晋汾白猪和新山西黑猪TAP1基因多态性和组织表达谱研究

抗原处理相关转运体1(Transporter associated with antigen processing 1,TAP1)属于ABC转运体超家族的成员,在免疫反应中起着重要的作用。通过采用PCR-RFLP的方法,对猪TAP1基因外显子3的单核苷酸多态性进行检测和分析,结果表明:在晋汾白猪中检测到三种基因型(AA,AG,GG),而在新山西黑猪中检测到两种基因型(AG,GG),晋汾白猪和新山西黑猪在TAP1基因的多态位点的基因型分布差异极显著(P<0.01)。采用RT-PCR半定量方法检测猪TAP1基因在晋汾白猪和新山西黑猪18个组织中的特异性表达,结果显示TAP1基因在晋汾白猪的心、肝、脾、肾、胃、卵巢、皮肤、肌肉、脂肪、大脑、小脑、支气管、盲肠中表达量较高,而在新山西黑猪的18个组织中表达量均较高。研究成功建立了TAP1基因变异信息及其组织表达情况,将为进一步分析猪TAP1基因的分子标记与免疫调控提供基础资料。

IL1RN基因在晋汾白猪仔猪和新山西黑猪仔猪不同组织和细胞中的表达特征分析

白细胞介素1受体拮抗剂(interleukin 1 receptor antagonist,IL1RN)是一种重要的宿主免疫调节因子,是天然存在的IL-1拮抗剂。为了解IL1RN基因在断奶仔猪不同组织和细胞中表达的特征,利用Trizol法提取晋汾白猪仔猪和新山西黑猪仔猪的心脏、肝脏、脾脏、淋巴细胞、巨噬细胞等18种组织和细胞的总RNA,采用RT-PCR方法检测IL1RN基因在不同组织和细胞中的表达情况,应用SPSS 19.0软件分析IL1RN基因在晋汾白猪仔猪和新山西黑猪仔猪4种免疫组织和细胞(脾脏、淋巴结、巨噬细胞、白细胞)中的表达差异情况。结果显示:IL1RN基因在晋汾白猪仔猪和新山西黑猪仔猪的脂肪组织中均不表达,在其余各组织和细胞中均表达;IL1RN基因在晋汾白猪仔猪的巨噬细胞与淋巴结、脾脏、白细胞之间的表达差异极显著(P<0.01),且在淋巴结与脾脏、白细胞之间的表达差异极显著(P<0.01);IL1RN基因在新山西黑猪仔猪的脾脏、淋巴结、巨噬细胞、白细胞的表达两两之间均呈极显著差异(P<0.01);IL1RN基因在2个猪种的脾脏、巨噬细胞、白细胞之间的表达呈极显著差异(P<0.01),在淋巴结中的表达呈显著差异(P<0.05)。该研究结果为进一步揭示2个猪种的IL1RN基因在疾病抵抗方面的作用及相关机制提供了依据。

Akt3基因在新山西黑猪及晋汾白猪不同组织中的mRNA表达

Akt3是Akt(蛋白激酶B)的其中一种亚型,是细胞内一种重要的信号传导分子,在促进细胞增殖、凋亡等进程中具有关键作用。笔者以新山西黑猪和晋汾白猪为研究对象,提取这2种猪的心、肝、脾、肺、皮肤等20种组织总RNA,通过RT-PCR技术检测Akt3基因在这2种地方猪种不同组织中的表达情况。结果显示,Akt3基因在2种猪体力的表达情况有差异。此外,通过SPSS 19软件对这2种猪的4种组织(肝、肺、大脑、直肠)中Akt3基因的表达进行方差分析及多重比较。结果显示:Akt3基因在新山西黑猪的大脑与肺、肝、直肠间的表达差异极显著(P<0.01);在晋汾白猪的大脑与直肠、肝,肺与直肠、肝间的表达差异极显著(P<0.01);在新山西黑猪和晋汾白猪的肺(P=0.001)组织间差异极显著;在大脑(P=0.032)、直肠(P=0.011)、肝(P=0.21)。组织间差异显著。本研究提示,猪Akt3基因在代谢调控中发挥重要作用,为进一步研究Akt3基因在猪的疾病预防方面提供指导和依据。

山西省乡宁县云丘山地区新山西黑猪饲养管理技术

新山西黑猪作为品质优良的培育品种,具有抗病力强、适应性好、肉质鲜美、养殖效益高等优点。总结了山西省乡宁县云丘山地区新山西黑猪各阶段的饲养、管理和选育方法,以期为新山西黑猪的进一步培育和推广提供基础依据。

两个山西地方猪种TLR2基因Bi-PASA遗传标记的多态性研究

为分析晋汾白猪和新山西黑猪TLR2基因第1 255位点编码区的变异信息,试验利用双向特定等位基因PCR扩增法(Bi-PASA)建立TLR2基因变异的遗传标记。结果表明:晋汾白猪和新山西黑猪分别检测到A、B一对等位基因和AA、AB、BB三种基因型,晋汾白猪的等位基因频率(A、B)分别为0.609 2和0.390 8,在TLR2基因第1 255位点不符合Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.01);新山西黑猪等位基因频率(A、B)分别为0.682 7和0.317 3, TLR2基因第1 255位点符合Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);晋汾白猪和新山西黑猪的纯合度分别为0.747 1,0.480 8,香农指数分别为0.669 1,0.624 8;晋汾白猪和新山西黑猪在TLR2基因的多态位点的基因型分布差异极显著(P<0.01)。说明成功建立晋汾白猪和新山西黑猪TLR2基因Bi-PASA遗传标记,可为进一步研究疾病抵抗力、建立抗病群体提供基础资料。

猪MyoG基因外显子1的多态性分析

MyoG基因对成肌细胞的融合和肌纤维的形成有影响,因此对肌肉的分化起重要作用。本实验采用PCR-SSCP技术分析MyoG基因在晋汾白猪和新山西黑猪中的多态性,并对基因型进行统计分析。结果显示,MyoG基因在晋汾白猪中有三种基因型:AB、BB、AA,其中A等位基因为优势等位基因,新山西黑猪中也存在AB、BB、AA三种基因型,且B等位基因为优势等位基因。群体遗传学分析得出,晋汾白猪和新山西黑猪中MyoG基因多态性位点均不符合Hardy-Weinberg平衡(p<0.05);晋汾白猪的香农指数为0.6928,新山西黑猪的香农指数为0.6903,说明晋汾白猪的遗传多态性高于新山西黑猪。用SAS8.1软件进行基因型分布差异分析,MyoG基因多态位点在晋汾白猪和新山西黑猪中基因型分布差异极显著(χ2=36.2080,p<0.0001)。通过分析两个猪种MyoG基因的多态性,为提高猪肉肉质和猪的人工选育提供依据。