一种大白菜新型甘蓝型油菜CMS快速鉴定方法及应用

针对目前甘蓝型油菜Pol CMS、新型萝卜胞质Ogu CMS、新型甘蓝型油菜CMS鉴定过程中,存在必须从orf138、orf222、orf2243种引物中选用2对引物进行分子标记互相验证鉴定的缺点。以开发快速鉴别新型甘蓝型油菜CMS的分子标记为目的,选取含有Pol CMS的CMS-AQ29和含有新型甘蓝型油菜CMS的CMS后36高的2个材料基因组DNA为模板,通过引物orf222进行PCR扩增,经测序对比2种类型细胞质雄性不育系的核苷酸序列差异,确定主要差异区域为180~210 bp。通过orf222上游引物末端T/G碱基的错配,设计开发了快速鉴定新型甘蓝型油菜CMS的专用引物O-2,该引物可扩增出470 bp的核苷酸序列,而不含有新型甘蓝型油菜CMS的材料则不能扩增出核苷酸序列,具有能一次性快速鉴定出含有新型甘蓝型油菜CMS不育基因材料的特点。利用该引物对转育了新型甘蓝型油菜CMS的材料CMS-D571、CMS-D574及对应的保持系D571、D574分别进行了鉴定,证实雄性不育系CMS-D571、CMS-D574为转育了新型甘蓝型油菜CMS的雄性不育系,结果表明该方法稳定可靠。

甘蓝型油菜高亚麻酸CMS的快速选育方法及效果研究

为了加速甘蓝型油菜高亚麻酸杂交育种进程。以高亚麻酸油菜种质为试验材料,采用快速选育方法进行油菜高亚麻酸CMS及保持系的选育。结果表明:选育周期从5~6年缩短为4年,亚麻酸含量由11.85%提升至16.96%,含油量由45.0%提升至48.8%,单株亚麻酸产出量由0.98 g提升至1.53 g。与原CMS(陕6A)相比,“YM-1A”的含油量、单株产量、亚麻酸含量、异交结实系数、单株亚麻酸产量分别提高8.45%、4.49%、59.43%、12.8%、80.65%;而自交结实系数降低56.86%。因不育性、农艺、品质等性状显著提高,YM-1A在甘蓝型油菜高亚麻酸杂交育种中具有较高的利用价值。

新型化学杂交剂SX-1和肥料混用对甘蓝型油菜CMS的作用效果

在单核期对甘蓝型油菜CMS喷施新型化学杂交剂SX-1的同时加入尿素、速溶硼肥、磷酸二氢钾及其相互配组的肥料,结果表明:混喷尿素能明显提高油菜CMS叶片叶绿素含量、株高及株高日增长率;速溶B肥可明显增加单株有效角果数、主花序结角数、结角密度和产量;磷酸二氢钾仅在与速溶B肥配合使用时才可增加有效角果数;尿素和速溶B肥配合使用可明显增加叶片叶绿素含量,同时增产效果也最佳。化学杂交剂SX-1与肥料混合喷施可提高杂交油菜种子的质量和产量。

新型化学杀雄剂“定军1号”在甘蓝型油菜CMS制种上控制微粉的作用效果

经过大量研究及实践，在单核期用定军1号杀雄剂处理甘蓝型油菜细胞质雄性不育系（CMS）可显著降低不育系的微粉花朵数，微粉量和育性指数，提高不育度，有效减少或消除微粉的产生，提高种子纯度5％-10％；该杀雄剂用药幅度较宽，成本低廉，大面积易操作，在甘蓝型三系油菜CMS制种领域，对提高种子纯度，降低制种风险具有较好的应用价值。

甘蓝型油菜Pol CMS育性恢复基因的PCR标记(英文)

采用恢、保回交群体和集团混合分析法，筛选了１０４０个１０—ｍｅｒ随机引物，找到了与甘蓝型油菜波里马细胞质雄性不育系（Ｐｏｌ ＣＭＳ）育性恢复基因（Ｒｆｐ）连锁的两个ＲＡＰＤ标记Ｓ１０１９７２０和Ｓ１０３６８１０。它们位于Ｒｆｐ的一侧，与该基因的遗传图距分别为 ５．８ｃＭ和 １２．３ｃＭ。随后，克隆并测序这 ２个多态性片段，根据其 ２端序列设计了２对２０～２４－ｍｅｒ的特异引物，它们在１３８株的回交群体中ＰＣＲ分离分析的结果与原来各自的ＲＡＰＤ标记相同。这２个ＳＣＡＲ标记将被用于分子标记辅助选育Ｐｏｌ

甘蓝型油菜5个同质CMS系及其保持系、杂交种的同工酶比较

以甘蓝型油菜5种同质异核不育系及相应保持系、5种恢复系、15种杂交F1为试材,进行酯酶(EST)、过氧化物酶(POD)同工酶分析。结果表明:各不育系与其近等基因系——保持系的EST、POD同工酶酶谱较为相似,而5种不育系间及5对不育系与保持系间的差异无规律可循。聚类结果表明聚在一起的类群均有亲缘关系。同工酶表现为明显的共显性,EST尤为明显,不同材料具有各自特殊条带,杂种F1综合了双亲条带,因而也有与每一亲本不同之处。说明共显性的EST等同工酶可用于分析亲缘关系、建立品种指纹及鉴定杂交种纯度等。

