PPAR-γ激动剂对癫痫持续状态大鼠神经元保护作用的研究

目的评价过氧化物酶增殖体激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)激动剂吡格列酮(pioglitazone,Pio)对癫痫持续状态大鼠海马神经元的保护作用及其可能的机制。方法选用健康成年雄性Wistar大鼠39只,随机分为三组:吡格列酮SE组(Pio组),生理盐水对照SE组(M组)及正常对照组(N组)(每组13只)。Pio组预先连续7天给予吡格列酮(10 mg/kg)灌胃处理,M组给予等剂量生理盐水(Na Cl)。其中Pio组及M组给予戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)40 mg/kg腹腔注射制备癫痫持续状态(status epilepticus,SE)大鼠模型。采用行为学观察癫痫持续状态大鼠的发作潜伏期及发作级别。Western blot检测癫痫大鼠海马组织中环氧化酶-2(cyclooxygenase,Cox-2)蛋白表达水平,ELISA法测定癫痫大鼠海马组织中前列腺素I2(prostaglandin I2,PGI2),前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的浓度。结果 Pio组较M组发作潜伏期延长(13.880±8.610)s vs(3.750±2.493)s,P<0.05,癫痫发作程度减轻。Pio组较M组Cox-2表达水平明显下降(P<0.05),Pio组及M组PGI2,PGE2浓度有所降低(0.724±0.025)pg/m L vs(0.734±0.027)pg/m L,P<0.05;(1.818±0.023)pg/m L vs(1.825±0.022)pg/m L,P<0.05。结论吡格列酮对于大鼠癫痫持续状态后神经元损伤具有保护作用;吡格列酮可能通过减轻炎症反应,进而起到保护神经元的作用。

PPAR-α/γ激动剂对代谢综合征大鼠模型心室重构中MMP-9表达和TGF-β/Smads通路的影响

目的探讨PPAR-α/γ激动剂对代谢综合征(Metabolic syndrome,MS)大鼠模型心室重构中MMP-9表达和TGF-βSmads通路的影响及意义。方法 60%果糖饮食喂养雄性SD大鼠构建MS大鼠模型并随机分组:模型对照组(MC组,n=10)、非诺贝特组(FEN组,n=11)、吡格列酮组(PIO组,n=10)、非诺贝特+匹格列酮组(FEN+PIO组,n=11),正常对照组(NC组,n=6)。NC组大鼠用普通标准饲料喂养,FEN组和PIO组大鼠分别加用非诺贝特30 mg/(kg·d)及吡格列酮3 mg/(kg·d)灌胃;FEN+PIO组大鼠加非诺贝特30 mg/(kg·d)和吡格列酮3 mg/(kg·d)灌胃,干预4周后RT-PCR方法检测PPAR-α/γmRNA水平,免疫组化方法检测MMP-9和TGF-β1蛋白表达。结果 MC组PPAR-α/γmRNA的结果均低于NC组,差异具有统计学意义(P<0.05)。FEN组PPAR-αmRNA(0.59±0.03)和PPAR-γmRNA(0.61±0.03)均高于MC组,低于NC组,差异具有统计学意义(P<0.05);PIO组PPAR-α(0.57±0.04)和PPAR-γmRNA(0.54±0.02)均低于NC组,且低于MC组,具有统计学意义(P<0.05);FEN+PIO组PPAR-αmRNA(0.63±0.02)和PPAR-γmRNA(0.67±0.03)均高于MC组,差异具有统计学意义(P<0.05);MMP-9和TGF-β1在各组大鼠心肌均有表达。与NC组大鼠比较,MC组、FEN组、PIO组和FEN+PIO组大鼠心肌表达MMP-9和TGF-β1/Smads蛋白明显增强,差异具有统计学意义(P<0.05);与MC组比较,FEN组、PIO组、FEN+PIO组大鼠心肌表达MMP-9和TGF-β1/Smads蛋白均减弱,差异具有统计学意义(P<0.05);FEN+PIO组大鼠心肌表达MMP-9 OD值(0.43±0.04)低于FEN组和PIO组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 FEN和PIO均上调了PPAR-α/γmRNA表达、使TGF-β1和MMP-9蛋白明显下降,对心室重构改善有明显的意义,其可能通过TGF-β/smads通路发挥作用。

