湖南省新冠肺炎新版成人预防方干预新型冠状病毒肺炎的网络药理学研究

目的采用网络药理学及分子对接技术研究湖南省新冠肺炎新版成人预防方干预新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)的药物成分、作用靶点及潜在通路。方法利用TCMSP、BATMAN-TCM数据库筛选湖南省新冠肺炎新版成人预防方的活性成分及药物作用靶点,应用GeneCards等平台检索COVID-19的疾病靶点,采用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-成分-靶点”网络图,运行STRING数据库进行靶蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析,使用R语言数据包进行基因本体功能富集(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomics,KEGG)富集分析,预测其潜在机制,运用AutoDock Vina 1.5.6和PyMol 2.4.0软件对湖南省新冠肺炎新版成人预防方中的关键活性成分与PPI中的核心蛋白进行分子对接验证。结果经过筛选,得到湖南省新冠肺炎新版成人预防方的有效成分198种,涉及靶标175个,“药物-成分-靶点”图中筛选出94个交集基因。PPI网络显示,湖南省新冠肺炎新版成人预防方干预COVID-19主要涉及PTSG2、HSP90AA1、ESR1等核心蛋白,共有靶标的GO及KEGG富集分析结果主要涉及炎症-免疫调节、胞内信号转导、细胞凋亡、基因调控等多种生物学途径以及IL-17、TNF、HIF-1、AGE-RAGE等相关通路。分子对接验证提示槲皮素与核心靶蛋白MAPK3结合情况最佳,MAPK3为与关键化学成分结合活性最优的靶蛋白。结论湖南省新冠肺炎新版成人预防方中主要化学成分可能作用于MAPK3、MAPK1、TP53、AP-1、p38等多种核心靶蛋白,激活/抑制IL-17、TNF等信号通路,介导炎症-免疫调节等生物学过程,从而发挥干预COVID-19的作用。

儿童、老年人新型冠状病毒肺炎预防方剂组方思路探析——以湖南省新冠肺炎预防2号方为例

儿童、老年人是新型冠状病毒的易感人群,中医药为这类特殊人群的流行病预防发挥了关键作用。儿童、老年人预防方剂在组方时依据儿童稚阴稚阳,易于染邪,脾肺常虚,卫表不固和老年人多脏虚损,正气不足,虚实夹杂,易生变症的生理病理特点,在组方上具有组成精简、扶正祛邪、顾护脾胃的特点。以湖南省新冠肺炎预防2号方为例进行分析,为各地区特殊人群新型冠状病毒肺炎预防方剂组方提供思路。

湖南预防新冠肺炎1号方对人体细胞免疫和体液免疫的影响

目的:探讨湖南预防新冠肺炎1号方(预防1号方)对人体细胞免疫和体液免疫的影响。方法:选择在本院体检中心体检的健康人群398人,18~59岁为中青年组参与试验一,60岁以上为老年组参与试验二;两组试验均将受试者分为干预组和非干预组,干预组口服预防1号方4 d,非干预组未服药,检测用药前后外周血清CD4^+/CD8^+、IgA、IgM、IgG、C3、C4、IL-2、TNF及IFN-α的变化。结果:(1)试验一:干预组用药后IgA、IgM、IgG显著下降(P<0.05),而非干预组无明显变化;干预组及非干预组C3、C4均显著下降(P<0.05);干预组用药后CD4^+/CD8^+无明显变化,而非干预组CD4^+/CD8^+显著上升(P<0.05);非干预组和干预组IL-2均显著升高(P<0.05);两组用药后上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)试验二:非干预组和干预组用药后IgA、IgM、IgG、C3、C4、CD4^+/CD8^+均显著下降(P<0.05)。干预组用药后IL-2显著上升(P<0.05),IFN-α显著下降(P<0.05);非干预组用药后TNF显著上升(P<0.05)。两组用药后上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:湖南预防新冠肺炎1号方对年轻健康群体及老年健康人群的免疫功能有一定的调节作用,其中对年轻健康人群体液免疫的影响大于细胞免疫。

新冠肺炎预防2号方联合胸腺法新对晚期非小细胞肺癌化疗后免疫功能的影响

目的探讨新冠肺炎预防2号方联合胸腺法新对晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)化疗后免疫功能及生活质量的影响。方法选取2020年1月1日—2020年3月15日该院收治的晚期NSCLC患者为研究对象,根据随机数字表随机分为观察组和对照组,每组各50例。两组患者均采用多西他赛联合顺铂进行化疗,对照组另给予胸腺法新皮下注射,观察组在对照组基础上另加新冠肺炎预防2号方口服治疗。1个化疗周期为21 d,连续治疗3个周期。比较两组治疗前后T细胞亚群、体液免疫指标、淋巴细胞水平及生活质量改变情况。结果治疗后,观察组CD_(4)^(+)水平和CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)比值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组IgG、IgA、IgM水平以及淋巴细胞百分率、淋巴细胞绝对值无明显差异(P>0.05);观察组生活质量改善情况明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新冠肺炎预防2号方联合胸腺法新治疗晚期NSCLC患者,能增强化疗后机体细胞免疫功能,提高化疗后生活质量。

