新型冠状病毒肺炎病例尿液SARS-CoV-2特异性IgM、IgG抗体结果分析

目的:探讨尿液严重急性呼吸综合征冠状病毒2特异性抗体免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白G(IgG)的临床应用价值。方法:选取30例新型冠状病毒肺炎康复期患者,于出院后第14日采集研究对象的血清及尿液标本,分别用磁微粒全自动化学发光免疫分析系统化学发光免疫分析仪(Axceed 260)和新型冠状病毒(2019-nCOV)IgM/IgG检测试剂盒(磁微粒化学发光法)检测SARS-CoV-2特异性IgM/IgG抗体,并选取10例无SARS-CoV-2接触史健康体检者作为对照。应用线性回归分析血清IgM与尿液IgM、血清IgG与尿液IgG抗体水平的相关性,并通过Logistic回归形成联合预测因子绘制ROC曲线并计算曲线下面积评估其诊断价值。结果:COVID-19康复期患者血清IgM与尿液IgM、血清IgG与尿液IgG抗体水平分别呈正相关性(均P<0.001);与健康对照组相比,COVID-19组尿液特异性IgM、IgG抗体水平高,其中尿液特异性IgM抗体差异有统计学意义(P=0.043)。通过Logistic回归形成联合预测因子绘制ROC曲线,结果显示尿液IgM、IgG抗体联合检测AUC为0.713。结论:尿液SARS-CoV-2 IgM、IgG抗体检测作为一种无创快速简便的新型检测方法,为COVID-19诊断提供了新思路。

新型冠状病毒肺炎与2型糖尿病炎性风暴特质的交互影响

目的 通过比较新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者伴或不伴2型并糖尿病(T2DM)的炎症指标、凝血功能及疾病转归的差异,讨论COVID-19合并2型糖尿病患者的炎性特质及其相互影响。方法 回顾性纳入2022年12月至2023年4月于太原市人民医院住院治疗确诊为COVID-19的轻型或普通型患者311例,其中T2DM组115例,选取同时段就诊的与之匹配的非糖尿病患者(对照组)196例。比较2组患者血细胞分析、炎症指标、凝血功能等实验室指标及核酸转阴时间、住院时间、是否使用激素等临床资料的差异。结果 T2DM组淋巴细胞计数水平低于对照组,中性粒细胞计数、C反应蛋白高于对照组(P<0.05);T2DM组D-二聚体显著升高(P<0.05);T2DM组核酸转阴时间及住院时间更长,使用激素者更多。结论 糖尿病是COVID-19发生的高危因素,新型冠状病毒感染增加了糖尿病患者的血糖调控难度。糖尿病合并COVID-19更容易发生“炎性风暴”,对患者的预后有严重的影响,住院时间更长,死亡风险大。

献浆员中新型冠状病毒SARS-CoV-2中和抗体检测分析

目的:静注人免疫球蛋白(IVIG)和新冠肺炎恢复者的血浆已被推荐用于重症新冠肺炎患者的治疗。因此,血浆中新型冠状病毒(SARS-CoV-2)中和抗体水平需要得以及时评价。本研究利用不需要在生物安全三级实验室操作的SARS-CoV-2假病毒中和抗体检测方法,建立了快速检测中和抗体的策略。方法:采用新型冠状病毒SARS-CoV-2假病毒,对1080份健康献血员血浆及26批次IVIG的SARSCoV-2中和抗体进行检测。初筛采用1∶30倍稀释检测;对初筛阳性(抑制率≥50%为阳性)的样本进行复试,复试采用1∶30、1∶90和1∶270三个梯度;对于复试阳性的样本进行中和特异性分析,进一步检测针对水疱性口炎病毒(VSV)、严重急性呼吸道综合征冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的中和活性。结果与结论:在1∶30倍稀释时,26批次IVIG的SARS-CoV-2中和抗体均为阴性,1080份献血员血浆中SARS-CoV-2中和抗体阳性率为0.6%(6/1180);对6份阳性血浆的特异性分析显示均为对VSV、SRAS-CoV或MESR-CoV假病毒的非特异中和作用。本研究表明该假病毒中和抗体检测方法和快速检测策略可以用于IVIG、健康献血员和感染者恢复期血浆中的中和抗体检测,发现IVIG针对SARS-CoV-2无特异的中和抗体活性,IVIG在临床重症治疗中发挥的是非病毒特异的辅助治疗作用。

