酶联免疫斑点检测和结核菌素试验在初治肺结核中的辅助诊断价值

目的比较酶联免疫斑点检测(ELISPOT)和结核菌素试验(TST),探讨ELISPOT在初治肺结核中的辅助诊断价值。方法选取初治肺结核123例和非结核疾病病例102例作为结核组和对照组,应用6kD早期分泌靶向抗原/10kD培养滤过蛋白融合蛋白(ESAT-6/CFP-10)作为抗原对受试者外周血单个核细胞进行ELISPOT(即ESAT-6/CFP-10-ELISPOT),检测斑点形成细胞(SFCs)的数量;同时对受试者行TST。结果结核组ESAT-6/CFP-10-ELISPOT形成的SFCs数显著高于对照组(P=0.000)。结核组中ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的敏感度91.1%(111/123)、特异度80.4%(82/102)、阳性似然比4.60、阴性似然比0.12、阳性预测值0.85、阴性预测值0.87,TST的敏感度65.6%(59/90)、特异度45.1%(46/102)、阳性似然比1.31、阴性似然比0.76、阳性预测值0.51、阴性预测值0.60。ESAT-6/CFP-10-ELIS-POT的敏感度和特异度显著高于TST(均P=0.000)。菌阳肺结核组和菌阴肺结核组间ESAT-6/CFP-10-ELISPOT形成SFCs数量差异无显著性(P=0.166),两组ESAT-6/CFP-10-ELISPOT的敏感度分别为91.8%(67/73)和88.0%(44/50),二者比较差异无显著性(P=0.448)。结论ESAT-6/CFP-10-ELISPOT有可能作为辅助诊断初治肺结核的较为准确方法,并为菌阴肺结核提供一定的诊断依据,但诊断的特异度可能受结核潜伏感染影响。TST对初治肺结核的诊断价值较小。

酶联免疫斑点试验检测技术在血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性结核病诊断中的应用

目的评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测外周血中结核分枝杆菌抗原特异性γ干扰素水平,在诊断免疫功能低下的血液病合并痰涂片抗酸杆菌阴性的结核病患者时的应用价值。方法采用以结核分枝杆菌特异性重组ESAT-6和CFP-10融合蛋白为刺激抗原的ELISPOT检测技术,分析了51例发热的血液病怀疑合并痰涂片抗酸杆菌阴性结核病患者的外周血,作能分泌结核特异的γ干扰素的T淋巴细胞测定,以传统的诊断方法为对照。结果确诊血液病合并结核病24例,排除活动性结核病27例;ELISPOT的灵敏度为73.6%,高于PPD皮肤试验的54.5%(P<0.05),高于抗结核抗体试验的37.5%(P<0.01);准确度82.6%高于抗结核抗体的62.5%(P<0.05),高于PPD的77.77%;特异度88.88%,与抗结核抗体检测(87.5%)及PPD(93.75%)相似;ELISPOT与抗结核抗体、PPD试验结果联合分析,其诊断率为79.2%。此外,ELISPOT检测结果与性别、年龄、结核病史、抗结核抗体、机体免疫状态、外周血淋巴细胞数等影响因素之间的相关性进行了初步探讨。结论ELISPOT是血液病患者合并活动性结核的重要辅助诊断工具。

斑点免疫金渗滤试验检测淋球菌抗原的应用研究

目的 :建立一种简易快速的斑点免疫金渗滤试验 (DIGFA)用于检测淋球菌抗原。方法 :用抗淋球菌单克隆抗体为包被抗体 ,以胶体金标记兔抗淋球菌IgG作探针 ,制成DIGFA反应盒。结果 :该反应盒特异性强 ,与脑膜炎球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、大肠杆菌等无交叉反应 ,淋球菌抗原最低检出量为 63 .0 0ng/ml。经 5 1例临床分离株测定 ,敏感性为 98.0 4% ,特异性 1 0 0 %。 结论 :检测淋球菌抗原的DIGFA是一种简易快速、敏感、特异的方法。

