斑点免疫金银染色法诊断囊虫病的研究

用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测40份确诊为囊虫病患者的血清。两种方法检测的阳性率均为100％,用Dot-IGSS检测,40份血清的平均滴度为1:27470,显著高于用Dot-ELISA检测的平均滴度1:9069(P<0.01)。检测50份义务献血员血清,假阳性率分别为2％和4％。10份日本血吸虫病人血清分别有1份和2份出现假阳性。与肝吸虫病人血清无交叉反应,与包虫病人血清有明显的交叉反应。

免疫金银染色法、斑点ELISA和斑点免疫金银染色法检测华支睾吸虫病人血清中抗体的研究

用免疫金银染色法(IGSS)、斑点ELISA和斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)三种方法,同时检测40份华支睾吸虫病人血清,阳性率分别为100％、90％和95％,检测40份正常人血清,阴性率分别为100％、97.5％和97.5％,显示三种方法均有较高的敏感性和特异性。

微量快速斑点免疫金银染色法检测系统性红斑狼疮患者血清抗双链DNA抗体的研究

目的 :建立一种便捷的检测系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清抗双链DNA抗体的方法。方法 :在斑点免疫金银染色法 (dot-immungold -silverstaining ,Dot-IGSS)的基础上 ,缩短反应和洗涤时间 ,建立微量快速斑点免疫金银染色法 (Microvolume -Fast -Dot-IGSS ,MFDot-IGSS)并与Dot-IGSS进行比较。结果 :用MF Dot-IGSS和Dot-IGSS同步检测 70份SLE患者血清抗双链DNA抗体 (A -dsDNA) ,阳性率分别 6 4 .3%和6 5 .7% ;检测其他自身免疫性疾病患者血清 30份阳性率均为 3.3% ;检测健康献血员血清 5 0份 ,阳性率均为2 .0 %。二种方法的敏感性和特异性均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :MFDot -IGSS检测SLE病人血清A-dsDNA的敏感性和特异性与Dot -IGSS相似 ,但便简快速 ,适用于门诊及基层医院。

斑点免疫金银染色法诊断华支睾吸虫病的研究

应用斑点免疫金银染色法检测35例华支睾吸虫病人血清中抗体,同时检测35例正常人血清。血清稀释度1:20、1:40和1:80,35例病人血清阳性率100％,正常人血清均为阴性。10例血吸虫病人血清检测无交叉反应,但10例肺吸虫病人血清中4例为阳性反应。

微量快速斑点免疫金银染色法检测囊尾蚴病患者血清抗体的研究

目的 建立一种便捷的囊尾蚴病免疫学诊断方法。方法 在斑点免疫金银染色法 (Dot-IGSS)的基础上 ,待检血清标本原倍使用 ,缩短抗原抗体及与金标二抗的作用时间 ,建立微量快速斑点免疫金银染色法 (RMDot-IGSS)。结果 RMDot-IGSS法检测囊尾蚴病患者血清 96份 ,阳性率为 10 0 % ;检测健康献血员血清 5 0份 ,特异性为 96 % ;检测华支睾吸虫病患者、卫氏并殖吸虫病患者、日本血吸虫病患者血清各 10份 ,均未出现交叉反应 ;但棘球蚴病患者血清 10份有明显的交叉反应。以上结果与Dot-IGSS法检测结果比较 ,无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 RMDot-IGSS法的敏感性和特异性与Dot-IGSS相似 ,但操作简便快速 。

斑点免疫金银染色检测日本血吸虫抗体影响因素的探讨

本文对不同封闭液及其稀释液、不同显影时间、不同方法保存的金标记抗体对斑点免疫金银染色检测日本血吸虫抗体实验结果的影响进行了探讨。认为以适当浓度的羊血清/BSA作封闭液,小牛血清作稀释液较好;20℃显影20min为宜;金标抗体以不加NaN_3—20℃保存较佳,有效期可达2年以上。