新型冠状病毒Omicron I1566V突变位点MS2噬菌体病毒样颗粒的构建

目的构建新型冠状病毒Omicron I1566V突变位点MS2噬菌体病毒样颗粒。方法选取并合成带有6×His标签的MS2噬菌体的衣壳蛋白(CP)、成熟蛋白(A蛋白)及Omicron I1566V突变基因序列,插入pACYCDuet-1质粒构建重组载体,通过原核系统诱导表达目的蛋白,纯化重组蛋白后利用透射电镜对蛋白质进行物理表征,最后通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测病毒样颗粒的热稳定性及耐核酸酶水解能力。结果成功构建包含有6×His标签的CP、A蛋白和Omicron I1566V突变基因序列的重组载体,经限制性内切酶BamHⅠ和KpnⅠ酶切鉴定和测序验证,结果均与预期相符。经诱导并纯化后,通过电镜观察到了大小均匀、直径为23~28 nm的病毒样颗粒,该病毒样颗粒经核酸酶消化后可在37℃条件下稳定储存20 d以上。结论该研究成功利用MS2噬菌体的CP和A蛋白构建了Omicron I1566V突变位点病毒样颗粒,为该突变位点的RT-PCR检测体系提供了可靠的质量保障。

新型冠状病毒肺炎患者多类型样本SARS-CoV-2核酸检测在临床诊疗中的意义

目的探讨不同类型样本新冠核酸检测结果在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)临床诊治和疫情防控中的意义。方法选取2020年1月23日~2月22日延安大学附属医院确诊的5例COVID-19患者,采集不同部位标本进行核酸检测,并进行统计学分析。结果采集的123例标本严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测结果表明,咽拭子25例,阳性率44.0%(11/25);鼻拭子40例,阳性率25.0%(10/40);肛拭子40例,阳性率70.0%(28/40);18例血标本核酸检测均阴性,5例患者符合出院标准时粪便核酸检测均阳性。截止3月5日对5例患者出院后追踪发现,出院2周或更长时间粪便SARS-CoV-2核酸仍阳性。结论多样本新冠核酸检测对于新冠感染患者的确诊有重要价值;患者治愈出院后应加强随访、教育和复查,做好排泄物的管理,有利于巩固疫情防控效果,减少接触感染的发生。

黄芩苷对SARS-COV-2侵袭的抑制作用研究

目的在体外研究黄芩苷对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)入侵细胞过程的抑制作用。方法利用构建有荧光素酶报告基因的SARS-CoV-2 S蛋白假病毒系统,通过荧光素酶试剂盒检测加入黄芩苷和假病毒后Huh-7细胞中的荧光素表达变化,进而绘制病毒抑制曲线。结果黄芩苷能显著抑制Huh-7细胞的病毒感染率,黄芩苷和病毒提前共孵育组与直接加入组在不同浓度下的病毒抑制曲线并无显著差别,表明黄芩苷并不能与病毒直接结合,而是通过作用于病毒S蛋白介导的细胞融合过程产生抑制作用;黄芩苷在0.125 mg·mL^(-1)浓度时,对病毒的抑制率在4 h组显著降低,在0 h和2 h组并无显著差别,表明黄芩苷可能在病毒入侵细胞(非吸附)阶段产生抑制作用,且介导的入侵抑制阶段发生在4 h内。结论黄芩苷可能通过介导抑制SARS-CoV-2病毒S蛋白与细胞表面受体的融合过程,在非吸附阶段抑制病毒的入侵,发挥抗新冠病毒活性。

磷脂酶A_(2)与新型冠状病毒肺炎关系的研究新进展

新型冠状病毒肺炎是由严重急性呼吸综合征冠状病毒2感染引起的肺炎。自2019年12月以来,新型冠状病毒肺炎在世界范围内大流行,对全球公共卫生和经济构成严重威胁。磷脂酶A_(2)是一类分布广泛的酶家族,能催化水解磷脂产生一系列脂质介质,与许多重要的生理和病理过程相关联。最近研究显示,磷脂酶A2在新型冠状病毒肺炎的发生、发展中发挥了重要作用。本文就磷脂酶A_(2)与新型冠状病毒肺炎的相关机制及研究进展进行分析和介绍。