甘蓝型油菜CMS三系及杂交种的选育研究

引进我国长江流域甘蓝型半冬性双低品种(系),在陕西关中生态条件下连续多年进行适应性选择,选育出适宜关中的双低自交系;用这类自交系与不育株测交和回交,育成不育株率100％、不育度95％以上的不育系212A、218A、159A等。用多亲本复合杂交改良的单、双低恢复系116C、1102C与不育系测交,育成了陕油6号、陕油8号等品种。2000年陕油6号通过陕西省农作物品种审定委员会审定,2001年陕油8号通过国家农作物品种审定委员会审定。

甘蓝型CMS杂交油菜品种种子纯度的分子鉴定及其吻合率研究

该研究在大量引物筛选和重复验证的基础上对目前生产上大面积推广应用的CMS杂交油菜品种秦优7号、秦杂优1号及其对应亲本进行了RAPD标准图谱的构建,并规模化的对该两杂交种的生产商品用种种子纯度进行了检测。对所检样品所代表的种子群体进行了大田群体纯度跟踪和吻合率比对研究,结果显示两品种的室内检测结果和田间纯度对应度及其单株吻合率皆在97%以上,这表明利用该技术进行杂交油菜种子纯度分析方法是可靠的,该方法在连续5年上百份样品、数万单株和20多万千克的杂交油菜种子纯度分析应用实践中得到检验和证明。

利用不同液体介质对甘蓝型油菜CMS辅助授粉的研究

利用不同浓度的食用蔗糖和食用盐液体介质及制备的介质花粉,在封闭、模拟制种、开放授粉条件下研究对甘蓝型油菜CMS陕2A、陕3A的辅助授粉效果。结果表明:低浓度糖介质能够在一定程度上保持花粉活力,改善柱头环境,有利于外源花粉附着萌发。低浓度糖介质花粉辅助授粉封闭处理的平均结籽数为1.37～2.13粒/朵,有效角粒数为3.80～4.88粒/角;模拟制种、开放授粉处理均能显著和极显著地增加CMS的结实,较大幅度地提高制种产量,以0.5%糖介质花粉对模拟制种田作模拟制种授粉,可使陕2A、陕3A平均结籽数分别提高2.91粒/朵和2.70粒/朵,增产10.35%和11.52%;而4.0%糖介质和1.0%盐介质对模拟制种田辅助授粉和开放授粉处理却表现显著的负效应。

甘蓝型油菜CMS微粉活力研究及其对杂交制种纯度的影响

通过对微粉和正常花粉在不同和同一雌蕊上的结实力比较和结实竞争研究，表明微粉虽能够授粉结实，但活力低、萌发慢，持续时间短，受精结实能力差，与正常花粉的竞争力弱，授微粉后间隔３～７２ ｈ，再授恢复系花粉，其结实表现仍可达到或超过单独授恢复系花粉的结实率，最高的还超过了只授恢复系花粉结实率的９．５７％ ；授微粉后间隔０～４８ ｈ 再授恢复系花粉仍可获得７０．３５％ ～９１．００％ 的异交率，说明微粉对油菜杂交制种过程的杂种纯度影响较小。

甘蓝型油菜CMS不育系L160A的遗传分析

对新近选育的甘蓝型油菜CMS不育系L16 0A育性的遗传特点、L16 0A与pol细胞质不育系和陕 2A不育系的关系以及L16 0A的恢复系L16 0R - 1与恢复系L17C、湖南花叶恢、垦C1恢复基因的等位性进行了分析。结果表明 ,L16 0A不育性的遗传由一对隐性基因控制 ,同时受到其他微效基因的修饰 ;其恢保关系与pol细胞质不育系L17A、湘矮A和不育系陕 2A是一致的。L16 0A的恢复系L16 0R - 1与L17A的恢复系L17C和湘矮A的恢复系湖南花叶恢的恢复基因是等位的 ,而与陕 2A的恢复系垦C1的恢复基因是否具有等位性 。

甘蓝型油菜CMS温度钝感不育系的选育及其育性稳定性分析

本文介绍了甘蓝型油菜CMS温度钝感不育系DA及其保持系DB的选育过程,分析比较了DA与23A、L17A和陕2A等不育系的花器形态、花期不同阶段和不同年份初花期不育系的育性稳定性。结果表明,DA属于典型的花药败育型雄性不育系,不育彻底、不育性稳定,在整个花期和不同年份都表现对环境温度变化不敏感。这可能与DA携带有对温度钝感的不育基因有关。

甘蓝型油菜CMS保持系的选育与改良方法研究

根据细胞质雄性不育的遗传原理 ,采用 5种不同方法选育和改良保持系 ,介绍和分析了每一种方法的选育效果。结果表明 ,测交筛选是选育保持系最基本且省工省时的方法 ,保持系× F1 代杂交种、品种 (系 )×保持系、基因累加法、多亲本复合杂交法 ,均为行之有效的改良方法 ,育种者可根据具体的育种目标和现有的种质资源 ,选择最佳的选育与改良亲本的方法 。

提高甘蓝型油菜CMS杂交种制种产量的方法和途径

提高甘蓝型油菜ＣＭＳ杂交种制种产量的方法和途径田保明（河南省农业科学院经济作物研究所郑州４５０００２）甘蓝型油菜胞质雄性不育系（ＣＭＳ）杂交种具有生长势强、干物质积累快、抗寒抗病性强、产量高、适应范围广等突出优势，一般比常规品种增产３０％左右，深受广...