微量快速斑点免疫金银染色法检测系统性红斑狼疮患者血清肾小球基底膜抗体的研究

目的 建立一种便捷的检测系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清肾小球基底膜抗体 (GBA Ab)的方法。 方法 在斑点免疫金银染色 (dot immunogoldsilverstaining ,Dot IGSS)的基础上 ,待检血清标本原倍使用 ,缩短抗原与抗体及与金标二抗的作用时间 ,建立微量快速斑点免疫金银染色法 (microvolume fast dot IGSS ,MFDot ISGG )。 结果 用MFDot IGSS法和Dot IGSS法同时检测SLE患者血清 6 0份 ,GBM Ab阳性率分别为 6 0 %和 6 1.7% ;检测其他自身免疫性疾病患者血清 40份 ,GBM Ab阳性率分别为 2 .5 %和 2 .5 % ;检测健康献血员血清 40份 ,GBM Ab均为阴性。二种方法的敏感性和特异性差异均无显著意义 (P >0 .0 5 )。 结论 MFDot IGSS法检测SLE患者血清GBM Ab的敏感性和特异性与Dot IGSS法相似 ,但操作简便快速 。

快速斑点免疫金染色法与二种免疫金银染色法检测抗囊尾蚴抗体的比较研究

目的 建立敏感性高、特异性强 ,方法简便和经济实用的快速诊断囊尾蚴病的免疫学检测方法。方法将猪囊尾蚴液抗原点加于微孔滤膜 ,经预作用和封闭后 ,依次加入待检血清和金标记二抗 ,建立快速斑点免疫金染色法 (F -Dot-IGS)以检测囊尾蚴病患者血清抗体 ,同时用快速微量斑点免疫金银染色法 (RMDot-IGSS)和斑点免疫金银染色法 (Dot-IGSS)检测作为对照。结果 检测 4 0例囊尾蚴病患者血清抗体 ,阳性率 10 0 % ;检测 4 0例健康人血清均为阴性 ;除包虫病患者外 ,10例肝吸虫病患者、10例血吸虫病患者和 10例肺吸虫病患者血清未见交叉反应。结论 F -Dot-IGS敏感特异 ,快速简便 ,有较高的实用价值 。

斑点免疫金染色法与免疫金银染色法诊断日本血吸虫病的比较(英文)

目的 建立快速、敏感、特异性强 ,操作简便和经济实用的诊断日本血吸虫病的免疫学检测方法一快速斑点免疫金染色法 (R -Dot-IGS)。 方法 将日本血吸虫虫卵可溶性抗原点加于微孔滤膜 ,经预作用和封闭后 ,依次加入待检血清和金标记二抗 ,然后观察结果 ,并与快速微量斑点免疫金银染色法 (RM -Dot -TGSS)和斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)进行比较。 结果 用R -Dot -IGS、RM -Dot -IGSS和Dot -IGSS同步检测 5 5份日本血吸虫病患者血清 ,三种方法的阳性率分别为 98.18% (5 4/5 5 )、98.18% (5 4/5 5 )和 10 0 % ;检测 5 0例健康人血清均为阴性 ;检测 10例肝吸虫病人和 10例肺吸虫病人血清 ,仅有 1份肝吸虫病人血清在RM -Dot -IGSS反应为阳性。 结论 R -Dot -IGS检测过程仅为 15min不需银显影 ,具有敏感特异、快速简便实用的特点 ,适用于日本血吸虫病的现场流行病学调查和临床快速诊断。

免疫金银染色法用于检测系统红斑狼疮患者血清抗核抗体和抗双链DNA抗体

目的 探讨检测抗核抗体 (ANA)、抗双链DNA抗体 (A -dsDNA)对系统性红斑狼疮 (SLE)的诊断意义。方法 采用免疫金银染色法 (IGSS)和用斑点免疫金银染色法 (Dot-IGSS) ,检测SLE病人血清中ANA和A -dsD NA。结果 113例活动期SLE患者血清ANA阳性率 97.3% ,A -dsDNA阳性率 71.7% ;35例非活动期SLE患者血清ANA阳性率 74 .3% ,A -dsDNA阳性率 14 .3%。活动期ANA、A -dsDNA阳性率与非活动期比较均有显著性差异 (P <0 .0 1)。活动期ANA平均滴度明显高于非活动期 ,A -dsDNA阳性组肾损害明显高于A -dsDNA阴性者(P <0 .0 1)。结论 IGSS和Dot-IGSS检测ANA、A -dsDNA有高度特异性、敏感性和稳定性 ,较高滴度A -dsD