结核T细胞酶联免疫斑点试验诊断结核感染的临床应用

目的探讨结核T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)诊断结核感染的临床应用价值。方法选择结核分枝杆菌感染者103例及非结核病对照者30例,用酶联免疫斑点试验检测外周血单个核细胞经结核特异性蛋白6KD早期分泌靶向抗原,以及培养滤液蛋白10刺激产生γ-干扰素的T淋巴细胞数,并与血清抗结核抗体、结核菌素皮肤试验结果比较。结果 T-SPOT.TB诊断结核感染的敏感性和特异性为95.15%、93.33%;阳性预则值和阴性预测值为98.00%、84.85%;阳性似然比和阴性似然比为14.27%、0.05%,均优于血清抗结核抗体、结核菌素皮肤试验(P<0.01),但方法间一致性较弱(Kappa<0.40,P<0.001),差异有统计学意义。结论 T-SPOT.TB检测在结核分枝杆菌(MTB)感染的筛查,快速早期辅助结核病诊断和排除感染方面意义重大。

斑点金免疫渗滤试验快速检测抗甲型肝炎病毒IgM抗体

目的：建立胶体金免疫渗滤试验用于快速检测抗甲型肝炎ＩｇＭ抗体．方法：将甲型肝炎抗原固相在硝酸纤维薄膜上，用来捕获血清标本中的ＩｇＭ抗ＨＡＶ，通过胶体金标记抗人ＩｇＭ而显色．斑点色泽鲜艳，结果易于判断．整个试验过程仅需２～４ｍｉｎ．结果：用本法与ＥＬＩＳＡ对比检测血清标本２７９份，两法均阳性１４８份，两法均阴性１２５份，总符合率为９７．８％．阻断试验与２－ＭＥ破坏试验证实其结果是特异的．本试验不需任何仪器设备，不受类风湿因子影响．结论：本方法可用于甲型肝炎的早期诊断和流行病学监测．

酶联免疫斑点试验在骨关节结核中的辅助诊断价值

目的探讨评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在骨关节结核病中的辅助诊断价值。方法对骨关节结核病组30例和对照组21例患者,应用ELISPOT试验检测结核菌特异性6kD早期分泌靶向抗原(ESAT-6)和10kD培养滤过蛋白(CFP-10)刺激后外周血中释放γ-干扰素的特异性T细胞。同时对关节穿刺液或手术标本进行涂片、培养、聚合酶链反应(PCR)检测结核菌特异DNA以及病理检查诊断。结果骨关节结核病患者中ELISPOT检测敏感性为96.7%(29/30),特异性为76.2%(16/21),阳性预测值、阴性预测值和阳性似然比分别为85.3%、94.2%和2.86。抗酸杆菌涂片、结核菌培养、PCR和病理诊断的敏感性分别为23.3%(7/30),30.0%(9/30),46.7%(14/30)和93.3%(28/30)。结论 ELISPOT检测方法在骨关节结核病中具有一定的辅助诊断价值,其敏感性明显高于临床常规检测方法。

快速斑点免疫结合试验

斑点免疫结合试验(dot immunobinding assay,DIBA)是从ELISA 发展的较简便的标记免疫测定方法,其特点是以微孔薄膜作为固相载体,阳性结果在膜上出现着色斑点.近几年来利用微孔膜可作为滤膜的特性,创造了各种简便、快速的DIBA。

酶联免疫斑点试验检测技术(Elispot)在诊断结核性脑膜炎中的应用

目的评价酶联免疫斑点技术(Elispot)检测外周血结核杆菌抗原特异性r干扰素(IFN-r)水平在结核性脑膜脑炎中的应用价值。方法回顾性分析本院73例结核性脑膜脑炎患者及16例非结核性脑膜脑炎患者外周血Elispot结果,同时分析脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)水平、TB-DNA(PCR)结果,比较三种技术在诊断结核性脑膜炎的作用。结果 Elispot在诊断结核性脑膜脑炎中的敏感性及准确性高于脑脊液ADA、TB-DNA(PCR)检测,差异具有统计学意义(P<0.05);而特异性比较三者无明显差异(P>0.05)。结论 Elispot技术在结核性脑膜脑炎中具有良好的辅助诊断价值,其诊断价值优于脑脊液ADA、TB-DNA(PCR)检测。

