新型肝靶向干扰素融合蛋白的质量标准研究

目的建立新型肝靶向干扰素(interferon-circumsporozoite protein,IFN-CSP)的质量标准。方法采用细胞病变抑制法进行生物学活性测定;RP-HPLC法及非还原SDS-PAGE法进行纯度分析;BCA法、ELISA法、抗生素微生物学检定法、凝胶法分别测定蛋白质含量、宿主菌蛋白质残留量、氨苄青霉素残留量和细菌内毒素含量;紫外光谱法确定吸收峰位置;液质联用技术进行肽指纹图谱分析;Edman降解法检测N-端氨基酸序列。结果 IFN-CSP的生物学活性、纯度、蛋白质含量、宿主菌蛋白质残留量、氨苄青霉素残留量及细菌内毒素的检验结果均在质量标准控制范围内,符合《人用重组DNA制品质量控制技术指导原则》和2015年版《中国药典》对重组干扰素α2b质量标准的要求。紫外光谱检测吸收峰约在225 nm处,液质联用分析肽指纹图谱覆盖率达80%,N-端氨基酸序列结果显示其N端前15个氨基酸与天然蛋白质一致。结论 IFN-CSP符合基因工程药物质量标准的要求,为其进一步应用开发提供了依据。