华支睾吸虫病免疫诊断及分子生物学研究进展

华支睾吸虫病是亚洲东部的一种感染人的寄生虫病 ,主要分布在中国、日本、韩国和越南北部。传统的病原学诊断方法存在着一些弊病 ,免疫诊断抗原的提纯以及免疫诊断方法的改进则提高了诊断的敏感性和特异性 ,为华支睾吸虫病的诊断提供了科学的辅助手段。本文对华支睾吸虫病的免疫诊断抗原。

四种抗原用于Dot-IGSS和Dot-ELISA诊断日本血吸虫病的比较

以日本血吸虫可溶性成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(JWU)、硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)和可溶性虫卵抗原(SEA),用斑点免疫金银染色试验(Dot-IGSS)和Dot-ELISA诊断日本血吸虫病.结果显示:Dot-IGSS法,4种抗原分别检测50例日本血吸虫病人血清,抗体检出率均达100.0%,50例正常人阴性符合率98.0%—100.0%,与肝吸虫病人的交叉反应率0%—2.0%(P>0.05),Dot-ELISA法、AWA、AW和SEA阳性符合率均为100.0%,JWU为90.0%,低于其它抗原(P<0.05),与正常人阴性符合率及肝吸虫病人交叉反应率分别为94.0%—100.0%及0%—6.0%.各抗原检出抗体滴度,Dot-IGSS均高于Dot-ELISA(P<0.05—0.01).抗原浓度在500.0μg/ml,两法抗体检出结果无差异(100.0%),至6.25μg/ml,酶标法检出率为0,而金标法仍为70.0%—80.0%(P<0.01).

3种方法检测结核污染牛场的比较

应用牛结核变态反应、牛结核斑点免疫金银染色法 ( Dot- IGSS)和 EL ISA 3种方法 ,同时检测结核污染牛场的4 98头份牛血清。结果发现 ,阳性检出率以变态反应为最高 ( 2 8.3% ) ,Dot- IGSS居中 ( 2 7.3% ) ,EL ISA最低 ( 17.2 % ) ;变态反应与 Dot- IGSS和 EL ISA的符合率较差 ,而 EL ISA和 Dot- IGSS具有较好的符合率 ;在变态反应阴性牛中 ,仍然检出了部分 Dot- IGSS和 EL ISA阳性牛。由此认为 ,先以变态反应检疫牛群 ,再随之实施抗体检测 。

快速微量Dot—IGSS检测日本血吸虫病人血清中抗体的研究

本文用日本血吸虫可溶性虫卵抗原点于微孔滤膜上,以快速微量斑点免疫金银染色法(Rapid microvolume Dot-IGSS,Rm Dot-IGSS)检测血吸虫病患者血清中相应抗体,并与Dot-IGSS相比较,检测血吸虫病人血清69份,两法阳性率均为100％。检测正常人血清50份,两法阴性率均为100％。检测华支睾吸虫病人血清10份,两法均未出现交叉反应。检测肺吸虫病人血清10份,Rm Dot-IGSS未出现交叉反应,Dot-IGSS有1例出现交叉反应。

Dot-IGSS和Dot-ELISA检测班氏微丝蚴血症者血清特异性抗体的比较研究

以马来丝虫成虫可溶性抗原作为靶抗原，采用斑点免疫金银染色（Dot－IGSS）和斑点酶联免疫吸附试验（Dot－ELISA）检测班氏微丝蚴血症者血清特异性抗丝虫抗体。Dot－IGSS和Dot－ELISA的检测阳性率分别为100％（50／50）和90％（45／50）。两法均为阳性反应的45份血清的滴度为1∶100－1∶2560．其平均滴度在Dot－IGSS为1∶184，在Dot－ELISA为1∶150。两法检测滴度相同者30例，Dot－IGSS滴度高于Dot－ELISA的13例，低于Dot－ELISA的2例。Dot－IGSS和Dot－ELISA所检测抗体滴度呈直线相关（r=0．8433）。与Dot－ELISA相比，Dot－IGSS具有操作简便、容易判断结果等优点，还具有更高的敏感性和特异性，且不使用酶反应底物。建议将Dot－IGSS作为丝虫病免疫学诊断和血清流行病学调查的方法。