新型冠状病毒肺炎患者恢复期PBMC中SARSCoV-2中和抗体检测分析

目的分析新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者恢复期外周血单个核细胞(PBMC)中急性呼吸综合征冠状病毒-2(SARS-CoV-2)中和抗体的检测作用。方法回顾性分析40例COVID-19患者的临床资料,对其血浆进行假病毒中和实验,筛选具有中和效果患者的PBMC,再对其进行记忆B细胞筛选,并分析SARS-CoV-2中和抗体检测结果。结果此次筛选的中和抗体中获得5个中和效果较好以及亲和力高的抗体,为进一步检测阳性样本的中和作用是否为SARS-CoV-2特异性中和,对水疱性口炎病毒(VSV)、急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)进行检测。检测结果显示:编号为415、726、1151的样本阳性,于1︰30稀释度下,对于3种病毒具有微弱的抑制性,表明此中和为非特异性中和作用;编号130、642、1143的样品,对于2种病毒具有较弱的中和作用;采用1︰90、1︰270的梯度进行稀释时,所有样本检测结果均为阴性。结论COVID-19恢复期患者PBMC中SARS-CoV-2中和抗体检测结果显示,PBMC中具有特异的抗SARS-CoV-2作用,对于临床早期诊断及治疗此病可提供可靠依据。

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)与常见家养动物冠状病毒的同源性分析

冠状病毒(Coronaviruses,CoVs)是一类具有囊膜的单链RNA病毒,也是目前已知的基因组最大的RNA病毒,在分类上属于套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)[1]。该病毒可以引起动物呼吸道、消化道和神经系统疾病,主要感染人和脊椎动物,后者主要包括猪、牛、犬、猫、鼠、禽类和一些其他动物(含野生动物)等。冠状病毒科分为4个属,即α、β、γ和δ属[2-3]。其中,α属冠状病毒感染人、长翼蝠、猪、犬、猫等[4];β属冠状病毒感染人、猪、牛、马、鼠、家蝠等,人们熟知的引起严重急性呼吸综合征(Severe acute respiratory syndrome,SARS)的冠状病毒和引起中东呼吸综合征(Middle east respiratory syndrome,MERS)的相关病毒等[5]均属β属冠状病毒;γ属冠状病毒感染禽和白鲸2个种,其中最主要的是引起禽传染性支气管炎(Infectious brochitis,IB)[6];δ属冠状病毒感染猪、夜莺、文鸟等[7]。

SARS-CoV-2 IgG和IgM抗体在诊治新型冠状病毒肺炎的应用价值

目的探讨化学发光法检测SARS-CoV-2 IgM/IgG抗体在辅助诊疗新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)中的应用价值。方法将203例COVID-19确诊患者作为确诊组,158例其他科室的非COVID-19患者和50例正常献血者共208例作为对照组,采用化学发光的方法进行检测。结果SARS-CoV-2 IgG抗体检测的临床灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为85.7%、99.0%、98.8%、87.6%;SARS-CoV-2 IgM抗体检测的临床灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为66.5%、98.0%、97.1%、75.0%;SARS-CoV-2 IgG和IgM抗体联合检测的临床灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为89.6%、96.8%、97.3%、87.9%;SARS-CoV-2 IgG和IgM抗体在检出率无统计学差异的情况下,重症组距离发病日期的平均检测时间为10.8(10.8±4.1)d,早于轻症组的13.3(13.3±6.4)d,差异有统计学意义(P=0.017);IgG阴性组的中位检测时间为发病后7.0(5.0~12.0)d,早于IgG阳性组的13.5(10.0~17.0)d,差异具有统计学意义(P=0.0001);IgM阴性组的中位检测时间为发病后11.0(6.0~16.0)d,早于IgM阳性组的14.0(10.0~17.0)d,差异具有统计学意义(P=0.016)。结论化学发光法检测新型冠状病毒IgM和IgG抗体的方法具有较好的特异性和敏感性,可辅助诊断COVID-19,弥补病毒核酸检测的不足;检测时间是影响抗体结果的主要因素,较早检出SARS-CoV-2 IgM/IgG抗体可能预示着病情更加严重。

新型冠状病毒SARS-CoV-2的实验室检测技术

2019年12月起由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)导致的新型冠状病毒肺炎对全球公共卫生造成了重大和急迫威胁。该病毒传染性强,主要通过飞沫和接触传播,感染者出现肺炎几率较高,少数患者会出现急性呼吸窘迫综合征合并严重呼吸道并发症,甚至导致死亡。因此,选择合适的检测技术和方法对病原学做出准确、快速的鉴定,对提高疾病的诊断和治疗效率,遏制传染病爆发流行起关键作用。本文将对该病毒实验室检测技术,包括病毒分离培养、实时荧光RT-PCR、基因测序、血清学抗体检测及基于CRISPR/Cas13系统的基因编辑技术等进行概述,以期为临床医生及科研工作者提供更好地防治策略和研究思路。