“丰路油菜素”对甘蓝型油菜CMS不育系陕2A育性及制种效果的影响研究

对甘蓝型油菜细胞质雄性不育系 (CMS)陕 2 A在蕾苔期 (苔高 2 0 cm～ 30 cm)和初花期用 30 0倍高浓叶肥“丰路油菜素”叶面喷施 ,并对其育性、制种产量及杂种一代恢复率的调查和酯酶同工酶谱分析 ,表明“丰路油菜素”能显著增加油菜 CMS的有效花朵 (蕾 )数和结实率 ,提高制种产量 ,并对杂种一代的恢复率、不育系的育性及其制种纯度没有不良影响。

甘蓝型油菜Ogu CMS 1575A 4个恢复系分子标记的初步研究

【目的】对甘蓝型油菜Ogu CMS恢复基因(Rfo)设计的特异分子标记进行检测,为选育有别于国外的同类恢复材料提供依据。【方法】以甘蓝型油菜Ogu CMS 1575A的保持系及其恢复系1601、SR36、SR58、1628为材料,选取1个基于Ogu CMS恢复基因设计的特异分子标记和5个与恢复基因连锁的萝卜标记,对甘蓝型油菜Ogu CMS 1575A的4个恢复系进行恢复基因Rfo分子标记检测,并与国外同类恢复系RRH1、R113、R2000的检测结果进行初步比较。【结果】甘蓝型油菜Ogu CMS 1575A的4个恢复系1601、SR36、SR58、1628均存在Ogu CMS恢复基因。与Rfo连锁的萝卜基因区段的分子标记检测比较表明,恢复系1601、1628连锁的萝卜片段长度短于国外同类恢复系R113;恢复系SR36、SR58与RRH1连锁的萝卜片段长度相近,但是SR58却缺少1601、1628、SR36共有的1个标记SG34。【结论】甘蓝型油菜Ogu CMS 1575A的恢复系1601、SR58、1628可能是有别于国外同类恢复系RRH1、R113、R2000的萝卜质恢复材料。

甘蓝型油菜莫利CMS (Moricandia CMS)的种质创制

莫利CMS是一种重要的细胞质雄性不育系统,在油菜杂种优势利用上具有重要应用价值,目前在印度的芥菜型油菜中得到广泛应用。为了将莫利CMS引入甘蓝型油菜,本研究通过甘蓝型油菜与芥菜型油菜莫利CMS材料进行杂交、多代回交自交获得莫利CMS的甘蓝型油菜材料。根据莫利不育胞质相关分子标记orf 108-O检测、花粉活力鉴定及自交结实情况进行选择,最终选出连续2代花粉活力低于3%且自交不结实的CGZ 909作为候选不育系材料;连续2代花粉活力大于90%且自交结实正常的CGZ 924、CGZ 925作为候选恢复系材料。候选恢复系材料给候选不育系材料授粉所得F_(1)代自交结实正常,实现了莫利CMS在甘蓝型油菜中的三系配套。本研究为下一步基于莫利CMS的甘蓝型油菜杂种优势利用奠定了基础。

新型化学杂交剂SX-1和肥料混用对甘蓝型油菜CMS的作用效果

油菜CMS育性的不稳定，加大了不育系的选育难度，在生产中会因降低杂交种子的恢复率而造成危害。为消除油菜CMS微粉的影响，在杂交油菜制种中通常采取的推迟播期、摘顶保纯、加大父本行比、辅助授粉等措施加大了制种成本；新型化学杂交剂SX-1有效成分活性高、杀雄彻底、作用时间长、易分解。在单核期喷施5mg／L的SX-1可使油莱CMS的微量花粉败育。

原生质体非对称融合获得花椰菜与Ogu CMS甘蓝型油菜种间杂种

甘蓝型油菜Ogu CMS系幼叶原生质体经剂量分别为0．0250，0．0750，0．3150，0．4680和0．9600J／cm^2的紫外线辐照后，与花椰菜下胚轴原生质体通过PEG法诱导融合，其中0．0250～0．4680J／cm^2获得再生植株68株，0．9600J／cm^2辐射剂量下没有获得再生株。通过根尖染色体计数、流式细胞仪倍性鉴定、同工酶酶谱分析、RAPD及Ogu CMS线粒体基因orf 138 STS（Sequence Tagged Site）标记引物扩增等方法对再生株进行了鉴定。结果表明，其中32株为杂种植株。同时也发现，紫外线辐照剂量的增加对供体染色体的丢失程度影响不大。