酶联免疫斑点试验对活动性结核病的诊断价值

目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在活动性结核病中的辅助诊断价值。方法选取活动性结核病患者36例(结核病组)和非结核病患者(对照组)38例,收集受试者外周血单核细胞进行ELISPOT检测,同时对部分受试者进行结核菌素皮肤试验(TST)。结果结核病组中ELISPOT的灵敏度为91.7%(33/36),特异度为81.6%(31/38)。TST的灵敏度为48.1%(13/27),特异度为57.9%(22/38)。同时完成ELISPOT和TST检测的27例结核病患者中,ELISPOT阳性检出率为88.9%(24/27),明显高于TST检出率的48.1%(13/27,P=0.021);对照组中,ELISPOT阳性检出率为18.4%(7/38),明显低于TST检出率的42.1%(16/38,P<0.05)。结论 ELISPOT诊断活动性结核病的准确性较高,可作为结核病的辅助诊断方法。

酶联免疫斑点试验诊断结核性胸膜炎的临床应用价值

目的 探讨酶联免疫斑点试验（ELISPOT）诊断结核性胸膜炎的临床应用价值.方法 选择2011年8月～2012年8月武汉市医疗救治中心住院21例结核性胸膜炎患者（结核组）和18例肺癌胸膜转移患者（恶性肿瘤组）,利用ELISPOT法检测两组患者胸水对结核特异性抗原刺激产生反应,分泌γ干扰素的效应T淋巴细胞的阳性率.结果 ELISPOT结果显示结核组胸水中T淋巴细胞检测阳性率为85.7％（18/21）,明显高于恶性肿瘤组[16.7％（3/18）],差异有统计学意义（P＜0.05）.ELISPOT的敏感性与特异性分别为85.7％、83.3％.结论 ELISPOT灵敏性和特异性较高,对于结核性胸膜炎具有一定的临床诊断价值.

T细胞酶联免疫斑点试验在结核病诊断中的应用

目的:探讨结核感染T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病快速诊断的临床应用价值。方法:选取74例结核病患者(疾病组)和48例非结核病(对照组)对照,同时采用结核杆菌涂片、结核抗体(TB-Ab)、结核菌素试验(TB-PPD)及结核感染T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)进行检测,并比较四种检测方法对结核病的诊断价值。结果:T-SPOT.TB法的敏感性为75.68%、特异性为91.67%、阳性预测值为93.33%、阴性预测值为70.97%,均明显高于TB-PPD法的55.41%、56.25%、66.13%、45.00%和TB-Ab法的36.49%、68.75%、64.29%、41.25%,涂片染色镜检阳性率仅为9.46%。结论:T-SPOT.TB是诊断结核感染的快速、敏感的方法,在结核性疾病早期诊断中有重要价值。

应用酶联免疫斑点试验检测入伍新兵结核潜伏感染

目的 应用酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测入伍新兵结核潜伏感染情况，评价ELISPOT在检测结核潜伏感染中的价值。方法以结核菌素纯蛋白衍生物（PPD）皮肤试验为对照，应用ELISPOT试剂盒检测366例2009年驻京部队入伍新兵外周血中分泌结核菌抗原特异性y干扰素（IFN-y）的T淋巴细胞数。对PPD和ELISPOT均为阴性的入伍新兵接种卡介苗，10个月后再做PPD皮肤试验和ELISPOT，比较结果。结果366例入伍新兵中，PPD皮肤试验和ELISPOT阳性率分别为44．81％和31．69％。202例PPD皮肤试验阴性和164例PPD皮肤试验阳性者中，分别有53例（26．24％）和63例（38．41％）ELISPOT阳性，两者的一致率为57．92％（212／366），两者的检测结果差异具有统计学意义（X^2=14．34，P〈0．001）。在接种过卡介苗者中，PPD皮肤试验阳性率为58．53％（127／217），ELISPOT阳性率为29．1）3％（63／217），斑点形成细胞数为32．44±26．52；在未接种卡介苗者中，PPD皮肤试验阳性率为24．83％（37／149），ELISPOT阳性率为35．57％（53／149），斑点形成细胞数为41．81±30．48。110例PPD和ELISPOT均为阴性的人伍新兵接种卡介苗1（1个月后，PPD皮肤试验阳转率为78．18％，而ELISPOT检测均为阴性。结论ELISPOT具有较高的特异性和敏感性，能真实反映入伍新兵的结核潜伏感染情况，可推广应用。

