斑点免疫酶渗滤法检测分泌物中淋病奈瑟氏菌抗原

目的:建立分泌物中淋病奈瑟氏菌抗原快速斑点免疫酶渗滤法(DIEFA)。方法:应用DIEFA检测分泌物中淋病奈瑟氏菌抗原,并与常规淋病奈瑟氏菌培养及间接免疫荧光染色法进行比较研究。结果:DIEFA检测分泌物中淋病奈瑟氏菌抗原敏感性高于常规培养法及间接兔疫荧光染色法。整个检测过程在3h内完成。斑点色泽鲜艳,结果易于判断。结论:DIEFA敏感性高、特异性强、且简便、快速,具有实际应用价值。

斑点酶免疫渗滤法定量检测雌三醇的实验研究

目的 制备高特异性的抗雌三醇（E3）单克隆抗体（mAb）, 建立操作简便、敏感、快速适用于基层使用的E3检测方法。方法 采用活化酯法制备偶联物E3-HRP、E3-BSA、3-OVA。应用mAb技术制备抗E3的mAb; 以硝酸纤维素膜为固相载体, 抗E3 mAb为包被抗体, 建立竞争抑制模式的斑点酶免疫渗滤法。结果 筛选出5株可分泌特异性抗E3 mAb的杂交瘤细胞株。mAb效价为1×10^5～5×10^5, 亲和常数为5.1×10^8～5.2×10^9 L/mol。检测敏感度为2 ng/mL, 检测范围2～200 ng/mL。结论 建立了检测速度快、灵敏度高、应用方便的斑点酶免疫渗滤法。

斑点免疫酶渗滤法快速检测甲型流感病毒的临床应用

目的明确快速筛查甲型流感病毒的方法。方法收集2009年11月至2010年3月就诊于广州医学院第一附属医院发热门诊及中医科门诊40例流感样患者的鼻咽分泌物进行病毒检测，男18例，女22例，年龄5-62岁，平均年龄（31．3±13．2）岁。以2009年9月卫生部颁布的qRT-PCR方法检出甲型流感病毒作为诊断标准，比较2种快速病原检测法——斑点免疫酶渗滤法（DIEFA）和胶体金免疫层析法（GICA）对甲型流感病毒的检出率，以确定敏感性好、特异性高的方法为甲型流感病毒快速筛查法。结果40例标本中，qRT-PCR检出甲型流感病毒21例，阳性率为52．5％；DIEFA检出甲型流感病毒22例，检出率为55．0％；GICA检出甲型流感病毒12例，检出率为30．0％。与qRT-PCR比较，DIEFA的灵敏度、特异性和一致性分别是85．7％、78．9％和82．5％，而GICA的灵敏度、特异性和一致性分别是42．8％、84．2％和62．5％。DIEFA对甲型流感病毒检出的灵敏度明显优于GICA（P〈0．05）。结论DIEFA方法检测甲型流感病毒具有灵敏度高及特异性好的优势，适用于流感流行季节对甲型流感病毒的快速诊断和筛查。