从2019-nCoV和SARS-CoV的侵袭靶点血管紧张素转化酶2寻找新型冠状病毒肺炎的救治策略

自2019年12月以来,新型冠状病毒(2019-nCoV)感染在中国武汉引发了新型冠状病毒肺炎的爆发,并引起了公众的极大关注。2019-nCoV与SARS-CoV均属于冠状病毒科,均通过血管紧张素转化酶2(ACE2)侵入靶细胞。深入了解ACE2及病毒侵入人体后以其为中心引起的一系列病生理变化机制,可能有助于发现并解释相应的临床现象,进而及时予以处理;另外ACE2是潜在的治疗靶点,可以此寻找相应的救治策略。本文阐述了ACE2在2019-nCoV及SARS-CoV所致多脏器损伤中的作用、针对ACE2的靶向阻断药物以及抑制炎性反应的药物,旨在为后续相关研究及诊治、药物研发提供依据。

新型冠状病毒SARS-CoV-2基因检测及其影像学对照

目的研究新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸基因检测及其影像学对照。方法实时荧光RT-PCR方法检测SARS-CoV-2 ORF1a/b和N基因,分析23例SARS-CoV-2核酸阳性患者临床及影像学资料。结果①无症状感染者3例,COVID-19确诊20例,潜伏期2~24天,成人轻型5例,儿童轻型1例,青年轻型1例,成年普通型13例。②23例SARS-CoV-2基因阳性患者,痰标本的病毒含量和检测效果高于鼻咽拭子标本,N基因粪便比痰和鼻咽拭子阳性持续时间长。③20例COVID-19中,30.0%(6/20)CT扫描未见异常。病毒载量与影像学无正比对应关系。④发病部位以外周带(13/14)和下叶后基底段(11/14)多见,两个或多个肺叶受累(11/14),双侧病变(11/14)。⑤14例CT异常COVID-19中,影像学主要表现为毛玻璃影(10/14)、双肺斑片状阴影(10/14)、晕征(8/14)、细网格征(5/14),以及伴发小叶间隔增厚(5/14)、支气管充气征(5/14)和小血管增粗影(5/14)。结论病毒载量与影像学无正比对应关系,SARS-CoV-2核酸检测联合CT扫描、流行病学史可以提高COVID-19的检出率,不能孤立仅仅依靠核酸PCR检查或CT检查。

新型冠状病毒SARS-CoV-2感染治疗中的“老药新用”

近期,新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引发的肺炎在中国武汉暴发,给人类的生命健康带来了威胁,并给中国人民的生活带来了极大影响。但是目前临床上尚无疗效明确的针对SARS-CoV-2的特效药物,一些在体外细胞水平上初步证明对该病毒有一定抑制活性或之前文献报道的对冠状病毒感染有抑制效果的临床药物,目前正在开展SARS-CoV-2感染患者治疗的临床试验研究或已用于试用性治疗。本综述主要从老药新用的角度来简要介绍这些药物的作用机制、体外抗病毒效果、副作用等特征及研究现状,希望能为SARS-CoV-2感染患者的治疗提供思路。

SARS-CoV-2抗体检测在新型冠状病毒肺炎诊断中的应用价值

目的探讨血清严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV-2)IgM和IgG抗体检测在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的价值。方法选取COVID-19患者173例(COVID-19组),其中140例SARSCoV-2首次核酸检测阳性,33例多次检测后呈阳性。以101例排除COVID-19的患者作为对照组。采用胶体金免疫层析法(CGIA)检测SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测SARS-CoV-2核酸。以临床诊断为金标准,分析SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体诊断COVID-19的效能。结果 SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体的敏感性分别为76.9%、74.6%,特异性分别为94.0%、95.1%,临床总符合率分别为83.2%、82.1%,与临床诊断的一致性均较好(kappa值分别为0.663、0.644)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,SARS-CoV-2 IgM和IgG抗体诊断COVID-19的曲线下面积(AUC)均为0.85。结论 SARS-CoV-2抗体检测具有较高的敏感性、特异性和临床总符合率,可用于COVID-19的辅助诊断。

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)与严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)研究对比