高脂诱导小鼠肥胖模型中PPAR-γ激动剂对成熟脂肪细胞内JNK信号通路及visfatin分泌的作用研究

目的探讨PPAR-γ激动剂罗格列酮对高脂诱导的成熟脂肪细胞内JNK信号通路和visfatin分泌的影响及作用机制。方法采用高脂饲料喂养C57BL/6小鼠24周建立体内肥胖模型,并同时给予3 mg·(kg·d)-1罗格列酮干预治疗;采用200μM棕榈酸诱导成熟3T3-L1脂肪细胞12h建立体外肥胖模型,并同时加入1~10μM PPAR-γ激动剂及5μM PPAR-γ抑制剂分别孵育细胞24h。检测细胞或血清中visfatin水平及JNK信号通路中相关分子表达和含量,评价PPAR-γ激动剂对JNK信号通路及visfatin的调节作用。结果在细胞模型中,PPAR-γ激动剂呈剂量依赖性上调PPAR-γ核表达,而下调phospho-JNK表达,同时增加了细胞内visfatin的释放(P<0.05);PPAR-γ抑制剂和PPAR-γ小分子干扰RNA的效应则与PPAR-γ激动剂截然相反(P<0.05或<0.01)。在动物模型中,PPAR-γ激动剂增加了高脂诱导小鼠脂肪组织中PPAR-γ及visfatin的mRNA水平(P<0.05),且visfatin与PPAR-γmRNA水平呈正相关(r2=0.92,P<0.01)。与此同时,PPAR-γ激动剂降低了JNK通路相关炎性分子TNF-1α、MCP-1及IL-6的表达及含量(P<0.05或<0.01)。结论 PPAR-γ激动剂有潜在的抗炎和调节visfatin分泌的作用。

PPAR-γ激动剂对2型糖尿病大鼠肾脏血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨PPAR-γ激动剂罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏VEGF表达的影响。方法采用长期高脂饮食加小剂量链脲菌素(STZ)一次性腹腔注射,建立2型糖尿病大鼠模型,光镜及电镜行肾脏形态学检查;RT-PCR测定VEGFmRNA表达,VEGF免疫组化染色观察VEGF蛋白水平变化。结果2型糖尿病大鼠肾脏VEGFmRNA及其蛋白质表达明显高于正常对照组(均P<0.01),同时大鼠肾脏出现糖尿病肾病的病理变化;PPAR-γ激动剂罗格列酮干预后,肾组织VEGFmRNA及其蛋白质表达较2型糖尿病组降低(均P<0.01),同时肾脏病理变化也得到明显改善。结论PPAR-γ激动剂罗格列酮可能通过抑制肾脏VEGF表达,延缓糖尿病肾病的发生。

PPAR-α/γ激动剂干预对代谢综合征大鼠肾功能的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-α/γ激动剂干预对代谢综合征(MS)大鼠的糖脂代谢、肾功能的影响,为保护MS患者肾功能寻找新的思路和方法。方法高果糖饮食喂养SD大鼠构建MS大鼠模型,不同药物干预后,定期测定各组大鼠[模型对照组(MC)、非诺贝特组(FEN)、吡格列酮组(PIO)、非诺贝特+匹格列酮组(FEN+PIO)、空白对照组(NC)]的体质量、血压(SBP)、血糖(FBS)、血脂、肝肾功能等,分析各组上述指标间的差异及关系。结果①与NC大鼠相比较:MS大鼠SBP、FBS、尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌苷(Cr)水平升高(P<0.01或P<0.05),体质量减轻(P<0.01)。②与MC大鼠相比:FEN组大鼠血清UA、Cr降低(P<0.01或P<0.05);③与FEN组大鼠比较:PIO组大鼠血清UA升高(P<0.05)。④与MC大鼠相比:FEN+PIO组大鼠血清UA、Cr降低(P<0.01或P<0.05)。结论 FEN单用或FEN+PIO干预可降低MS大鼠的血清UA、CR,对肾功能有保护作用。单用PIO干预,比单用FEN干预,使MS大鼠的UA升高。

PPAR-α激动剂对大鼠内皮功能不全的作用及机制探讨

目的:观察PPAR-α激动剂对高脂血症模型大鼠内皮功能不全的作用,并初步探讨其作用机制。方法:称重后,32只SD雄性大鼠随机分成4组,每组8只:正常对照组(A组);正常+非诺贝特治疗组(B组);高脂组(C组);高脂+非诺贝特治疗组(D组)。每周称体重,按体重调整饲料及药物量。12周后,分别检测血脂4项(TC、TG、LDL-c、HDL-c)及血清中NO含量。分离胸主动脉,检测组织匀浆中总NOS活性及离体血管环的舒缩功能。结果:在调脂方面,PPAR-α激动剂非诺贝特能显著降低TG,并能在一定程度上降低LDL,同时显著升高HDL的作用。此外,PPAR-α激动剂非诺贝特具有显著增加总NOS活性及升高NO含量的作用,能显著改善内皮依赖性舒张功能,其作用并不完全依赖于血脂的降低。结论:PPAR-α激动剂非诺贝特能显著增加总NOS活性从而升高NO含量及改善血管内皮依赖性舒张功能,对内皮功能不全起到预防及治疗的作用,这可能是来自于调脂以外的作用。

