差异。100例DIGFA阳性患者的治疗后抗结核抗体动态观察,开始治疗后每隔3个月抗结核抗体阳性人数逐渐下降。结论 抗结核抗体检测对结核病具有较高临床诊断价值,对肺结核的疗效监测有较高的实用价值。

斑点免疫金渗滤试验检测泌尿生殖道沙眼衣原体

泌尿生殖道沙眼衣原体(CT)的快速检测在性病防治中具有重要意义。本文以CT单克隆抗体作为标记抗体,采用胶体金标记及膜渗滤技术,

斑点金免疫渗滤法检测不孕症患者血清抗子宫内膜抗体

目的 :建立一种快速测定抗子宫内膜抗体 (antiendometrialantibody ,EMAb)的新方法。 方法 :采用经抗人血清抗体 Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原 (endometriumantigen ,EMAg) ,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体 ,根据免疫渗滤原理 ,建立斑点金免疫渗滤法 (Dot immunogoldfiltrationassay ,DIG FA)检测人血清EMAb。共检测 5 86份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验 (ELISA)作对比研究。结果 :纯化的人子宫内膜抗原与患者血清中特异性EMAb通过渗滤在硝酸纤维素膜上反应 ,8min内即可直接观察结果。在 5 86份血清的检测中 ,阳性率为 36 .8%,与ELISA的结果基本一致 (χ2 =3.45 ,P >0 .0 5 ) ,符合率 95 .0 %。特异性为94.7%,敏感性为 95 .6 %。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论 :DIGFA可快速测定EMAb ,具有推广使用的价值。

斑点金免疫渗滤法检测结核分枝杆菌抗体在肺结核诊断中的应用

目的:探讨利用斑点金免疫渗滤试验﹙DIFGA﹚检测结核分枝杆菌抗体对肺结核临床诊断的应用价值。方法:应用斑点金免疫渗滤法检测了正常人和各类肺部疾病患者共313例血清中结核分枝杆菌抗体,并与痰液涂片法、结核菌培养法和PCR法进行方法学比较。结果:结核分枝杆菌抗体检测肺结核患者阳性率为80.77%,非结核性肺病患者阳性率为7.64%,正常人阳性率为3.08%。结论:斑点金免疫渗滤法检测结核分枝杆菌抗体对肺结核的诊断敏感性高,特异性好,对肺结核诊断有较高的应用价值,并且操作简便、快速,与涂片法、培养法和PCR相比,有明显优势。

血清旋毛虫p49抗原IgG抗体的斑点金免疫渗滤法检测

目的 建立一种快速诊断人体旋毛虫感染的新途径。方法 以基因工程表达的猪旋毛虫融合蛋白p49/GST为抗原,将其结合于硝酸纤维素膜上,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG作为标记抗体,建立斑点金免疫渗滤法(Dot-immunogoldfiltration assay,DIGFA),检测人血清抗旋毛虫p49抗原IgG抗体。共检测76份旋毛虫患者血清并与酶联免疫吸附试验(ELISA)作对比研究。结果 抗原抗体通过渗滤在膜上反应,10min肉眼即可观察到结果,在76份患者血清的检测中,阳性率为98.68％,显著高于ELISA法的检出阳性率86.84％,(X2=7.94,P<0.01)。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论 以纯化的融合蛋白p49/GST为抗原建立的DIGFA可快速准确检测旋毛虫病人血清特异性旋毛虫IgG抗体,具有推广应用的价值。

斑点金免疫渗滤法检测谷氨酸脱羧酶抗体及临床应用

目的 探讨斑点金免疫渗滤法快速测定谷氨酸脱羧酶抗体在糖尿病患者中的临床应用价值。方法 采用斑点 金免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）检测８８例糖尿病患者和４０例正常人群的血清谷氨酸脱透酶抗体（ＧＡＤ－Ａｂ），并与酶联免疫吸附法 （ＥＬＩＳＡ）作方法学的比较。结累ＤＩＧＦＡ法检测１型和２型糖尿病患者的血清ＧＮ－Ａｂ阳性率分别为６１．３％和１９．３％， 有显著性差异（Ｐ＜０．０１），且均明显高于正常人群。与ＥＬＩＳＡ法比较，两种方法的检出率无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论 血清谷氢酸脱羧酶抗体在１型及有高度１型糖尿病倾向的人群中检出率较高，可作为糖尿病分型的依据，斑点金免疫渗 滤法快速、简便、可靠，有实用价值。