斑片钳用玻璃微吸引电极的简易制作方法

<正> 合格的玻璃微吸引电极是成功地进行单离子通道电流记录的重要保证。Hamil可推荐的电极制作方法拉制出的电极质量高,但制作较复杂,要用高标准的燧石玻璃分二步或三步拉制而成,尖端部需涂硅酮树酯(sylgand)。我们经较长时间的摸索,采用硬质玻璃一次拉成合乎要求的电极,尖部不用涂料,成功地记录到单通道电流,且背景噪音不大。现介绍如下:

人参Rb＿2对心肌作用的单钙通道分析及ESR谱研究

应用斑片钳方法，在Ｗｉｓｔａｒ大鼠单个心室肌细胞上，观察人参单体Ｒｂ＿２对单钙通道活动的影响。用电子自旋共振法测定培养心肌细胞的自由基含量。证明Ｒｂ＿２对钙通道有阻滞作用；对黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶所致自由基含量增多显著抑制。

R_(b1)对B型钙通道的阻滞作用及其机理的单通道分析

在Wistar大鼠单个心室肌细胞上记录了B型钙通道的单通道活动。人参二醇组皂甙单体R_(b1)250μg/ml显著抑制B型钙单通道活动,其机制在于使其开放概率减少与开放时间缩短,而对通过此通道的离子流幅度无影响。

人参单体Rg_2对钙通道作用的单通道分析及电子自旋共振谱研究

在 Wistar 大鼠乳鼠心室肌单个细胞上,用连细胞电压钳法,观察人参三醇组皂甙单体 Rg_2 60μmol/L 对钙通道单通道活动的影响,并与钙通道阻滞剂异博定79μmol/L、钙通道激动剂 Bay K 8644 5μmol/L 对照,证明 Rg_2对钙通道有阻滞作用,其机制在于使钙通道的开放时间缩短、开放概率减少、关闭时间延长,而对 Ba^(2+)流幅值无明显影响。用电子自旋共振法(ESR)测定了培养心肌细胞的自由基含量,Rg_230μmol/L 能显著抑制黄嘌吟0.42nmol/L、黄嘌呤氧化酶5.3nmol/L 所致的自由基含量的增多。

单离子通道电流记录的微机实时操作与分析系统

研制本系统目的是提高单通道电流记录的效率与可靠性,精细分析实验结果,力求设备简化,操作容易。因微机兼有双脉冲程序刺激器、记忆示波器。数字记录系统等功能,所以硬件只需一台IBM PC微机和一台斑片钳放大器。软件用IBM编译BASIC与宏汇编编程,由四个独立模块组成。测试模块观察十亿欧姆封接过程;实验模块监视控制电位下的数据采集与存贮;再现模块将存盘的原始记录写入内存并呈现在屏幕上;分析模块按通道电流幅值鉴别通道类型,进而分析通道开放概率与动力学。

人参皂甙R_（b1）对在负膜电位开放的Ba^（2+）和Ca^（2+）通透Ca^（2+）通道的阻滞作用

人参皂甙R_(b1)有抗心律失常抑制心肌收缩力等Ca^(2+)通道阻滞样作用。我们应用PC技术在培养的Wistar大鼠单个心室肌细胞上,以细胞贴附式记录了人参皂甙R_(b1)对该型钙通道单通道活动的影响。同时以钙通道激动剂Bay K8644为对照,证实了人参皂甙R_(b1)250μg/ml显著抑制钙单通道活动,使钙通道的开放概率减少、平均开放时间缩短,平均关闭时间延长,而对通过钙通道的离子流幅度无影响。Bay K8644 5μmmol/L使开放概率增加、平均开放时间延长、平均关闭时间缩短。

黄芪总皂甙对单个钙离子通道活动的影响

采用连细胞电压钳方法，在培养的大鼠乳鼠单个心肌细胞上记录Ｌ、Ｔ、Ｂ三型钙通道的单通道活动。浸浴液中加入黄芪总皂甙２００μｇ·ｍＬ－１后，开放时间、关闭时间、开放概率、电流幅值四项钙通道指标无明显改变。说明黄芪总皂甙对钙通道无影响。

肾上腺素对大鼠心室肌细胞钙通道促进作用的单通道分析

目的：观察肾上腺素对大鼠心肌细胞钙通道作用机理。方法：使用斑片钳技术，在培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞上记录Ｔ、Ｌ、Ｂ三型钙通道的单通道电活动。结果：肾上腺素对心肌细胞钙通道Ｌ、Ｂ单通道开放时间延长，开放概率增加，平均关闭时间缩短（Ｐ值均小于０．０１），对流过钙通道的Ｃａ２＋流幅值无影响。肾上腺素对Ｔ型钙通道活动有促进作用趋势，但无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：肾上腺素对大鼠心肌细胞的作用和已知钙通道激动剂ＢＡＹ·Ｋ８６４４作用相似。

树状钙离子通道与海马长期抑郁

树状钙离子通道与海马长期抑郁ＣＨＲＩＳＴＩＥＢＥｅｔａｌ，Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ．１９９６；６（１）：１７～２３对长期抑制郁的突触效能，作者检验了不同来源的树状钙离子流的电位作用。经荧光影像与斑片钳试验确定了钙离子通道，关于电压依赖型话离子通道的位置...

人参二醇组与三醇组皂甙对大鼠心室肌细胞钙通道阻滞作用的单通道分析

分离Wistar大鼠乳鼠的心室肌细胞。向培养基中分别加入人参二醇组皂甙1500 μg·ml^(-1),人参三醇组皂甙300μg·ml^(-1),维拉帕米37.5 μg·ml^(-1)或BAY k 8644 5 μmol·L^(-1)。用斑片钳的连细胞电压钳法,记录加药前后L,T,B三型钙通道的单通道活动。确证了这两组人参皂甙的钙通道阻滞作用。