法氏囊活性肽对新城疫弱毒疫苗免疫效果影响的研究

本研究通过给鸡两次注射法氏囊活性肽后，接种新城疫弱毒疫苗，观察法氏囊活性肽对新城疫弱毒疫苗免疫效果的影响，结果表明：纯化的法氏囊活性肽能够提高新城疫弱毒疫苗所诱导产生的血清抗体水平，试验组比对照组平均高１～２个滴度；使血清母源新城疫抗体水平维持较高水平；促进法氏囊的生长发育，对抗传染性法氏囊弱毒疫苗（ＩＢＤ）对法氏囊的损伤，和（或）促进损伤后的法氏囊的修复，对脾脏的生长发育没有影响。

猪脾转移因子提高LaSota株鸡新城疫弱毒疫苗的免疫保护率

旨在了解猪脾转移因子(TF)对新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗LaSota株的免疫增强效果及机制。本研究分别采用不同剂量(10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)、10^(-5)羽份)LaSota疫苗株单独(单独免疫组)、LaSota疫苗株与TF联合(联合免疫组)免疫SPF鸡,14 d后以NDV F 48 E 9强毒攻毒,同时设立对照组(非免疫攻毒)和空白组(非免疫非攻毒),并采用ELISA方法与蛋白质芯片技术分别测定外周血IL-4、IFN-γ与IL-12 P40浓度。结果显示,鸡免疫10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)、10^(-5)羽份时疫苗攻毒保护率和半数保护量(PD_(50))如下:单独免疫组分别为100%、55%、0%、0%和0.0008羽份,联合免疫组分别为100%、75%、0%、0%和0.0005羽份,对照组和空白组死亡率分别为100%和0%。免疫10^(-3)羽份疫苗后,联合免疫组IL-4和IFN-γ含量均高于其他组,并于第7、14天差异极显著(P<0.01);攻毒后,联合免疫组IL-4、IFN-γ和IL-12 P40含量均高于其他组,IL-4于第1、14天,IFN-γ于第1、3天,IL-12 P40于第1天差异极显著(P<0.01)。综上表明,TF可增强IFN-γ、IL-12介导的细胞免疫和IL-4介导的体液免疫,提高LaSota株弱毒疫苗的免疫保护率,降低疫苗PD_(50);在抵抗NDV F 48 E 9强毒攻击时,联合免疫组的免疫保护率明显高于单独免疫组。

巴氏杆菌弱毒苗和鸡新城疫弱毒苗饮水免疫蛋鸡后分泌型免疫球蛋白A细胞的分布

用巴氏杆菌弱菌苗和鸡新城疫弱毒苗通过饮水分别免疫１２月龄的蛋鸡，以葡萄球菌Ａ蛋白—辣根过氧化酶（ＳＰＡＨＲＰ）和兔抗鸡分泌型免疫球蛋白Ａ（ＳＩｇＡ）间接组化染色，显示消化道相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）、呼吸道相关淋巴组织（ＲＡＬＴ）及脾中ＳＩｇＡ细胞的产生和分布。结果显示：巴氏杆菌弱毒菌苗免疫组的蛋鸡在十二指肠和盲肠扁桃体中ＳＩｇＡ阳性细胞于首免后３５天出现较多，并一直持续增加到首免后５６天。鸡新城疫弱毒苗免疫组的蛋鸡的ＳＩｇＡ阳性细胞于首免后２８天数量明显增多，首免后３５天达最高峰。呼吸道和脾中同时也出现较多的ＳＩｇＡ阳性细胞。