Ppar-γ受体激动剂对糖尿病肾病大鼠肾缺血再灌注的影响

目的评价Ppar-γ受体激动剂对糖尿病肾病大鼠肾缺血再灌注损伤(I/R)的影响。方法健康清洁级成年雄性Wistar大鼠,体重180-240g,采用高脂高糖饲料+5%葡萄糖水喂养后,小剂量链脲佐菌素腹腔多次注射的方法制备2型糖尿病肾病大鼠(DN大鼠)模型。取制模成功的大鼠30只,使用随机数字表法,随机分为3组(n=10):对照组(DN组)、缺血再灌注组(I/R组)、Ppar-γ受体激动剂组(R组)。于I/R模型建立前给药,R组给予Ppar-γ受体激动剂罗格列酮3mg/kg·d灌胃,DN组和I/R组给予等容量生理盐水灌胃,连续10d。给药结束后I/R组和R组采用切除右肾,夹闭左肾动、静脉45min后恢复灌注的方法制备大鼠肾缺血再灌注模型,DN组切除右肾,不夹闭左肾动、静脉。分别于再灌注24h后心脏采血,测定血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)浓度,处死大鼠取肾,光镜下观察肾组织形态学变化并进行组织学评分,免疫组化法测定NF-κB表达,对样本NF-κB P65阳性细胞表达范围及强度分别进行半定量评估。结果与DN组比较,I/R组和R组血清肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)浓度、肾组织学评分及NF-κB表达升高(P<0.05),与I/R组比较,R组血清肌酐(Cr)及尿素氮(BUN)浓度、肾组织学评分及NF-κB表达降低(P<0.05)。结论 Ppar-γ受体激动剂罗格列酮可减轻糖尿病肾病大鼠肾缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制NF-κB活性有关。

PPAR-γ激动剂对糖尿病患者心血管并发症的影响

糖尿病发病率在逐年增加[1]。饮食和生活方式的改变在其发病中占有重要作用。糖尿病是缺血性心脑血管疾病的重要危险因素,其与许多大血管及微血管并发症密切相关,3/4的糖尿病患者死于心血管并发症。因此,糖尿病被国际学术组织定义为＂冠心病等危症＂[2]。尽管积极的血糖控制降低了如视网膜病变等微血管并发症,但其对大血管并发症降低不明显。STENO研究[3]表明,进行全面的危险因素控制,平均随访年限为7.8年,

PPAR-γ的激动剂抑制肺癌细胞生长的实验研究

目的 研究肺癌细胞上过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPAR γ)的表达及其经配体 (激动剂 )活化后抑制肺癌细胞生长的机制。方法 以RT PCR和Westernblot检测肺癌细胞上PPAR γ的表达 ,并通过MTT和细胞计数检测经PPAR γ的激动剂作用后的细胞增殖情况 ,以TUNEL检测细胞的凋亡情况。结果 两种细胞上均有PPAR γ的表达 ;PPAR γ的配体作用后明显抑制细胞生长 ,且与时间和剂量有关 ;经配体活化的PPAR γ能诱导细胞凋亡 ,使其增殖受抑。结论 作为肺癌治疗的新靶点———PPAR γ在肺癌细胞上表达 ,且经配体活化后能通过诱导凋亡而抑制肺癌细胞的生长 。

PPAR-γ激动剂在动脉粥样硬化中的研究进展

对PPAR-γ的激动剂及其在动脉粥样硬化中对血管细胞的影响等方面进行综述。过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)几乎对参与动脉粥样硬化的所有血管细胞均有影响,在调节动脉粥样硬化的发生中起重要的作用。PPAR-γ与特异性激动剂结合后,调节靶基因的转录活性,抑制血管细胞的增殖与迁移,降低炎症反应,阻止动脉粥样硬化的发生。

