共有序列简并杂合寡核苷酸引物聚合酶链反应在呼吸道副黏病毒科病毒诊断中的应用

采用共有序列简并杂合寡核苷酸引物聚合酶链反应(CODEHOP PCR)体系和商品化RV12试剂盒对急性呼吸道感染患儿下呼吸道标本中的副黏病毒科病毒进行检测,比较CODEHOP PCR与RV12试剂盒检测结果的符合率和敏感度,观察CODEHOP PCR在临床呼吸道标本中对副黏病毒诊断的应用价值,进一步探讨具备检测已知呼吸道病毒和未知新病毒特点的CODEHOP PCR在呼吸道疾病谱和未知潜在呼吸道病毒诊断中的推广价值。采集2011年上海市儿童医院因急性呼吸道感染住院的患儿下呼吸道标本572份,分别采用2种方法对副黏病毒进行检测。CODEHOP PCR检测出阳性标本113例,阳性率为19.76%;RV12试剂盒检测出阳性标本102例,阳性率17.83%;2种方法检测符合率为85.39%。以10倍倍比稀释呼吸道合胞病毒A(RSVA)感染的细胞收获液,检测结果显示,CODEHOP PCR和RV12试剂盒检测下限分别为10-8和10-6。CODEHOP PCR具备简便、易操作和测序精度高等特点,适合疾病预防系统和临床检验科使用。该方法与一些新兴的高通量快速分子诊断技术结合,可提高检测灵敏度,具有高通量、快速检测和筛查未知新病毒的优势,在呼吸道病原体检测领域值得进一步优化和推广。

粤东地区毛细支气管炎病毒病原谱的变迁探究

目的探讨近年来粤东地区毛细支气管炎病毒病原学的构成现状。方法收集粤东地区2007年7月至2010年6月3年间毛细支气管炎患儿的咽拭子共508份，采用多重PCR方法检测呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒A型、流感病毒B型、副流感病毒1型、副流感病毒3型、鼻病毒、人类博卡病毒、人类偏肺病毒、WU多瘤病毒，共8种lO型病毒。结果①508例患儿中男374例（73．6％），女134例（26．4％）。②508例患儿中1岁以下年龄组393例（77．4％），病毒检出率为77．2％；1岁以上年龄组115例（22．6％），病毒检出率为22．8％。③2007年7至2008年6月病毒阳性率为47．5％（77／162），病毒检出第1位为呼吸道合胞病毒（33．7％），新发现呼吸道病毒（人类博卡病毒、人类偏肺病毒、wu多瘤病毒）占14．3％；2008年7月至2009年6月病毒阳性率为51．7％（124／240），病毒检出第1位为流感病毒A型（38．4％），新发现呼吸道病毒占6．4％；2009年7月至2010年6月病毒阳性率为45．3％（48／106），病毒检出第1位为鼻病毒（22．4％），新发现呼吸道病毒占20．9％。④3年间病毒混合感染率分别为20．8％、42．7％、27．1％。结论①毛细支气管炎患儿中男孩多见，1岁以下年龄组发病率及病毒检出率均高于1岁以上年龄组。②鼻病毒、流感病毒A型在不同年度是小儿毛细支气管炎首位病原体，既往研究中占首位的呼吸道合胞病毒有逐年下降趋势。③新发现呼吸道病毒在小儿毛细支气管炎病例中检出，并有逐年上升趋势。④毛细支气管炎病例中存在不同病毒混合感染的现象。