ClassⅠ/Ⅱ新城疫弱毒株诱导SPF鸡免疫损伤及黏膜免疫应答的比较分析

为了比较Class Ⅰ新城疫弱毒JS10株和Class Ⅱ新城疫弱毒La Sota株免疫雏鸡后的免疫损伤和黏膜应答情况。本研究将60只SPF白来航鸡,随机分成A、B、C 3组。7日龄时,A组和B组分别用JS10株和La Sota株进行滴鼻、点眼免疫,C组以同样方式接种PBS,并于免疫后的d1、4、7、14,每组随机抽取5只扑杀,分别收集唾液、气管、肺和肠的冲洗液,使用双夹心ELISA试剂盒测定SIgA、IgM和IgY的抗体水平。结果显示,2株病毒均未产生免疫损伤;JS10株产生的黏膜抗体水平均高于La Sota株,并且免疫后的d7、14的唾液、气管和肠冲洗液中的SIgA的抗体水平以及肺中IgY抗体水平均显著高于La Sota(p<0.05)。研究表明,2株新城疫弱毒滴鼻、点眼后都能诱导消化道和呼吸道产生强烈的黏膜免疫反应,并且与免疫后的日龄存在明显相关性。由于JS10株可诱导更好的黏膜免疫应答,提示其可作为新型新城疫弱毒疫苗的候选株。

消毒剂等因素对饮水免疫中鸡新城疫弱毒苗活力的影响

1材料与方法 1.1材料 ①La Sota株疫苗,VIREO公司生产,批号,6-16-042,规格,1000头份/瓶,有效期至2005年5月. ②水样,包括城市自来水,鸡场自来水,孵化场水样,未加消毒剂的井水、纯化水及0.01M等渗PBS液(pH7.0).

禽用干扰素对新城疫弱毒疫苗的干扰作用

干扰素对控制新城疫等病毒病的感染和传播发挥了较大的作用。在本品的使用过程中,养鸡户往往使用不当,特别是鸡群发病时,弄不清干扰素和新城疫弱毒苗的使用顺序,同时使用或间隔时间过短,都会影响治疗效果,甚至出现病情加重的现象。因此,我们做了干扰素(北京绿曼产品)对新城疫弱毒苗的干扰试验,在进行疫苗免疫时,同时使用干扰素注射,则干扰疫苗产生免疫抗体,产生的抗体水平比不用干扰素要低的多,抗体高峰期维持时间也短,在同时使用时干扰素用量越大,抗体效价越低。

SPF种蛋与非免疫种蛋生鸡产新城疫弱毒疫苗的对比观察

为了摸索SPF种蛋与非免疫种蛋生产鸡新城疫弱毒疫苗的差异,特进行了本次观察,现将结果报告如下。1 材料和方法1.1 毒种:鸡新城疫C30-86种毒,由中国兽药监察所提供。1.2 种蛋;SPF种蛋,由黑龙江省生物制品一厂SPF实验动物场提供;非免疫种蛋,由黑龙省生物制品一厂实验动物场提供。

花粉多糖对新城疫弱毒苗免疫效果影响——玉米、油菜、荞麦3种花粉多糖作用的比较

当鸡新城疫母源抗体低于２ｌｏｇ２时，３种５％的花粉多糖水溶液与克隆３０弱毒苗共同免疫７日龄小鸡，免疫后在不同的天数监测其ＨＩ抗体效价，结果表明，５％的玉米花粉多糖具有明显增强体液免疫效果，且作用最好，油菜花粉多糖次之，荞麦花粉多糖再次之。３个不同剂量中以０．１ｍｌ（其中含糖５ｍｇ）效果最佳。与０．２ｍｌ（含糖量１０ｍｇ），０．０５ｍｌ（含糖量２．５ｍｇ）相比，经ｔ检验，差异显著（Ｐ＜０．０５）。