2019年末我国武汉爆发了自2003年的SARS-CoV和2012年的中东呼吸综合症(MERS)以来又一次冠状病毒大规模爆发流行。截至2020年10月09日20时,世界卫生组织(World Health Organization, WHO)数据显示海外累计确诊病例36,725,069例,死亡病例1,062,153例,中国确诊人数达到了91,264例。此次疫情的严重性自然引起国人联想到2003年爆发的SARS病毒。且最新研究认为SARS-CoV-2是SARS-CoV的姊妹病毒,具有高度的同源性。因此我们将围绕SARS-CoV-2和SARS-CoV之间的联系以及SARS-CoV-2的最新诊疗方案进行简要综述。

从络脉探讨新型冠状病毒感染后嗅觉异常

新型冠状病毒感染(COVID-19)从发生到现在为止已3年有余,疫情期间中医中药发挥了重要的作用,取得了很好的疗效,但随着时间推移,感染过的人数增多,发现感染后嗅觉异常患者越来越多,西医对其治疗以刺激神经或使其自愈为主,但效果因人而异且治疗周期长,而嗅觉异常会使患者生活体验感降低、心理状态改变,如焦虑、抑郁等,还会诱发其他系统疾病,所以对于嗅觉异常的情况不容小觑,中医对其认识、治疗有独特之处,故文章从COVID-19致嗅觉异常的现代研究、中医认识及药物应用等方面阐述了嗅觉异常的原因及从络脉入手如何拓展治疗思路进行治疗。

新型冠状病毒SARS-CoV-2的研究进展

截至2020年3月30日,全球新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染者超70万例,死亡人数35 020例。世界卫生组织(WHO)于2020年3月12日宣布此次由SARS-CoV-2病毒引起的COVID-19已具有全球大流行特征。目前,尚无针对该病毒的疫苗或特效药,针对SARS-CoV-2的最有效措施还是早期发现,隔离新的感染源及对确诊患者的诊断和治疗。为应对此次疫情,详细了解病毒的性质及其临床特征至关重要,主要对新型冠状病毒的结构与基因组、流行病学、疾病诊断及治疗等方面的研究进展进行了综述。

新型冠状病毒SARS-CoV-2研究进展

在武汉发生的由新型冠状病毒SARS-CoV-2引发的人类冠状病毒病COVID-19,仅仅2个多月时间在我国及国际上70多个国家出现迅速传播,致病和死亡率高,人类生命受到了极大威胁。一些科学家火速投入研究,对SARS-CoV-2的来源和进化、形态特征和基因结构、感染和致病分子机制开展深入研究,取得了重大进展,为科学防控COVID-19提供了重要依据。根据上述研究的基础,文中对COVID-19病毒疫苗、抗体和抑制剂研发提出了设想,在研究防控COVID-19核心技术上具有一定的参考价值。

中国地区新型冠状病毒感染者的密切接触人群SARS-CoV-2核酸阳性率的meta分析

目的了解中国地区新型冠状病毒感染者的密切接触人群严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸阳性率的现状。方法检索PubMed,EMbase,中国期刊全文数据总库(CNKI)、万方科技期刊全文数据库、维普中文科技期刊全文数据库(VIP)中有关中国地区新型冠状病毒感染者的密切接触人群SARS-CoV-2核酸检测相关文献,检索时间为2019年12月~2020年12月24日。参照修改后的美国卫生保健研究与质量机构(AHRQ)声明评价文献质量。采用StataSE15.0软件进行meta分析,利用Freeman-Tukey双反正弦转换法计算合并的阳性率,根据性别、年龄、感染人员关系、感染方式及接触频率进行亚组分析,并进行敏感性分析及Egger法检验发表偏倚。结果共纳入11篇文献,总样本量为24906例,新型冠状病毒感染者的密切接触人群SARS-CoV-2核酸阳性率为5.42%(95%CI:3.57%~7.64%),亚组分析显示,男性阳性率为4.35%,女性阳性率为6.36%;0~9岁组阳性率为5.88%,10~59岁组为4.76%,≥60岁组为8.73%;家庭成员组阳性率为13.42%,其它为2.09%;共同生活人员阳性率为11.44%,聚餐为9.90%,其它感染方式组为1.95%;偶尔接触者、一般接触者、经常接触者阳性率分别为1.32%,6.12%和9.60%,各亚组间差异均有统计学意义(χ^(2)=37.89~809.90,均P<0.05)。敏感度分析提示结果稳定,Egger法检验发表偏倚为差异无统计学意义(t=0.93,P=0.376)。结论中国地区新型冠状病毒感染者的密切接触人群SARS-CoV-2核酸具有一定的阳性率。