从“肺脾相关”谈新型冠状病毒肺炎中医药预防方组方策略

数千年来,中医药学通过对各类瘟疫的防治实践,形成了极具特色的防瘟抗疫理论,积累了丰富的临床经验和行之有效的防治方法,在瘟疫流行之时,施以预防方药对人群进行防护,已经成为中医防疫的重要措施,体现了中医药学“治未病”的预防学思想。新型冠状病毒肺炎COVID-19蔓延全球,形势严峻,但无论确诊病例还是死亡病例,中国都远远低于国外。我国此次抗疫成绩突出,与积极运用中医药抗疫息息相关,中医药防治新冠肺炎成为我国此次抗疫的亮点与特色,在新冠肺炎的防治中,中医药预防方已成为中医药介入抗疫工作的重要手段。本文立足中医学传统藏象理论中“肺脾相关”角度,从新冠肺炎中医概述、肺脾两脏在预防新冠肺炎发病中的作用、“肺脾相关”确立新冠肺炎预防方组方原则、“固本辟疫汤”预防寒湿疫的临床实践等方面进行阐释,对新冠肺炎预防方的组方策略进行解说并进行临床示例,以进一步展现中医药预防方在新冠肺炎防控中的重要作用。

火神山医院新冠肺炎预防经典方中12种主成分的含量测定

目的采用超高效液相色谱串联质谱法(UHPLC-MS/MS)测定火神山医院新冠肺炎预防经典方中12种主成分(黄芪甲苷、升麻苷、木犀草苷、金丝桃苷、毛蕊异黄酮苷、亥茅酚苷、刺芒柄花苷、川陈皮素、桔皮素、升麻素、毛蕊异黄酮、白术内酯-Ⅲ)的含量。方法以利血平为内标,色谱柱为ZORBAX SB-C_(18)(2.1 mm×100 mm,3.5μm,Agilent,USA),流动相A为0.1%甲酸乙腈溶液,流动相B为0.1%甲酸和10 mmol/L醋酸铵水溶液,梯度洗脱,流速0.3 ml/min,进样量5μl,柱温40℃,运行时间7.2 min。根据药典2015版对建立的方法进行方法学验证,并对3批预防经典方中12种主成分的含量进行测定。结果预防经典方中12种主成分在各自浓度范围内线性关系良好(r^(2)>0.98),重复性、稳定性、精密度、加样回收率等均符合检测要求。结论本法操作简单、可靠,适用于预防经典方中12种主成分的含量测定,为火神山医院新冠肺炎预防经典方的质量控制提供了科学依据。

基于系统药理学和分子对接解析湘NCP2方防治新冠肺炎的作用机制

目的基于系统药理学和分子对接解析湖南省预防新冠肺炎2号方(简称湘NCP2方)防治新冠肺炎的作用机制。方法基于SCIFINDER、TCM@Taiwan、TCMSP等药理学网络数据库检索湘NCP2方的化学成分和作用靶点;在Genecards和OMIM中检索SARS⁃CoV⁃2感染人体相关靶点,String 11.0等数据库收集靶点之间的蛋白质相互作用信息,Cytoscape3.7.2构建化合物⁃靶点网络,DAVID进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析;选取核心有效成分,Autodock Vina软件将其与SARS⁃CoV⁃23CL水解酶和ACE2进行分子对接。结果有效成分⁃作用靶点网络包含267个作用靶点和121种有效成分,共同调控的靶点为CASP3、FOS、CREB1、CCL2、IL10、BCL2L1、IFNG、CXCL10、DPP4。生物过程的富集主要涉及炎症、免疫等,细胞组分富集主要与外泌体等有关,分子功能主要与酶结合、药物反应和病毒受体活性有关。KEGG通路富集筛选得到6条信号通路(P<0.05),涉及TNF信号通路、T细胞受体信号传导途径、Toll样受体信号通路、B细胞受体信号传导途径、NF⁃κB信号通路等。核心有效成分与SARS⁃CoV⁃23CL水解酶和ACE2展现了良好的对接活性。结论湘NCP2方可通过炎症、免疫等生物过程和信号通路,以及作用SARS⁃CoV⁃23CL水解酶、ACE2等SARS⁃CoV⁃2相关蛋白来防治新冠肺炎。

基于“治未病”理论肺脾并重预防新型冠状病毒感染

目的基于中医“治未病”理论、肺脾并重原则,探讨自拟新冠肺炎预防方1、2、3、4号对新型冠状病毒肺炎的预防效果。方法无症状儿童32例及有症状儿童78例,分别予以服用新冠肺炎预防方1、2号6剂。无症状成人106例(无症状患者61例、医院发热门诊、全科医学门诊及援鄂医疗队等一线医护人员45例)及有症状成人47例,分别服用新冠肺炎预防方3、4号6剂,观察临床疗效。结果四组均未发现新冠肺炎确诊患者,其中有症状组临床症状改善明显。结论自拟新冠肺炎预防方1、2、3、4号早期预防新型冠状病毒肺炎作用明显,中医“治未病”理论肺脾并重值得普及,可以提高普通人群的机体抵抗力,缓解其不良情绪。