PPAR-β/δ及其激动剂L165041对小鼠肝脏成瘤的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferation activated receptor,PPAR-β/δ)及其激动剂L165041对小鼠肝脏成瘤的影响。方法将雄性PPAR-β/δ基因敲除小鼠随机分为实验组1、2,将雄性野生型小鼠随机分为对照组1、2,用二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)造肝癌模型,并给予实验组1及对照组1以PPAR-β/δ激动剂L165041的干预处理,8个月后观察小鼠肝脏肿瘤生长情况。结果实验组1患肝癌的比率为76.9%(10/13);实验组2患肝癌的比率为87.5%(7/8);对照组1患肝癌的比率为11.1%(1/9);对照组2患肝癌的比率为25.0%(2/8),对照组1和对照组2的总体患癌率低于实验组1和实验组2(P<0.05),实验组1与实验组2、对照组1与对照组2总体患癌率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PPARβ/δ具有预防小鼠肝脏成瘤的作用,L165041在本实验中的作用未体现出来。

胆碱酯酶激动剂用于新型冠状病毒肺炎辅助治疗的尝试

笔者以往提出的"经络治疗活性传变说"表明,经络治疗作用与针灸或乙酰胆碱酯酶(AChE)激动剂可以恢复被抑制AChE的活性有关,AChE激动剂可以取代针灸,产生类似针灸,甚至胜过针灸的治疗作用,并且其还有抗击传染病的作用,笔者将这种方法简称为激动剂疗法,并设计了多种可供使用的制剂。建议通过验证,将这一方法应用于目前这场抗击新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情斗争。

PPAR-γ激动剂对大鼠角膜碱烧伤后NF-κB和TNF-α表达的影响

目的探讨眼局部应用过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPAR-γ)激动剂吡格列酮对大鼠角膜碱烧伤后核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)和肿瘤坏死因子α(tumornecrosis factorα,TNF-α)表达的影响。方法48只健康SPF级SD大鼠角膜碱烧伤后随机分组,每组12只鼠(12眼),Ⅰ组为碱烧伤治疗组(ⅠA为低剂量组;ⅠB为高剂量组),结膜下分别注射0.2g.L-1、0.8g.L-1吡格列酮0.1mL,每天1次。Ⅱ组为治疗对照组,结膜下注射地塞米松0.5mg(0.1mL),每天1次。Ⅲ组为空白对照组,结膜下注射生理盐水0.1mL,每天1次。所有大鼠右眼为实验眼,左眼做为阴性对照,均连续注射2周。观察碱烧伤后第1天、第4天、第7天、第14天的角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的发展及PPAR-γ、NF-κB和TNF-α在各时间段表达。结果PPAR-γ自烧伤后第1天开始表达,随着CNV的发生发展,PPAR-γ、NF-κB及TNF-α的表达呈上升趋势。与ⅠB组CNV发生率相比较,Ⅱ组、Ⅲ组明显延迟、生长抑制;ⅠA组与Ⅱ组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。ⅠB组在碱烧伤后第4天、第7天、第14天CNV生长面积分别为(5.42±0.25)mm2、(8.14±0.25)mm2、(9.67±0.42)mm2,与ⅠA组、Ⅱ组、Ⅲ组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05);碱烧伤后第7天,ⅠB组PPAR-γ的表达较Ⅱ组、Ⅲ组明显上升,NF-κB、TNF-α表达均有不同程度的下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论PPAR-γ激动剂吡格列酮抑制大鼠CNV的生成,减轻炎性反应且与剂量浓度有关。其机制可能与活化后的PPAR-γ,在炎症早期有效阻止NF-κB活化,降低TNF-α表达有关。

ppar-α激动剂的虚拟筛选研究

通过虚拟筛选分子对接技术,利用sc-PDB数据库得到蛋白靶点的5类共晶结构。采用vina程序,基于建立的小分子数据库,分别对5类共晶结构进行对接计算。通过重对接过程,计算rmsd(均方根偏差值)来评估利用vina程序是否适用于该体系,通过构建诱饵化合物以及小分子与蛋白的相互作用分析来验证了模型的可靠程度。最终,利用该模型分别对5个靶点进行虚拟筛选,得到了效果较为理想的7个动剂分子,分析了分子和靶点蛋白的作用模式。

