用斑点免疫结合法检测转化的烟草植株中的TMV—CP和CMV—CP

1982年,Hawkes 等人仿照分子生物学中点杂交(dot hybridization)的方法发展了斑点免疫结合测试技术(DIBA)用于检测单克隆抗体。本实验就 DIBA 应用在检测转基因烟草。烟草用发根农杆菌 Ri 质粒介导,将烟草花叶病病毒外壳蛋白基因(TMV—CP)和黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因(CMV—CP)导入烟草的叶片外植体中,通过对外植体的培养,得到愈伤组织,从愈伤组织进而获得了再生植株,对再生植株进行检测导入的外壳蛋白基因的表达量。

斑点免疫结合试验直接检测末梢血甲胎蛋白的研究和应用

目的：探讨建立一种方便使用、检测人末梢血甲胎蛋白（AFP）的方法。方法：用斑点免疫结合试验（DIBA）直接检测人末梢血（全血）AFP。结果：DIBA检测的条件在37℃或室温，孵育时间为10min×2时，敏感度达25μg／L。用此法和放射免疫法同时检测住院肝癌病人90例的末梢血和血清AFP，结果符合率为96.67％，以AFP50μg／L判为阴性，两结果的阳性符合率达100％。并用此法检测普查的正常人群1200例，检出末梢血AFP浓度为50～100ug／L有3例，与血清DIBA和RIA检测结果相符。结论：DIBA试剂盒检测人末梢血（全血）AFP，具有特异性强、敏感度高，与常规检测法有较好的符合性，而且具有简便、省料、快速、可直接检测末梢血（全血）等优点。

应用DIBA法检测侵染辣椒的TMV与CMV的研究

采用斑点免疫结合法(Dot Immunobinding Assay,DIBA)检测侵染辣椒的TMV与CMV均具有极强的专化性.在可检测的感染叶片的汁液稀释范围内,用TMV与CMV的抗血清分别交叉检测CMV与TMV,均未出现阳性反应.检测感染叶片粗汁液的最高稀释度TMV为1:5 120;CMV为1:2560.利用3种不同封闭系统[TBST,TBST+3%牛血清白蛋白(3%BAs),TBST+3%酪蛋白(3%Casein)]检测,比较结果表明;采用TBST+3%BAS与TBST+3%Casein封闭效果较好:与免疫电镜(ISEM)检测TMV与CMV相比较,DIBA敏感性分别高出15与7倍.