斯氏油脂酵母降解百草枯的效率及影响因素

本文研究了温度、pH值、葡萄糖浓度对斯氏油脂酵母降解百草枯的影响。结果表明在温度为30℃，pH值6—7，葡萄糖浓度大于6％的培养条件下，斯氏油脂酵母降解百草枯的效率最高。斯氏油脂酵母在无氮培养基中的生长速度与百草枯的降解效率呈正相关。

斯氏油脂酵母细胞内油脂含量的快速检测方法研究

以斯氏油脂酵母为研究对象,探讨了利用苏丹黑B染色定量测定其胞内油脂含量的可行性,对苏丹黑B染色法测定胞内油脂含量的条件进行了优化。结果表明:斯氏油脂酵母经苏丹黑B染色处理后在600 nm处有最大吸收峰;在沸水浴中加热6 min和不添加盐酸的情况下,斯氏油脂酵母苏丹黑B染色效果最佳;建立了斯氏油脂酵母胞内油脂含量与吸光值A600的线性回归方程,线性关系显著(R2=0.992 9)。该方法与酸热-有机溶剂法测定结果相对误差在允许范围内,可用于快速测定斯氏油脂酵母胞内油脂含量。

基于酶标仪测定的斯氏油脂酵母发酵产油脂条件优化研究

以斯氏油脂酵母为研究对象,利用苏丹黑B染色和全自动酶标仪分光光度法测定细胞内油脂含量。通过监测发酵过程中苏丹黑B染色后的OD最大吸收峰值、菌体密度、发酵液还原糖含量的变化,探讨氮源、碳氮比和接种量对斯氏油脂酵母发酵产油脂量的影响。结果表明,发酵产油脂的最佳氮源为硫酸铵,最佳碳氮比为66∶1,最佳接种量为10%。

斯氏油脂酵母基因组Fosmid文库的构建及降解百草枯氮次级代谢相关基因的筛选

斯氏油脂酵母在以百草枯作为唯一氮源的培养基中能降解百草枯,但其机制尚不清楚。为分离鉴定斯氏油脂酵母中降解百草枯的相关基因,本研究通过构建斯氏油脂酵母的Fosmid文库,用百草枯作为筛选标记,成功筛选到7个百草枯抗性的大肠杆菌克隆。对阳性克隆插入片段进行了测序分析,并对真核基因进行注释。结果在插入片段中发现了nmrA基因及氮代谢相关基因,nmrA是真菌在限氮的条件下才激活的氮代谢相关基因,能调控激活下游的次级氮代谢基因家族,分解那些不常见的氮源。这提示斯氏油脂酵母可能也具有氮的次级代谢调控机制,在百草枯作为唯一氮源的环境下斯氏油脂酵母能激活次级氮代谢相关基因,分解代谢百草枯。