新城疫弱毒疫苗La Sota株对血清4型禽腺病毒致病作用的影响研究

Ⅰ群血清4型禽腺病毒(FAdV-4)是常见的家禽垂直传播性病毒,感染鸡后可导致心包积液综合征。在生产中,先天感染FAdV-4的雏鸡免疫La Sota疫苗时会明显加重病情,因此我们推测新城疫弱毒疫苗的免疫具有加重或诱发和垂直传播感染的FAdV-4的致病作用。本研究随机选择50枚SPF鸡胚通过卵黄囊接种来模拟FAdV-4先天性感染,同时以接种生理盐水SPF鸡胚作为对照。待孵化出雏后,接毒组和对照组各取20只7日龄SPF鸡免疫新城疫Ⅳ系弱毒疫苗(La Sota株),同时各组其余鸡以相同方式接种等量PBS作为对照。结果显示:FAdV-4感染的雏鸡在免疫La Sota株后更容易发生严重的生长抑制和免疫器官损伤,说明免疫La Sota株能显著增强FAdV-4致病性。本研究结果显示,免疫弱毒疫苗La Sota增强了垂直传播感染的FAdV-4致病性,提示家禽养殖业种源净化的重要性。

新城疫弱毒V4株的一些特点及“饲料疫苗”的免疫问题

新城疫弱毒Ｖ４株的一些特点及“饲料疫苗”的免疫问题马闻天（中国兽药监察所北京，１０００８１）澳大利亚Ｖ４株新城疫病毒自１９６７年Ｓｉｍｍｏｎｓ分离获得后，经一些学者对其致病性、免疫原性和免疫效果等进行的研究，认为可以用作种毒生产新城疫疫苗。由于它具有...

经鸡胚感染的ALV-J对新城疫弱毒疫苗免疫的抑制作用及疫苗株对病毒载量的影响

为了解经鸡胚感染携带J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的雏鸡体内ALV-J对新城疫(ND)弱毒疫苗(La Sota株)免疫的抑制作用以及疫苗免疫后增强ALV-J对雏鸡致病作用的可能性,随机选择50个SPF鸡胚经卵黄囊接种模拟ALV-J感染,同时选取等量SPF鸡胚以相同方式接种PBS作为对照。出雏后于接毒组和对照组各取20只SPF鸡在7日龄时免疫ND弱毒疫苗(La Sota株)。2~6周龄时,记录各组鸡的体重和免疫器官指数,并对雏鸡的NDV抗体水平和血液ALV-J病毒载量进行动态检测。结果显示,感染ALV-J的SPF鸡5、6周龄时体重显著低于PBS对照组(P<0.05),而感染ALV-J再免疫新城疫弱毒疫苗后SPF鸡体重进一步降低(P>0.05);与PBS对照组相比,6周龄时感染ALV-J的SPF雏鸡胸腺萎缩和脾脏肿大(P>0.05),免疫新城疫弱毒疫苗后胸腺和脾脏损伤加剧(P<0.05);3、4周龄时感染ALV-J再免疫ND弱毒疫苗组的雏鸡NDV抗体水平极显著低于仅免疫ND弱毒疫苗组(P<0.01);4周龄时免疫弱毒疫苗后的SPF鸡血液中ALV-J病毒载量高于未免疫组(P<0.01)。研究表明,感染ALV-J的雏鸡在免疫ND弱毒疫苗(La Sota株)后增强了ALV-J对SPF雏鸡的致病作用,提示净化种源的重要性。

不同免疫途径对鸡新城疫弱毒活疫苗免疫效果的影响

将1 200羽1日龄皖江黄雏鸡(商品代)随机分为对照组和试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组,对照组未免疫鸡新城疫弱毒活疫苗,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组分别通过喷雾、点眼和滴鼻途径免疫鸡新城疫弱毒活疫苗,免疫剂量均为1羽份,试验期22 d,研究不同免疫途径产生的新城疫抗体效价。1~22日龄,每3 d每组取鸡30羽,心脏采血,分离血清,检测鸡新城疫抗体,共取样本8次。结果表明,1~13日龄,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组的鸡新城疫抗体随着雏鸡日龄的增加均呈现上升趋势;13~22日龄,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组的抗体呈下降趋势。而试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组组间抗体效价差异不显著(P≥0.05),说明通过喷雾、点眼和滴鼻3种不同途径免疫雏鸡,新城疫弱毒活疫苗诱导产生的抗体效价相似。因此,从生产效率和劳动成本角度考虑,推荐规模肉鸡养殖采用喷雾途径免疫鸡新城疫弱毒活疫苗。

