斯钙素蛋白1在大鼠燃煤型氟中毒脑损伤中的作用

目的观察燃煤型氟中毒大鼠脑组织中斯钙素蛋白（STC）1及钙离子的变化，探讨STCl在燃煤型氟中毒脑损伤机制中的作用。方法24只雄性SD大鼠按体质量随机分为4组：对照组、低、中、高氟组；对照组采用常规大鼠饲料（含氟1．3mg／kg），低、中、高氟组分别饲以含氟为20．0、40．0、60．0mg／kg的饲料，所有大鼠均饮用蒸馏水，自由饮食、饮水；180d后，采用免疫组化和RT—PCR方法，检测大鼠脑组织中STCl蛋白及基因的表达，并检测脑组织内钙离子含量。结果与对照组[（24．70±3．53）％]相比，低、中、高氟组大鼠STCl细胞阳性率[（48．10±2．11）％、（54．90±1．73）％、（79．30±3．71）％]均显著增高（P〈0．05），其中高氟组明显高于低、中氟组（P均〈0．05）。低、中、高组大鼠脑组织中STCl的mRNA表达（0．58±0．09、0．85±0．17、1．75±0．04）均高于对照组（0．37±0．12，P〈0．05），高氟组STClmRNA表达高于低、中氟组（P均〈0．05）。低、中、高氟组大鼠脑皮质钙离子浓度[（138．62±4．19）、（167．43±6．57）、（189．45±3．72）nmol／L]显著高于对照组[（101．47±9．46）nmol／L，P均〈0．05]，其中高氟组高于低、中氟组（尸均〈0．05），中氟组高于低氟组（P〈0．05）。结论STCl可能依靠调节钙离子平衡的功能参与了燃煤型氟中毒脑损伤机制。

斯钙素蛋白-1和缺氧诱导因子-1α的相互作用对肾癌细胞线粒体膜电势稳定的影响

目的研究斯钙素蛋白-1(STC-1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)相互作用后的调钙功能对肾癌细胞线粒体膜电势稳定的影响。方法构建高表达HIF-1α的肾癌细胞模型,采用不同浓度STC-1蛋白分别干预荷基因肾癌细胞和单纯肾癌细胞,MTT法检测细胞增殖,RT-PCR和ELISA法检测细胞内HIF-1α和STC-1的基因及蛋白表达情况,荧光探针检测细胞内Ca2+变化,荧光分光光度计检测线粒体膜电位(Δψm),紫外分光光度计检测线粒体通透性转换孔(mPTP)。结果 HIF-1α基因转染、STC-1干预及基因转染后再STC-1干预3种方式均可提高Δψm,降低细胞内Ca2+和mPTP水平,促进细胞增殖(P均<0.05),以上结果可随着STC-1浓度的增加而逐渐增强,但细胞增殖率的升高趋势却逐渐减缓。结论 HIF-1α可能通过促进STC-1表达,下调Ca2+水平,从而稳定线粒体膜电势来参与肾癌细胞的恶性增殖,但此作用亦因外源性STC-1对HIF-1α的抑制而逐渐减弱。

STC1及钙、磷离子在氟中毒致大鼠肾损伤中的作用

目的观察斯钙素蛋白1(STC1)及钙、磷离子在氟中毒大鼠肾组织中的变化,探讨STC1在氟中毒肾损伤中的作用。方法将24只雄性Sprague-Dawley大鼠分为4组:对照组(腹腔注射生理盐水)、低氟组(腹腔注射氟化钠5mg/kg)、中氟组(腹腔注射氟化钠10mg/kg)及高氟组(腹腔注射氟化钠20mg/kg),每48h注射1次,建模16周后处死大鼠。采用免疫组织化学法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测肾组织STC1蛋白及mRNA的表达水平,并检测肾组织内钙、磷离子的含量。结果 STC1蛋白主要定位于大鼠皮髓交界的近曲小管,染氟组大鼠肾组织STC1蛋白及mRNA表达水平均显著高于对照组(P<0.05),随着染氟浓度的增加,STC1的表达水平增加;染氟组大鼠肾组织中钙含量均比对照组增多(P<0.05);低氟组及高氟组大鼠肾组织磷含量明显低于对照组(P<0.05),而中氟组大鼠肾组织磷含量较低氟组及高氟组高(P<0.05),且与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 STC1可能参与了氟中毒大鼠的肾损伤,而该损伤机制可能与钙、磷离子代谢失衡有关。

缺氧对肾癌细胞STC1、HIF-1α及线粒体膜电势稳定影响的研究

目的检测缺氧条件下肾癌细胞斯钙素蛋白1(STC1)及线粒体膜电势稳定指标的变化,结合细胞增殖和Ca2+水平,初步探讨肾癌细胞可能的抗乏氧机制。方法分别使用50μmol/L、100μmol/L、150μmol/L的CoCl2干预细胞培养基构建化学性缺氧模型;MTT法检测细胞生长情况,荧光分光光度法检测细胞内Ca2+水平和线粒体膜电位(ΔΨm),紫外分光光度计测MPTP,RT-PCR检测STC1、HIF-1α的基因表达情况。结果与对照组相比,缺氧能显著抑制细胞增殖,促进细胞内Ca2+水平上升(P<0.05);缺氧可使MPTP开放度增加、?Ψm减低(P<0.05),且此时细胞内STC1、HIF-1α的基因表达升高(P<0.05);以上变化均随着缺氧程度的加剧而逐渐增大。结论缺氧条件下STC1、HIF-1α对Ca2+的负调控可能有利于肾癌细胞线粒体膜电势稳定,对肾癌细胞起保护作用。