马蹄筋草坪害虫夜蛾的防治

斜纹夜蛾属鳞翅目、夜蛾科，分布于我国１０多个省市。斜纹夜蛾食性很杂，可危害９９科２９０多种植物，是草坪、花卉及园林植物的常见害虫。发生特点与危害特征斜纹夜蛾在长江中下游地区，一年可发生５代。但近几年来受厄尔尼诺现象的影响，冬季１１～１２月份，在南京城...

草莓主要病虫害防治方法

草莓病害约有25种,虫害约有15种,其中最常见的有病毒病、灰霉病、白粉病、蛇眼病以及蚜虫和螨类、斜纹夜蛾等。若不及时防治,会影响草莓的产量和质量。

甲型H5N1禽流感病毒血凝素在sf9昆虫细胞中的表达及其鉴定

目的利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达甲型H5N1禽流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)并对其进行鉴定。方法根据sf9昆虫细胞密码子偏好性,对A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)禽流感病毒的HA基因进行序列优化并全长合成。构建重组供体质粒pFastHA,经PCR及测序鉴定后,转化DH10Bac感受态细胞,获得重组穿梭质粒BacmidHA,用M13引物进行PCR鉴定。采用脂质体法转染sf9细胞,获得重组杆状病毒rBacHA。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、蛋白质印迹法以及间接免疫荧光法对rBacHA表达产物进行分析。结果供体质粒pFastHA经双酶切后产生了1条与预期大小相符的1 707 bp条带,序列测定证实目的基因无突变。穿梭质粒BacmidHA经PCR扩增,得到1条与预期大小相符的3 180 bp条带。SDS-PAGE结果显示,rBacHA表达产物的相对分子质量约为65 000。蛋白质印迹法分析表明,表达产物能与禽流感病毒阳性血清结合。在荧光显微镜下,感染rBacHA的sf9细胞呈现绿色荧光,提示HA基因得到表达。结论利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统成功制备了具有良好抗原性的重组HA蛋白。