新城疫弱毒苗不同免疫途径免疫效果的比较

近几年来，非典型新城疫仍对养殖业造成很大危害，发病鸡群产蛋率不同程度的下降，降低了养殖效益，因此，鸡群开产后新城疫弱毒苗的免疫仍是十分重要的。目前，养殖户普遍采用三种免疫方法：饮水免疫；滴鼻、点眼免疫；喷雾免疫。本试验对免疫后的鸡群进行新城疫抗体跟踪监测，比较三种免疫途径产生的不同的免疫效果。

产蛋鸡免疫新城疫弱毒苗诱发禽慢性呼吸道病的诊治

由于禽慢呼常继发或诱发感染于其它细菌病和病毒病,极少单独发病,常不被人认识,笔者就一病例剖析如下：1发病情况及临床症状2011年3月,海安县白甸镇一养殖户,饲养200日龄的蛋鸡6 000羽,按常规免疫新城疫活疫苗,饮苗后3 d,鸡群发生以轻微咳嗽、喷嚏为主的呼吸道病。

新城疫病毒弱毒株分子生物学特性的研究

于 1 996年从长春地区一养鸡场分离到一株新城疫病毒 (NDV长春株 ) ,经过病毒生物学特性的研究表明该NDV毒株为弱毒株。将NDV长春株纯化培养后 ,提取病毒RNA ,经RT_PCR扩增F基因 ,并测定出F基因的全部核苷酸序列为1 75 8bp ,编码有 5 5 3个氨基酸残基。与国内外发表的部分NDV病毒的强毒株和弱毒株的相同序列进行比较 ,其核苷酸同源性在 88.2 %～ 96 .7%之间 ,氨基酸同源性在 90 .1 %～ 98.1 %之间 ,并与所有弱毒株F蛋白裂解位点区 (1 1 2～ 1 1 7)氨基酸序列Gly_Arg/Lys_Gln_Gly/Ser_Arg_Leu相同 。

稳定表达人TMPRSS2基因BHK细胞系的建立及其对新城疫弱毒增殖效率评价

为提高细胞培养系统中新城疫病毒的增殖效率,通过构建TMPRSS2过表达的BHK细胞系,探索其对新城疫弱毒增殖的影响。本研究将TMPRSS2基因克隆于噬菌体载体pHAGE中,构建重组质粒pHAGE-TMPRSS2。将重组质粒pHAGE-TMPRSS2以及辅助包装质粒psPAX2和pMD2G共转染至293T细胞并收集上清。将包装好的慢病毒感染BHK细胞,通过Blasticidin加入筛选和有限稀释法将单克隆细胞扩大培养。经RT-PCR和Western-blot鉴定,结果表明,TMPRSS2在BHK细胞中获得了稳定的高表达。接种新城疫弱毒后通过TCID50测定显示,TMPRSS2过表达BHK细胞系能支持较高水平的病毒增殖。

