仔猪早期断乳综合征的综合预防实验报告

本文就仔猪早期断乳综合征综合预防实验的方法、结果进行了报告。

断乳综合征23例

我科自1989年来，共诊治23例断乳综合征患儿，现报告如下：

仔猪断乳多系统衰竭综合征的防制

总结了仔猪断乳多系统衰竭综合征(PWMS)的发病情况,分析了其病原和病因,并提出了综合防制措施,以期能够指导生产实践。

断乳仔猪多系统衰竭综合征的病原学调查

此试验针对临床具有断乳仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)症状的猪只进行病原调查。2002年3月至2005年3月,在黑龙江省大庆、靠河寨和吉林省公主岭3个地区1～25周龄的猪群中,选择临床出现生长迟缓、停滞,呼吸困难、皮肤苍白和曾经具有此类症状并已死亡的猪只,采集病料共194份,通过聚合酶链反应(PCR)扩增Ⅱ型猪圆环病毒(PCV2)基因组的特异序列片断,扩增产物长度为900bp/470bp,检测病毒。结果发现,PCV2的总阳性率为21.1%(41/194),不同地区的检测结果不同,2002年,大庆某猪场发病猪中PCV2检测阳性率为5.1%(4/78),靠河寨某猪场发病猪中PCV2检测的阳性率为11.5%(9/78),2004年,公主岭某猪场发病猪中PCV2检测的阳性率为73.7%(28/38)。结果表明,临床发生PMWS症状的猪只,应用PCR法检测PCV2阳性率差别较大。病原学调查显示,在我国PMWS发生与多种因素相关,不仅仅是PCV2感染,PCV2感染与PMWS密切相关,但并不是出现PMWS症状的猪都发生PCV2感染,在未检测到PCV2的情况下,仍有PMWS发生。

断乳仔猪多系统衰竭综合征病原检测与分析

应用PCR技术,结合临床观察、病理解剖对福建省不同地区断乳多系统衰竭综合征(PMWS)发病猪群采集的病料进行多重病原检测与分离。结果表明50份病料中猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)阳性率分别为40%、26%、4%、0,不同地区各病原检出率差别不大。病毒性混合感染以PCV2和PRRSV为主,感染率为22%;PCV2与CFSV混合感染率为4%;PRRSV与CFSV混合感染率为4%;PCV2、CFSV、PRRSV三种病原混合感染率为4%。研究结果表明福建大部分地区猪群PMWS的发生是PCV2、PRRSV、CSFV等多种病原混合感染的结果,其主要病原为PCV2,该病的发生没有明显地域性。

猪2型圆环病毒ORF2基因在塞姆利基森林病毒RNA复制子衍生的新型真核表达载体中的表达

猪 2型圆环病毒 (porcinecircovirus 2 ,PCV2 )是断乳仔猪多系统衰竭综合征 (postweaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)的原发性病原。PCV2的ORF2编码病毒唯一的结构蛋白Cap。根据GenBank中公布的PCV2JXL株的序列设计一对引物 ,应用PCR方法从该毒株感染的PK 15细胞中扩增出完整的ORF2基因 ,将此基因克隆于本实验室此前构建的塞姆利基森林病毒 (SemlikiForestvirus,SFV)RNA复制子衍生的新型真核表达载体pSFV1CS中的BamHⅠ位点 ,获得重组质粒pSFV1CS Cap。用pSFV1CS Cap分别转染BHK 2 1细胞和 2 93T细胞 ,经间接免疫荧光试验检测表明 ,PCV2ORF2基因在转染细胞中得到表达。小鼠接种试验表明 。

猪圆环病毒病的流行现状与防控措施

猪圆环病毒病是近年来新发现的一种传染病,主要感染仔猪或青年猪。主要特征是先天性震颤和断奶后多系统衰竭综合征,死亡率比较高,给养猪业造成了严重的经济损失。目前,此病已经成为制约养猪业发展的重要疫病之一。本文对此病进行了详细的介绍,和广大的养殖户共同探讨。