酶联免疫斑点试验诊断结核的敏感性和特异性研究

应用T-SPOT·TB检测临床确诊的106例结核患者和24例健康体检者,与抗酸染色(AFB)、结核菌纯蛋白衍生物试验(PPD)、结核抗体检查结果进行比较分析。结果显示,T-SPOT.TB敏感性为93.4%,特异性为95.8%。AFB、PPD、结核抗体敏感性分别为36.8%、57.5%、39.6%,特异性分别为100.0%、83.3%、91.7%。T-SPOT.TB敏感性与三者相比,差异有统计学意义(P<0.01),特异性与三者相比,差异无统计学意义。表明酶联免疫斑点T-SPOT.TB实验检测结核敏感性强、特异性高,是快速诊断结核感染的有效手段。

斑点金免疫渗滤试验检测不育者血清抗精子抗体

目的研究一种快速鉴定抗精子抗体的新方法的临床意义。方法用化学试剂提纯精子抗原 ,将其结合于硝酸纤维素膜上 ;以胶体金颗粒结合的羊抗人 lg G作为标记抗体 ,以斑点金免疫渗滤试验 (Dot- immunogoldfiltration assay,DIGFA)检测人血清抗精子抗体。结果抗原抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10 m in内即可用肉眼观察结果 ,在 2 89例临床血清标本的检测中 ,阳性率为 2 1% ,与酶联免疫吸附试验 (EL ISA )的结果基本相符。结论斑点金免疫渗滤试验可快速测定抗精子抗体 。

斑点免疫金渗滤试验、生物素-链霉亲和素一步法与培养法检测淋球菌抗原的对比

目的 探讨斑点免疫金渗滤试验 (DIGFA)、生物素 链霉亲和素一步法及培养法检测淋球菌抗原的优缺点。方法 同时用DIGFA、生物素 链霉亲和素一步法及培养法检测临床疑诊淋病患者 110例泌尿生殖道标本中的淋球菌抗原 ,并相互比较。结果 DIGFA和生物素 链霉亲和素一步法的敏感性、特异性分别为 97.53 %、92 .85%和 96.2 9%、89.2 8%。配对计数资料 χ2 检验 ,两法分别与培养法比较差异均无显著性 (P >0 .0 5)。结论 检测淋球菌抗原的DIG FA、生物素 链霉亲和素一步法是一种简易、快速、敏感。

斑点免疫金银试验(Dot-IGSS)检测牛结核血清抗体的研究

建立了斑点免疫金银试验(Dot—IGSS)检测牛结核血清抗体的方法。应用此方法检测141头份结核变态反应阳性牛血清,其阳性检出率为64.5％(91/141),同时检测124头份变态反应阴性牛血清,其阳性检出率为14.5％(18/124)。经阻断试验、交叉试验及重复试验,证明了牛结核Dot—IGSS具有较好的特异性。

应用斑点酶联免疫吸附试验快速检测饲料中的沙门氏菌

选用硝酸纤维素(N C)膜作固相载体,建立检测沙门氏菌的斑点酶联免疫吸附试验诊断方法,检测成品饲料100份,对沙门氏菌的最低检出量为400个/m L,沙门氏菌阳性检出率43.00%(43/100),常规分离培养阳性检出率为38.00%(38/100),两者符合率为83.72%,差异不显著(P>0.05)。试验表明该方法简便、特异、快速、结果直观,便于在基层推广使用。

免疫胶体金渗滤斑点试验对抗精子抗体的检测

目的 :建立一种快速鉴定抗精子抗体的新方法。方法 :用化学试剂提纯精子抗原 ,将其结合于硝酸纤维素膜上 ;以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG作为标记抗体 ,建立检测人血清抗精子抗体的免疫胶体金渗滤斑点试验。结果 :抗原抗体通过渗滤在膜上反应 ,10min肉眼即可观察到结果 ,10 0例临床血清标本的检测结果 ,本法与ELISA法基本相符。结论 :免疫胶体金渗滤斑点试验可快速测定抗精子抗体 。