猪脾转移因子对La Sota株鸡新城疫弱毒疫苗的免疫增强作用

【目的】本文旨在研究猪脾转移因子(TF)对新城疫(ND)病毒弱毒疫苗La Sota株的免疫增强作用及机理,为兽医临床防控提供理论依据。【方法】以4种不同剂量La Sota疫苗株分别单独、与TF联合免疫SPF鸡,14 d后以ND病毒(NDV)参考强毒F_(48)E_(9)株(10^(4.7) ELD_(50))进行攻毒,采用蛋白质芯片技术测定鸡外周血IL-6、IL-10、IL-16和IL-21浓度,并以血凝抑制(HI)试验和荧光定量RT-PCR方法分别检测鸡ND HI抗体效价和F_(48)E_(9)株的病毒血症水平。【结果】攻毒保护试验表明,单独免疫10^(5.17)、10^(4.17)、10^(3.17)和10^(2.17) EID_(50)剂量时疫苗攻毒保护率分别为100%、55%、0%和0%,半数保护量(PD_(50))为12023 EID_(50);对应剂量联合免疫时疫苗攻毒保护率分别为100%、75%、0%和0%,PD_(50)为6918 EID_(50);对照组(非免疫有攻毒)和空白组(非免疫非攻毒)死亡率分别为100%和0%。对10^(4.17) EID_(50)免疫剂量进一步检测分析表明,免疫后,联合免疫鸡IL-6、IL-10、IL-21和ND HI抗体效价(log_(2)x)比单独免疫最多时分别提高了254.95 pg/mL、62.10 pg/mL、1.51 pg/mL和2.6,其中ND HI抗体效价差异极显著(P<0.01);攻毒后,联合免疫鸡IL-10、IL-16、IL-21和病毒血症阳性率比单独免疫最多时分别降低了428.61 pg/mL、167.81 pg/mL、1.48 pg/mL和20%,其中IL-16、IL-21差异极显著(P<0.01)。【结论】本文结果显示,TF可提高La Sota株弱毒疫苗的免疫保护率及免疫后IL-6、IL-10、IL-21介导的免疫应答、ND HI抗体效价,降低疫苗PD_(50)及攻毒后IL-16、IL-21介导的炎症反应、IL-10介导的免疫应答抑制作用、病毒血症。本文明确了TF对La Sota株弱毒疫苗具有较好的免疫增强作用,为疫苗免疫佐剂研发和ND防控提供参考。

新城疫不同弱毒株疫苗对鸭免疫效果比较

为了比较新城疫病毒Lasota、B1、Clone30对鸭免疫保护的强弱,我们用Lasota、B1、Clone30弱毒疫苗分别接种非免疫雏鸭,在7、14、21、28、35、45d分别测定其血清效价,比较它们的抗体效价高低,并在45日龄进行强毒攻击,比较它们的免疫保护效果强弱。试验结果显示以NDLasota系对鸭的免疫效果较好。

鸡新城疫不同弱毒株毒力及免疫原性研究

本研究比较了9株鸡新城疫不同弱毒株的毒力和免疫原性。结果显示,新城疫弱毒耐热B株、V4株、Ulster 2C株基本不致死鸡胚,ICPI为0,MDT/MLD大于150h;Hitchner B1株及F株7/10鸡胚致死,死胚胎儿有明显充血、出血病痕,120h活胚明显萎缩,ICPI为0.213～0.238,MDT约为120h;La Sota株、Clone30株、N79株及VG/GA株120h内鸡胚全部死亡,死胚胎儿有明显充血、出血病痕,ICPI为0.3～0.4,MDT约为103～109h。9株NDV的IVPI均为0对鸡只不致病,但免疫原性有所不同,NDVB株免疫原性较好,全部保护,NDVF株最弱。

应用新城疫弱毒疫苗与灭活疫苗防制鸭副黏病毒病的探索

新城疫病毒（NDV）属副黏病毒科副黏病毒属,其基因组由负股单链RNA构成。新城疫（ND）是禽类一种急性、高度接触性,严重危害我国养禽业的重要传染病。一般认为除鸡、火鸡等宿主外,其他禽类尤其水禽对ND有较强的抵抗力,即使感染也不表现明显的临床症状。然而,许多事实证明水禽不仅仅是NDV的贮存库和传播者,也可自然感染发病以及死亡。笔者从鸭子中分离的NDV对鸡、水禽有致病性,而有的NDV分离株毒力弱,但经鸡胚传代后则毒力增强很快。目前尚无鸭专用新城疫疫苗可供使用,但可能取得一定的进展。本试验借鉴鸡的新城疫的防制采用新城疫弱毒疫苗与灭活疫苗的联合应用对发病鸭进行免疫,为鸭副黏病毒感染的防制提供有力证据。