某猪场混合感染猪瘟和猪圆环病毒2型的诊治

猪瘟（HC）是由猪瘟病毒（HCV）引起的一种高度接触性传染病,其临床表现有高病死率的急性、典型猪瘟,又有持续感染的温和型、非典型猪瘟,以及无名高热或隐性猪瘟,给养猪业造成了重大的经济损失.猪圆环病毒2型（PCV2）是近年来新发生的引起猪免疫抑制性疾病的病毒,主要引起断乳仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）.临床上多以断乳仔猪呼吸困难、贫血、腹泻、间质性肺炎、淋巴结肿大及进行性消瘦等为主要特征,并容易与其他疾病混合感染.2012年12月,某规模养猪场暴发了以保育猪腹泻、呼吸困难为主要特征的疫情,造成了大量小猪发病死亡.根据发病情况、临床症状、病理变化,并结合实验室检查,最后确诊该病为猪圆环病毒2型与猪瘟混合感染,经紧急接种猪瘟疫苗及加强综合防治等措施,3w后疫情得到有效控制,现将诊疗情况报道如下.

国内猪圆环病毒病疫苗的应用现状

猪圆环病毒病（Porcine Circoviral Disease， PCVD）是由猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type2，PCV2）引起的一系列疾病的总称［1］。我国自从2000年证实猪群中存在PCV2感染以来［2］，各地区已有陆续报道该病的发生，2002年由PCV2感染引起的断乳仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）在全国呈暴发流行［3］。据统计分析，近年来我国PCV2感染率呈逐年上升趋势，目前该病的流行范围已经波及全国各地，成为危害我国养猪生产的重要免疫抑制性疫病之一［4］。

ORF9基因缺失突变PCV2的构建与部分生物学特性

设计1对针对猪圆环病毒2型(PCV2)全基因组的特异性引物,从疑似断乳仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的病料中经PCR直接扩增出PCV2全基因组,再与载体pMD18-T Simple连接后构建重组质粒pMD18-T Simple-PCV2(命名为P-S-PCV2)。用ORF9特异的限制性内切酶Bpu10Ⅰ对P-S-PCV2进行酶切、补平连接反应,构建了ORF9基因缺失突变的重组质粒(命名为P-S-PCV2-J)。用SacⅡ对基因缺失突变的重组质粒进行酶切,获得的线性化基因突变PCV2基因组在体外进行自身环化,形成了相应缺失基因DNA(命名为PCV2-J)。用PCV2-J缺失突变株进行细胞转染、动物致病性和免疫原性、T淋巴细胞亚群的动态变化等部分生物学特性的研究。结果显示:PCV2-J转染IBRS-2细胞后,电镜观察可见病毒颗粒,PCR-RFLP检测有突变株生长;PCV2-J接种仔猪后无临床典型大体病变,PCR-RFLP检测淋巴结中有PCV2-J突变病毒的感染;PCV2-J免疫仔猪后的抗体水平在第2周开始上升,与对照组相比差异显著,CD3+下降,与对照组无差异,CD4+下降,第1周与对照组差异显著,CD8+与对照组差异不显著。结果表明,ORF9基因缺失突变的PCV2仍具有复制感染能力,但免疫原性减弱。

ORF2基因缺失的PCV2的构建与部分生物学特性

设计了1对特异性引物,从疑似PMWS(断乳仔猪多系统衰竭综合征)的病料中经PCR直接扩增出PCV2全基因组,再与载体pMD18-T Simple连接后形成重组质粒pMD18-T Simple-PCV2(命名为P-S-PCV2)。用ORF2特异的限制性内切酶EcoRⅠ对P-S-PCV2进行酶切、补平连接反应,构建了ORF2基因缺失突变的重组质粒(命名为P-S-PCV2-B)。用SacⅡ酶对基因缺失突变的重组质粒进行酶切,获得的线性化的基因突变PCV2基因组在体外进行自身环化,形成了相应的基因缺失病毒粒子(命名为PCV2-B)。用PCV2-B缺失突变株进行了细胞转染、动物致病性和免疫原性、T淋巴细胞亚群的动态变化等部分生物学特性的研究,结果显示,PCV2-B转染IBRS-2细胞后,电镜观察可见病毒颗粒,PCR-RFLP检测有突变株生长。PCV2-B接种仔猪后无临床典型大体病变,PCR-RFLP检测淋巴结中有PCV-B突变病毒的感染。PCV2-B免疫仔猪后抗体没有升高;CD3+和CD4+整体水平下降,第2周与对照组差异显著;CD8+与对照组差异不显著。结果表明,ORF2基因缺失突变的PCV2仍具有复制感染能力,免疫原性减弱,细胞免疫被部分激活。