新型净化材料结合QuEChERS技术用于动物肌肉组织中β-受体激动剂的快速检测

目的建立食用肉类中9种β-受体激动剂残留的QuEChERS-液相色谱-三重四极杆质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)的检测方法。方法样品经酶解后,用1%氨化乙腈提取,无水硫酸镁盐析后取乙腈相,经新型净化材料分散固相萃取法净化。采用Kinetex 2.6μm F5(3.0 mm×50 mm,2.6μm)色谱柱,经0.1%甲酸水溶液(A)和0.1%甲酸乙腈溶液(B)梯度洗脱,于电喷雾正离子源(electrospray ionization, ESI+)和多反应监测模式(multiple reaction monitoring, MRM)下监测,基质标准曲线定量。结果9种β-受体激动剂在不同添加水平下,相对回收率为70.2%~100.0%, RSD在1.0%~14.9%(n=3),检出限为0.002~0.190μg/kg,定量限为0.01~0.76μg/kg。结论该方法操作简便、快速、净化效果好、准确性高,适用于食用肉类中β-受体激动剂的残留确证。

PPAR-γ激动剂对合并非酒精性脂肪肝的糖耐量损害或者2型糖尿病患者脂肪组织胰岛素抵抗的影响

最近报道匹格列酮可改善合并非酒精性脂肪肝（NASH）的IGT或2型糖尿病患者的葡萄糖代谢、脂肪变性及组织的炎症坏死。此研究来验证脂肪组织胰岛素抵抗的作用以及匹格列酮对这类患者的疗效。患者每天饮食少摄入500千卡，随机、双盲给予匹格列酮和安慰剂6个月治疗。治疗前后，这些患者需做：①肝脏活检；

强效高选择性PPAR-α激动剂对致动脉粥样硬化性血脂紊乱或高胆固醇血症患者的影响—两项随机对照试验

背景：贝特类药物是一种较弱的过氧化体增殖物激活型受体仪（peroxisome proliferators-activated receptor-α，PPAR-α）激动剂。目前尚无有关效果更强、选择性更高的相关制剂的报道。 目的：研究PPAR-α激动剂LY518674的安全性和疗效。设计、地点及参试者：开展两项多中心、随机、双盲、安慰剂对照研究，其中一项针对高甘油三酯及低HDL-C血症患者（致动脉粥样硬化陛血脂紊乱），另一项针对高LDL-C患者（即高胆固醇血症）。2005年8月至2006年8月，参与血脂紊乱研究的研究人员在美国医疗中心随机入选309例患者，参与高胆固醇血症研究的研究人员入选304例患者。干预：在血脂紊乱研究中，患者服用安慰剂、非诺贝特（200mg）或LY518674（10μg、25μg、50μg或100μg），共12周。在高胆固醇血症研究中，患者首先服用安慰剂或阿托伐他汀（10mg或40mg）4周，然后服用安慰剂或LY518674（10μg或50μg）12周。主要观测指标：血脂紊乱研究的观测指标为HDL-C和甘油三酯变化的百分比，高胆固醇血症研究的观测指标为LDL-C变化的百分比。 结果：血脂紊乱研究显示，LY518674（25μg）和非诺贝特分别使HDL—C水平增加5．9mg／dL和5．5mg／dL（15．8％和14．4％）（与安慰剂相比P值均≤0．001，组间比较P：0．79）。更高剂量的LY518674对HDL．C水平的影响不大。LY518674可使甘油三酯水平降低97．3～114．5rag／dE（34．9％～41．7％），与非诺贝特效果相似。LY518674可使LDL—C水平呈剂量依赖性升高，100μg LY518674可使LDL—C升高20．4mg／dL（19．5％），而非诺贝特仅使LDL-C升高0．3mg／dL（2．3％）。非诺贝特和LY518674（50μg和100μg）均可增加血清肌酐值（与安慰剂相比P≤0．001），分别有38％和37．3％的患者肌酐值超出正常范围。非诺贝特还可增加磷酸肌酸激酶水平（与安慰剂相比P=0．004），LY518674则无此反应。高胆固醇血症研究显示，LY518674（10μg或50μg）可使LDL—C降低21．4～26．0mg／dL（13．2％～15．8％），使甘油三酯降低约37％，使HDL-C升高6．3～6．7mg／dL（12．5％～15．0％）。当与阿托伐他汀合用时，LY518674可使HDL．C变化-0．7～6．2mg／dL（-0．6％～11．9％），使甘油三酯显著降低，但对LDL—C无明显的进一步降低作用。 结论：在血脂紊乱患者中，LY518674和非诺贝特可降低甘油三酯水平，升高HDL-C水平，但同时也增加血清肌酐水平。与非诺贝特不同，LY518674还可升高LDL-C水平。在高胆固醇血症患者中，LY518674可降低甘油三酯水平，升高HDL-C水平，但与阿托伐他汀合用时并不能进一步降低LDL—C水平。非诺贝特和LY518674的安全陛均需进一步观察。