shRNA SIRT3基因对乳腺癌细胞MCF-7侵袭能力的影响及机制研究

目的:探讨shRNA SIRT3基因对乳腺癌细胞MCF-7侵袭能力的影响及机制。方法:以人乳腺癌细胞系MCF-7细胞为实验对象。按照处理方法将乳腺癌MCF-7细胞分成3组,即空白对照组(不转染慢病毒的乳腺癌MCF-7细胞组)、阴性对照组(乳腺癌MCF-7细胞转染无序序列慢病毒载体)和shRNA干扰组(乳腺癌MCF-7细胞转染shRNA SIRT3序列慢病毒载体)。采用实时荧光定量PCR和Western blotting等方法检测SIRT3和凋亡相关因子caspase-3、caspase-9的表达水平;采用Transwell试剂盒检测细胞的侵袭能力。结果:shRNA干扰组SIRT3 mRNA相对表达量均明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.01),caspase-3 mRNA、caspase-9 mRNA相对表达量均明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。Western-blotting检测结果显示,shRNA干扰组SIRT3蛋白相对表达量均明显低于阴性对照组和空白对照组,caspase-3、caspase-9蛋白相对表达量均明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。Transwell实验结果显示,shRNA干扰组迁移细胞数均明显少于阴性对照组和空白对照组(P<0.01)。结论:shRNA-SIRT3的慢病毒干扰载体可促进人乳腺癌细胞的凋亡,抑制人乳腺癌细胞的侵袭。